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Roche

KAPA SYBR® FAST

suitable for qPCR, 2 ×, Universal

Synonyme(s) :

SYBR, qPCR

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About This Item

Code UNSPSC :
41106300
Nomenclature NACRES :
NA.55

Niveau de qualité

Utilisation

sufficient for 100 reactions
sufficient for 1000 reactions
sufficient for 500 reactions
sufficient for 5000 reactions

Durée de conservation

≤12 mo.

Caractéristiques

dNTPs included
hotstart

Conditionnement

kit of 1 mL (100 x 20 μL rxn; KK4600)
kit of 10 mL (1000 x 20 μL rxn; KK4602)
kit of 5 mL (500 x 20 μL rxn; KK4601)
kit of 50 mL (5000 x 20 μL rxn; KK4618)

Fabricant/nom de marque

Roche

Concentration

2 ×

Technique(s)

qPCR: suitable

Entrée

purified DNA

Compatibilité

for use with Agilent Mx3000P
for use with Agilent Mx3005P
for use with Agilent Mx4000
for use with Applied Biosystems® 5700
for use with Applied Biosystems® 7000
for use with Applied Biosystems® 7300
for use with Applied Biosystems® 7500
for use with Applied Biosystems® 7700
for use with Applied Biosystems® 7900HT
for use with Applied Biosystems® ViiA 7
for use with QuantStudio
for use with StepOne
for use with StepOnePlus

Méthode de détection

SYBR® Green

Température de stockage

−20°C

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Description générale

Les kits pour qPCR KAPA SYBR® FAST contiennent la première ADN polymérase créée par évolution dirigée pour mieux tolérer l'inhibition du colorant SYBR Green I.

Grâce une plus grande robustesse, une meilleure processivité et une plus grande rapidité, les kits pour qPCR KAPA SYBR FAST permettent d'obtenir une efficacité d'amplification élevée et reproductible, pour une meilleure précision de la quantification relative lors de l'analyse de l'expression génique. Conçus pour réaliser des PCR en temps réel optimales en conditions stringentes, les kits pour qPCR KAPA SYBR FAST offrent des performances bien supérieures, qu'il s'agisse du rapport signal sur bruit (fluorescence), du cycle de quantification (Cq), de la linéarité ou de la sensibilité.

Application

Le produit KAPA SYBR® FAST a été utilisé dans le cadre de :
  • L'expression génique
  • La validation de l'inactivation (knockdown) de gènes
  • La validation de puces à ADN
  • L'analyse ChIP
  • La détection de cibles en faible nombre
  • La quantification absolue de banques de NGS (séquençage de nouvelle génération)
  • La PCR quantitative en temps réel

Caractéristiques et avantages

Quantification plus précise des variations de l′expression génique
  • Grande efficacité de réaction (entre 95 et 105 %) qui améliore l′exactitude et la reproductibilité.
  • Efficacité non biaisée sur une large gamme de taux de GC et de longueurs d′amplicon.

Détection plus répétable des cibles en faible nombre et difficiles à analyser
  • Amélioration des résultats de la capacité de traitement dans les premiers scores Cq.
  • Meilleure détection par fluorescence de divers composés cibles riches en AT et en GC.
  • Nouvelle enzyme résistant à l′inhibition de SYBR.

Réalisation d′analyses PCR en temps réel complètes en seulement 40 minutes
  • Réduction de 55 % du temps d'analyse avec le protocole à cycles rapides.
  • Maintien de bonnes performances lors du basculement des protocoles standard aux protocoles rapides.

Remarques :
  • Ce kit contient une enzyme modifiée, optimisée pour la qPCR associée à la chimie du colorant SYBR Green I.
  • Le mélange maître 2X contient un tampon exclusif. Combiné à la nouvelle enzyme, il permet d′améliorer l′efficacité de l′amplification des cibles aussi bien riches en GC qu′en AT.
  • Une dénaturation initiale de 20 secondes à 95 °C suffit pour activer l′enzyme. Il est recommandé d′appliquer une dénaturation initiale de 3 min pour les matrices complexes.
  • Pour un cycle en 3 étapes, prévoyez 20 secondes pour l′hybridation des amorces et 1 seconde pour l′allongement et l′acquisition de données à 72 °C.
  • Limitez le volume réactionnel à 25 μl maximum.

Qualité

Tous les composants de ce kit sont soumis à un contrôle qualité fonctionnel exigeant, ne présentent aucune activité endonucléase/exonucléase contaminante détectable et répondent à des critères stricts en matière de contamination par l'ADN.

Notes préparatoires

Veillez toujours à ce que les composants soient complètement décongelés et bien mélangés avant utilisation. Le mélange maître pour qPCR KAPA SYBR® FAST (concentré 2 ×) peut ne pas se solidifier à la congélation, même lors d'un stockage à -20 °C.

Le colorant SYBR Green I contenu dans le mélange maître pour qPCR KAPA SYBR FAST (concentré 2 ×) et les colorants ROX/fluorescéine (selon la configuration du kit) sont sensibles à la lumière. Une exposition prolongée à la lumière directe entraînera une perte de l'intensité du signal de fluorescence.

Le mélange maître pour qPCR KAPA SYBR FAST (concentré 2 ×) supporte jusqu'à 30 cycles de congélation/décongélation. Veillez à conserver tous les réactifs à l'abri de la lumière et à -20 °C lorsque vous ne les utilisez pas. Lorsqu'ils sont dans l'obscurité, les réactifs sont stables pendant au moins une semaine à 4 °C et ils peuvent être conservés à cette température pour une utilisation à court terme, sous réserve qu'ils soient protégés de toute contamination par des microbes et/ou des nucléases.

Autres remarques

Produit réservé aux activités de recherche. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.

Informations légales

Applied Biosystems is a registered trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries
QuantStudio is a trademark of IROA Technologies LLC
SYBR is a registered trademark of Life Technologies
StepOne is a trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries
StepOnePlus is a trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries

Composants de kit seuls

Réf. du produit
Description

  • KAPA SYBR® FAST DNA Polymerase

  • Reaction buffer

  • dNTPs

  • SYBR® Green I dye

  • MgCl2 2.5 mM

  • ROX High Reference Dye (50X)

  • ROX Low Reference Dye (50X)

  • Stabilizers

Afficher tout (8)

Pictogrammes

Health hazard

Mention d'avertissement

Warning

Mentions de danger

Classification des risques

STOT SE 2

Code de la classe de stockage

12 - Non Combustible Liquids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 1

Point d'éclair (°F)

does not flash

Point d'éclair (°C)

does not flash


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