WESTBL-RO

蛋白印迹封闭试剂，溶液

solution, sufficient for 10 blots (11921673001 [100 cm²]), sufficient for 60 blots (11921681001 [100 cm²])

• 别名: 蛋白印迹封闭液
• 分類程式碼代碼: 12352200

属性

• 形狀: solution
• 品質等級: 100
• 用途: sufficient for 10 blots (11921673001 [100 cm²]); sufficient for 60 blots (11921681001 [100 cm²])
• 包裝: pkg of 100 mL (11921673001); pkg of 6 × 100 mL (11921681001)
• 製造商／商標名: Roche
• 儲存溫度: 2-8°C

说明

應用

在蛋白质印迹实验和免疫荧光染色期间，Western Blocking Reagent可用作通用封闭液。该试剂用于膜封闭、膜洗涤和稀释检测抗体等步骤中。

品質

每个批次都经过功能测试（斑点印迹）。

外觀

Western Blocking Reagent（Western 封闭液）是一种 10x 浓缩液，它含有 10％ 纯化的酪蛋白，溶解于马来酸缓冲液中。

準備報告

工作溶液：制备工作溶液

• Tris 缓冲液（TBS），pH 7.5

在 800 ml 双蒸水中添加 6.05g Tris 碱（50mM）和 8.76g 氯化钠（150mM），并用约 9.5 ml 1M 盐酸调节 pH 值至 7.5。然后用双蒸水稀释至 1L。在 2-8°C 下，TBS 可稳定储存 3 个月。
注意：叠氮化钠对 POD 有抑制作用，因此在使用 POD 复合物时，不得将叠氮化钠用作抗菌剂。

• TBS-Tween（TBST）

洗涤缓冲液 1：将 1 ml Tween 20 溶于 1L TBS 中。在 2-8°C 下，TBST 可稳定储存 3 个月。
注意：0.1％ Tween 20 适用于大多数应用，但具体取决于所用的膜和抗体 - 不同的表面活性剂（如SDS、Triton X-100 和 Nonidet P40），以及表面活性剂浓度在 0.01 至 1％ 之间可以产生更好的结果。

• 封闭液（1％）

使用 90ml TBS 稀释 10ml Western 封闭液（10x 浓缩液）。在 2-8°C 下，封闭液可储存 1 个月。
注意：叠氮化钠对 POD 有抑制作用，因此在使用 POD 复合物时，不得将叠氮化钠用作抗菌剂。

• 封闭液（0.5％）

使用 50ml TBS 溶液稀释 50ml 封闭液（1％）。

• 抗体溶液

所有抗体的稀释液和孵育液是封闭液（0.5％）（用 TBS 溶液稀释）（见上文）。为了让检测效果达到最佳状态，我们建议在进行蛋白质印迹实验之前，先优化一抗和二抗的稀释浓度。（首先使用稀释 3 至 4 倍的一抗和恒定浓度的二抗。然后选择最合适的一抗稀释液，并以相同的方式优化二抗浓度。）
注意：封闭液的浓度是改善蛋白质印迹信噪比的重要参数。如果优化了抗体浓度之后，背景仍然较高，则在抗体孵育和洗涤步骤期间将封闭液的浓度从 0.5％ 增加至 1％。如果即便延长了抗体孵育时间，信号仍然较弱，则在抗体孵育和洗涤步骤期间将封闭液的浓度也从 0.5％ 降低至 0.1％。

其他說明

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

安全信息

• 儲存類別代碼: 12 - Non Combustible Liquids
• 水污染物質分類（WGK）: WGK 1
• 閃點（°F）: does not flash
• 閃點（°C）: does not flash