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MABC604

Sigma-Aldrich

Anti-MLKL-Antikörper, Klon 3H1

clone 3H1, from rat

Synonym(e):

Mixed lineage kinase domain-like protein, MLKL

Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise


About This Item

UNSPSC-Code:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41

Biologische Quelle

rat

Qualitätsniveau

Antikörperform

purified antibody

Antikörper-Produkttyp

primary antibodies

Klon

3H1, monoclonal

Speziesreaktivität

mouse

Methode(n)

immunocytochemistry: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable

Isotyp

IgG

NCBI-Hinterlegungsnummer

UniProt-Hinterlegungsnummer

Versandbedingung

wet ice

Posttranslationale Modifikation Target

unmodified

Angaben zum Gen

mouse ... Mlkl(74568)

Allgemeine Beschreibung

MLKL (mixed lineage kinase domain-like protein) wird vom Gen MLKL codiert; dieses interessante Protein ist erforderlich für die Ausführung programmierter Nekrose oder Nekroptose, beispielsweise in Reaktion auf TNF-α-induzierte Nekrose. MLKL ist ein Bestandteil des „Nekrosoms“, also des Multiproteinkomplexes, der den Tumornekrosefaktor (TNF)-induzierten Zelltod durch Nekroptose auslöst. Für die von TNF-α induzierte programmierte Nekrose sind auch die Aktivitäten der Rezeptor-interagierenden Serin-/Threonin-Kinasen RIP1 und RIP3 erforderlich, die ebenfalls direkt mit dem Protein MLKL interagieren. Für die Nekroptose ist RIP3 eine essenzielle vorgeschaltete Kinase. Die Pseudokinase MLKL fungiert als Substrat von RIP3 für die Vermittlung nachgeschalteter Signalwege; bei einer Komplexbildung mit MLKL wird der RIP3-MLKL-Komplex mittels AMP-PNP stabilisiert und geht in eine inaktive Konformation über.

Immunogen

Epitop: Brace-Region.
KLH-konjugiertes lineares Peptid, das einer Sequenz der Helix-Linker-Region (Brace) entspricht, die das N-Terminal mit der Pseudokinase-Domäne von Maus-MLKL verbindet (Hildebrand, J.M., et al. (2014). Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 111(42):15072–15077; Murphy, J.M., et al. (2013). Immunity. 39(3):443–453).

Anwendung

Dieser Anti-MLKL-Antikörper, Klon 3H1, ist zur Verwendung mit Immunzytochemie, Immunpräzipitation und Western Blot für den Nachweis von MLKL validiert.
Immunzytochemische Analyse: Eine repräsentative Charge wies MLKL in dermalen Fibroblasten der Maus (MDF) des Wildtyps nach, nicht aber bei Mlkl-/- Mäusen (mit freundlicher Genehmigung von Prof. James M. Murphy, Walter and Eliza Hall Institute, Australien).

Analyse mittels Immunpräzipitation: Mit einer repräsentativen Charge wurde MLKL aus einem löslichen Extrakt dermaler Fibroblasten von Mlkl-/- Mäusen immungefällt, die eine Doxycyclin-induzierbare Maus-MLKL-Expression des Wildtyps nur nach, nicht aber vor der Behandlung mit Doxycyclin enthielten (Murphy, J.M., et al. (2013). Immunity. 39(3):443–453).

Western-Blot-Analyse: Mit einer repräsentativen Charge wurde die durch eine Behandlung mit Q-VD-OPh (TSQ; Best.- Nr. 551476) induzierte Translokation des N-terminalen MLKL-Fragments von Maus und Pferd (a.a. 1–180 bzw. 1–189) detektiert, das in dermalen Fibroblasten von Mlkl-/- Mäusen exogen exprimiert wird (Tanzer, M.C., et al. (2016). Cell Death Differ. Im Druck).

Western-Blot-Analyse: Eine repräsentative Charge wies MLKL in menschlichen HT-29- und U937-Zellen nach (Tanzer, M.C., et al. (2015). Biochem. J. 471(2):255–265).

Western-Blot-Analyse: Repräsentative Chargen wiesen die MLKL-Membrantranslokation in dermalen Fibroblasten von Mäusen (MDF) nach einer Behandlung mit Q-VD-OPh (TSQ; Best.- Nr. 551476) nach (Tanzer, M.C., et al. (2015). Biochem. J. 471(2):255–265; Hildebrand, J.M., et al. (2014). Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 111(42):15072–15077).

Western-Blot-Analyse: Repräsentative Chargen wiesen die MLKL-Expression in L292-Mausfibroblasten sowie in dermalen Fibroblasten der Maus (MDF), im embryonalen Fibroblasten der Maus (MEF) und in Knochenmarksmakrophagen (BMDM) von Mäusen des Wildtyps nach, nicht aber bei Mlkl-/- Mäusen (Cook, W.D. et al., 2014). Cell Death Differ. 21(10):1600–1612; Murphy, J.M., et al. (2013). Immunity. 39(3):443–453).

Western-Blot-Analyse: Eine repräsentative Charge wies rekombinantes Maus-MLKL in voller Länge sowie a.a. 1–180 und a.a. 124–464, nicht aber a.a. 1–125 oder a.a. 179–464 MLKL-Fragmente nach (Hildebrand, J.M., et al. (2014). Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 111(42):15072–15077).

Western-Blot-Analyse: Eine repräsentative Charge wies eine MLKL-Expression in allen getesteten Geweben von Wildtyp-Mäusen mit Ausnahme des Gehirns nach, während kein Gewebe von Mlkl-/- Mäusen eine Zielbande ergab (Murphy, J.M., et al. (2013). Immunity. 39(3):443–453).

Qualität

Beurteilt mittels Western Blot in Herzgewebe-Lysat von Mäusen.

Western-Blot-Analyse: 0,5 µg/ml dieses Antikörpers wiesen MLKL in 10 µg Herzgewebe-Lysat von Mäusen nach.

Zielbeschreibung

~52 kDa gemessen. 54,48/30,28 (Isoform 1/2 des Menschen) und 54,32/53,38 kDa (Isoform 1/2 der Maus) berechnet. In manchen Zelllysaten können uncharakterisierte Bänder auftreten.

Physikalische Form

Aufgereinigtes Ratten-IgG in Puffer mit 0,1 M Tris-Glycin (pH 7,4); 150 mM NaCl mit 0,05 % Natriumazid.
Format: Aufgereinigt

Sonstige Hinweise

Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.

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Empfehlung

Produkt-Nr.
Beschreibung
Preisangaben

Lagerklassenschlüssel

12 - Non Combustible Liquids

WGK

WGK 1

Flammpunkt (°F)

Not applicable

Flammpunkt (°C)

Not applicable


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RIPK1- and RIPK3-induced cell death mode is determined by target availability.
Cook, WD; Moujalled, DM; Ralph, TJ; Lock, P; Young, SN; Murphy, JM; Vaux, DL
Cell Death and Differentiation null
D M Moujalled et al.
Cell death & disease, 5, e1086-e1086 (2014-03-01)
Necroptosis is a mechanism by which cells can kill themselves that does not require caspase activity or the presence of the pro-apoptotic Bcl-2 family members Bax or Bak. It has been reported that RIPK3 (receptor interacting protein kinase 3) activates
M C Tanzer et al.
Cell death and differentiation, 23(7), 1185-1197 (2016-02-13)
The pseudokinase, MLKL (mixed-lineage kinase domain-like), is the most terminal obligatory component of the necroptosis cell death pathway known. Phosphorylation of the MLKL pseudokinase domain by the protein kinase, receptor interacting protein kinase-3 (RIPK3), is known to be the key
A V Jacobsen et al.
Cell death & disease, 7, e2051-e2051 (2016-01-19)
Necroptosis is a caspase-independent form of regulated cell death that has been implicated in the development of a range of inflammatory, autoimmune and neurodegenerative diseases. The pseudokinase, Mixed Lineage Kinase Domain-Like (MLKL), is the most terminal known obligatory effector in
Sefi Zargarian et al.
PLoS biology, 15(6), e2002711-e2002711 (2017-06-27)
Necroptosis is a regulated, nonapoptotic form of cell death initiated by receptor-interacting protein kinase-3 (RIPK3) and mixed lineage kinase domain-like (MLKL) proteins. It is considered to be a form of regulated necrosis, and, by lacking the "find me" and "eat

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