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Merck

P6556

Sigma-Aldrich

Proteinase K aus Tritirachium album

lyophilized powder, ≥30 units/mg protein

Synonym(e):

Endopeptidase K

Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise


About This Item

CAS-Nummer:
EC-Nummer:
EG-Nummer:
MDL-Nummer:
UNSPSC-Code:
12352204
eCl@ss:
32160410
NACRES:
NA.54

Form

lyophilized powder

Qualitätsniveau

Spezifische Aktivität

≥30 units/mg protein

Mol-Gew.

28.93 kDa

Methode(n)

DNA extraction: suitable

Löslichkeit

H2O: soluble 1 mg/mL, clear, colorless

Fremdaktivität

Dnase ≤30 Kunitz units/mg solid
RNase ≤0.003 Kunitz units/mg solid

Versandbedingung

wet ice

Lagertemp.

−20°C

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Anwendung

Nützlich zur proteolytischen Inaktivierung von Nukleasen bei der Isolierung von DNA und RNA.
Entfernt Endotoxine, die an kationische Proteine wie Lysozym und Ribonuklease A binden.
Berichten zufolge nützlich für die Isolierung von Leber-, Hefe- und Mungbohnen-Mitochondrien
Bestimmung der Enzymlokalisierung auf Membranen
Behandlung von Paraffinschnitten zur Freilegung von Antigenbindungsstellen zur Antikörpermarkierung.
Verdauung von Proteinen aus Hirngewebeproben für Prionen in der TSE-Forschung.
Produkt P6556 wird als lyophilisiertes Pulver geliefert. Produkt P6556 wurde zum Abbau des Proteins der menschlichen Linse eingesetzt. Protease-Footprinting durch Verdau mit Proteinase K kann Protein-Protein-Oberflächenwechselwirkungen zeigen. Das Enzym von Sigma wurde für den Prähybridisierungsschritt bei Hühnerembryonen verwendet. Es wurde auch zur Anreicherung von PrPSc, einem Prionprotein aus Schaf-, Hamster- und Maus-Scrapie-Proben (Traberkrankheit), verwendet.
Proteinase K ist zur proteolytischen Inaktivierung von Nukleasen bei der Isolierung von DNA und RNA geeignet.
Sie wird verwendet, um Endotoxine zu entfernen, die an kationische Proteine wie Lysozyme und Ribonuklease A gebunden sind.
Sie ist zur Isolierung von Mitochondrien aus Leber, Hefe und Mungbohnen geeignet
und dient dazu, die Lokalisierung von Enzymen auf Membranen zu ermitteln.
Sie wird zur Behandlung von Paraffinschnitten genutzt, um die Antigenbindungsstellen für die Antikörpermarkierung freizulegen, und
für den Proteinverdau in Gehirngewebeproben für Prionen in der Forschung über TSE (Transmissible Spongiform Encephalopathies) eingesetzt. Produkt P6556 wird als lyophilisiertes Pulver geliefert. Produkt P6556 wurde zum Abbau des Proteins der menschlichen Linse eingesetzt.

Biochem./physiol. Wirkung

Proteinase K weist eine weite Spezifität auf und baut selbst im nativen Zustand viele Proteine ab. In erster Linie spaltet sie die Peptidbindung nahe der Carboxylgruppe von aliphatischen und aromatischen Aminosäuren mit blockierten α-Aminogruppen. Der optimale pH-Wert liegt zwischen 7,5 und 9,0 und der isoelektrische Punkt beträgt 8,9. Ca2+ (1–5 mM) ist für ihre Aktivierung erforderlich. Proteinase K wird von Diisopropylfluorphosphat (DIFP) oder Phenylmethylsulfonylfluorid (PMSF) gehemmt.
Proteinase K ist eine stabile und hochreaktive Serinprotease. Ergebnisse von Kristall- und Molekularstrukturstudien lassen darauf schließen, dass das Enzym zur Subtilisin-Familie mit einer katalytischen Triade (Asp39-His69-Ser224) im aktiven Zentrum gehört. Es ist in einer Reihe von Umgebungen stabil: pH, Puffersalze, Detergenzien (SDS) und Temperatur. In Gegenwart von 0,1–0,5 % SDS bleibt Proteinase K aktiv und verdaut zahlreiche Proteine und Nukleasen in DNA-Präparationen, ohne die Integrität der isolierten DNA zu beeinträchtigen.

Einheitendefinition

Eine Einheit hydrolysiert harnstoffdenaturiertes Hämoglobin und erzeugt eine Färbung, die 1,0 μmol Tyrosin pro Minute bei pH 7,5 und 37 °C (Farbe vom Folin-Ciocalteu-Reagens) entspricht.

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Produkt-Nr.
Beschreibung
Preisangaben

Piktogramme

Health hazardExclamation mark

Signalwort

Danger

Gefahreneinstufungen

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

Zielorgane

Respiratory system

Lagerklassenschlüssel

11 - Combustible Solids

WGK

WGK 1

Flammpunkt (°F)

Not applicable

Flammpunkt (°C)

Not applicable

Persönliche Schutzausrüstung

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves


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Multi-color whole-mount in situ hybridization is a powerful technique for comparing the spatial expression patterns of two or more genes in developing embryos. We have developed an amplified triple-label whole-mount fluorescence in situ hybridization (FISH) protocol that permits detection of
H Hilz et al.
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Enzymes of Molecular Biology
M.M. Burrell
Methods in Molecular Biology, 16, 307-307 (1993)

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