MAB345M
Anti-O4-Antikörper, Klon 81
clone 81 (mAB O4), Chemicon®, from mouse
Synonym(e):
Sulfatide
About This Item
Empfohlene Produkte
Biologische Quelle
mouse
Qualitätsniveau
100
300
Antikörperform
purified immunoglobulin
Antikörper-Produkttyp
primary antibodies
Klon
81 (mAB O4), monoclonal
Speziesreaktivität
rat, mouse, human, chicken
Hersteller/Markenname
Chemicon®
Methode(n)
immunocytochemistry: suitable
immunohistochemistry: suitable
Isotyp
IgM
Eignung
not suitable for Western blot
not suitable for immunoprecipitation
Versandbedingung
wet ice
Posttranslationale Modifikation Target
unmodified
Spezifität
Anwendung
Immunzytochemie: 10–20 μg/mL auf Zellen, die mit 4 % Paraformaldehyd fixiert wurden.
Hinweis: O4 ist ein Sulfatid, das mit organischen Lösungsmitteln aus der Membran herausgelöst werden kann; Aceton und Methanol sollten nicht zur Fixierung verwendet werden.
Optimale Arbeitsverdünnungen müssen vom Anwender bestimmt werden.
Immunhistochemie-Protokoll
1. Schnitte aus unfixiertem, schockgefrorenem Gewebe vorbereiten. Die Schnitte sollten 4–5 μm dick sein. Die Schnitte auf Objektträger legen.
2. Die einzelnen Objektträger drei Mal jeweils 5 Minuten lang bei Raumtemperatur in PBS reinigen.
3. Die unspezifischen Bindungsstellen blockieren. Dazu die Schnitte in einer feuchten Kammer mit 5 % FCS bei Raumtemperatur 30 Minuten lang inkubieren.
4. Die Objektträger wie in Schritt 2 beschrieben reinigen.
5. Die Schnitte mit einer ausreichenden Menge MAB345 (10–20 μg/mL in PBS) bedecken und eine Stunde lang in einer feuchten Kammer bei 37 °C inkubieren.
6. Die Objektträger drei Mal kurz mit PBS reinigen. Sorgfältig um den zu färbenden Bereich herum abtrocknen.
7. Die Schnitte mit einer ausreichenden Menge Anti-Maus-IgM-Fluorescein*-Lösung bedecken und eine Stunde lang in einer feuchten Kammer bei 37°C inkubieren.
8. Die Objektträger wie in Schritt 6 beschrieben reinigen.
9. Die Schnitte mit einem geeigneten Einbettmedium bedecken, mit einem Deckglas abdecken und fluoreszenzmikroskopisch untersuchen.
*Es kann auch HRP oder ABC verwendet werden.
Optimale Ergebnisse können durch Titrierung der primären und sekundären Antikörper erzielt werden
Immunzytochemie
1. Die Präparate mit 4 % Paraformaldehyd (in PBS) 10 Minuten lang bei Raumtemperatur fixieren. O4 ist ein Sulfatid, das mit organischen Lösungsmitteln aus der Membran herausgelöst werden kann; Aceton und Methanol sollten nicht zur Fixierung verwendet werden.
2. Die einzelnen Objektträger drei Mal jeweils 5 Minuten lang bei Raumtemperatur in PBS reinigen.
3. Die unspezifischen Bindungsstellen blockieren. Dazu die Schnitte in einer feuchten Kammer mit 5 % FCS bei Raumtemperatur 30 Minuten lang inkubieren.
4. Die Objektträger wie in Schritt 2 beschrieben reinigen.
5. Die Schnitte mit einer ausreichenden Menge MAB345 (10–20 μg/mL in PBS) bedecken und eine Stunde lang in einer feuchten Kammer bei 37 °C inkubieren.
6. Die Objektträger drei Mal kurz mit PBS reinigen. Sorgfältig um den zu färbenden Bereich herum abtrocknen.
7. Die Schnitte mit einer ausreichenden Menge Anti-Maus-IgM-Fluorescein*-Lösung bedecken und eine Stunde lang in einer feuchten Kammer bei 37°C inkubieren.
8. Die Objektträger wie in Schritt 6 beschrieben reinigen.
9. Die Schnitte mit einem geeigneten Einbettmedium bedecken, mit einem Deckglas abdecken und fluoreszenzmikroskopisch untersuchen.
Hinweis: Die Präparate während der Färbung nicht austrocknen lassen.
Physikalische Form
Hinweis zur Analyse
Kortikale Stammzellen der Ratte oder Zellkulturen des Gehirns von Mausembryonen von Tag 3
Sonstige Hinweise
Rechtliche Hinweise
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Lagerklassenschlüssel
10 - Combustible liquids
WGK
WGK 2
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