T7326

Thrombin aus Rinderplasma

≥60 NIH units/mg protein (biuret)

• Synonym(e): Faktor IIa
• CAS-Nummer: 9002-04-4
• EC-Nummer: 3.4.21.5 (BRENDA, IUBMB)
• MDL-Nummer: MFCD00166053
• UNSPSC-Code: 12352204
• NACRES: NA.54

Eigenschaften

• Form: lyophilized powder
• Qualitätsniveau: 200
• Spezifische Aktivität: ≥60 NIH units/mg protein (biuret)
• Zusammensetzung: Protein, ≥50%
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Thrombin ist die finale Koagulationsprotease bei der Hämostase mit koagulationsfördernder und koagulationshemmender Wirkung.[1] Thrombin umfasst eine A-Kette und eine B-Kette mit der katalytischen Tasche. Die C-terminale Region weist eine Fibrinogenerkennungsstelle (FRS) und eine Heparinbindungsstelle (HBS) auf.[2] Die Hauptfunktion von Thrombin besteht in der Spaltung von Fibrinogen zu Fibrin.[3] Es koordiniert die Gerinnungskaskade und koordiniert mit proteaseaktivierten Rezeptoren (PAR), um physiologische Funktionen zu regulieren. Ein hoher Thrombinspiegel löst eine neurotoxische Wirkung in dopaminergen Neuronen aus und trägt zur Progression von Parkinson bei.[4] Eine Veränderung des Thrombinspiegels führt bei Multipler Sklerose zu einer entsprechenden Anpassung des Koagulationswegs.[5] Patienten mit koronarer Herzkrankheit (KHK) weisen einen erhöhten Thrombinspiegel auf.[6]

Anwendung

Thrombin aus Rinderplasma kann wie folgt verwendet werden:

• bei der Erzeugung von Fibrin aus in Mikrobläschen eingebettetem Fibrinogen[7]
• für die Spaltung von Hydrogenase-Reifungsprotein (HypF-N) aus dem Nickelharz[8]

als Revitalisierungsmodell zur Nachahmung der Bluterzeugung im Wurzelkanal[9]

Thrombin wird für die stellenspezifische Spaltung von rekombinanten Fusionsproteinen mit einer zugänglichen Thrombin-Erkennungsstelle zum Entfernen von Affinitäts-Tags verwendet. Thrombin wurde in einer Studie zur Untersuchung von Gerinnungsabnormalitäten bei akuter Leberinsuffizienz eingesetzt. [10]

Biochem./physiol. Wirkung

Serinprotease, die selektiv Arg-Gly-Bindungen in Fibrinogen spaltet, um Fibrin und Fibrinopeptide A und B zu bilden.

Einheitendefinition

Die Aktivität wird in NIH-Einheiten ausgedrückt, die sich aus einem direkten Vergleich mit einem NIH-Thrombin-Referenzstandard ergeben.

Physikalische Form

Lyophilisiertes Pulver mit Natriumchlorid und Tris-HCl, pH-Wert 7,0

Angaben zur Herstellung

Traditionelle Thrombin-Produkte werden mit Thromboplastin aus dem Rinderhirn aktiviert, wogegen T7326 mit Thromboplastin aus der Rinderlunge aktiviert wird. In der Aufbereitung sind keine Rinderhirnprodukte enthalten.

Hinweis zur Analyse

Beim NIH-Assay werden 0,2 ml verdünntes Plasma (1:1 mit Kochsalzlösung) als Substrat und 0,1 ml der Thrombinprobe (stabilisiert in einer 1%igen gepufferten Albuminlösung) auf Basis einer modifizierten Biggs-Methode analysiert. Zur Bestimmung der Thrombinkonzentrationen werden nur Gerinnungszeiten im Bereich von 15 bis 25 Sekunden verwendet.

Die Aktivität wird in NIH-Einheiten ausgedrückt, die aus einem direkten Vergleich mit einem NIH-Thrombin-Referenzstandard (Charge K) gewonnen werden

Sonstige Hinweise

Für weitere Informationen siehe thrombin at www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 3
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable
• Persönliche Schutzausrüstung: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)