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Merck
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文件

PFHYS1008

Millipore

Millicell® HY 多层组织培养瓶

T-1000, 5 layer, 200-300 mL, sterile, vented cap, Tissue Culture (TC)-treated surface

别名:

多层烧瓶, 组织培养, 细胞培养, 细胞培养瓶

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About This Item

分類程式碼代碼:
41104923
eCl@ss:
32011202
NACRES:
NB.22

材料

high-density polyethylene cap
polystyrene flask

品質等級

無菌

sterile; γ-irradiated

特點

5 layer

包裝

pack of 8

製造商/商標名

Millicell®

參數

45 °C max. temp.

技術

cell culture | mammalian: suitable

高度

51 mm , excluding cap
74 mm , including cap

長度

22.2 cm

寬度

12 cm

表面積

1000 cm2

有效容積

200-300 mL

結合類型

Tissue Culture (TC)-treated surface

運輸包裝

ambient

準備報告

  1. 要进行细胞播种,在Millicell HY T-1000烧瓶中加入所需的生长培养基。
  2. 添加所需数量的细胞以达到典型的播种密度。
  3. 将细胞和培养基混合,抬起烧瓶的末端,上下移液几次,直到达到均匀的悬浮。注意:未能充分将细胞混合到均匀的悬浮液中可能导致细胞在Millicell HY烧瓶各层之间分布不均匀。
  4. 将烧瓶侧放,使液体体积在各层烧瓶中均匀平衡。
  5. 倾斜烧瓶的末端,以划分每层烧瓶的液体体积。
  6. 放下烧瓶,使细胞悬浮液均匀地散布在每一层的整个表面。
  7. 根据体积的不同,可能需要摇动烧瓶的所有四个角,以确保整个表面湿润。注意:如果在润湿过程中任何一层的液体体积发生变化(例如,液体从顶层溢出到下层),重复步骤4–6以确保液体在所有层之间均匀分布。
  8. 当运输到培养箱时,将烧瓶放回垂直位置。将烧瓶平放于培养箱中(如第6步),在适当的条件下培养细胞。
  9. 如果需要交换培养基,从Millicell HY T-1000烧瓶中抽吸或倒出培养基。注意:由于Millicell烧瓶的表面积较大,每次抽吸后可能需要让烧瓶侧立几分钟,以便所有残留液体汇集到一个共同的点,以便第二次抽吸完全除去剩余液体。
  10. 加入适量的新鲜培养基,重复第4–8步。
  11. 要收获细胞,按第9步所述移除培养基。
  12. 向烧瓶中加入所需量的适当洗涤溶液(例如,PBS或0.02% EDTA),重复第4–7步。
  13. 按照第9步除去洗涤液。
  14. 根据首选方案添加所需量的解离酶(例如,0.25%胰蛋白酶/EDTA或等效物),重复第4–8步,并孵育。每cm2所需的解离酶体积不需要从T型烧瓶方案变化。注意:在显微镜下观察,确保所有细胞与烧瓶表面完全分离。不能使细胞与培养表面完全分离(使所有细胞自由漂浮)可能导致细胞产量降低。
  15. 如果使用胰蛋白酶,加入所需体积的灭活溶液,如含血清的培养基。
  16. 如第9步所述,通过吸气或倒吸方法收集细胞。

法律資訊

Millicell is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

儲存類別代碼

10-13 - German Storage Class 10 to 13


分析证书(COA)

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