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Kompetente Origami-B(DE3)pLysS-Zellen – Novagen

Escherichia coli, rod shaped

• UNSPSC-Code: 41106202
• NACRES: NA.81

Eigenschaften

• Produktbezeichnung: Kompetente Origami-B(DE3)pLysS-Zellen – Novagen, Origami B host strain derived from a lacZY mutant of BL21 to enable precise control of expression levels using IPTG. T7 lysozyme expression suppresses basal T7 expression.
• Biologische Quelle: Escherichia coli
• Qualitätsniveau: 100
• Hersteller/Markenname: Novagen^®
• Lagerbedingungen: OK to freeze
• Wachstumsmodus: adherent or suspension
• Morphologie: rod shaped
• Methode(n): microbiological culture: suitable
• Zelltransformation: transformation efficiency: >2×10⁶ cfu/μg
• Versandbedingung: dry ice
• Lagertemp.: −70°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Genotyp: F^-ompT hsdS_B(r_B^- m_B^-) gal dcm lacY1 ahpC (DE3) gor522::Tn10 trxB pLysS (Cam^R, Kan^R, Tet^R)





Dieses Produkt enthält genetisch veränderte Organismen (GVO). In der EU sind GVO durch die Richtlinien 2001/18/EG und 2009/41/EG des Europäischen Parlaments und Rates und ihre nationale Umsetzung in den Mitgliedstaaten reguliert. Wir sind aufgrund dieser Vorschriften gesetzlich verpflichtet, bestimmte Informationen zu Ihrer Person und zu der Einrichtung, in der die GVO verwendet werden, anzufordern. Das Endverbleibserklärungsformular (EVE-Formular) ist hier here zu finden.

Die Origami-B-Wirtsstämme tragen dieselben Mutationen in trxB und gor wie die ursprünglichen Origami-Stämme, mit der Ausnahme, dass sie von einer lacZY-Mutante von BL21 abgeleitet sind, um eine präzise Kontrolle des Expressionsniveaus durch Anpassung der IPTG-Konzentration zu ermöglichen. Somit vereinen die Origami-B-Stämme die wünschenswerten Eigenschaften von BL21-, Tuner- und Origami-Stämmen in einem Stammhintergrund. Die Mutationen in trxB und gor sind auf Kanamycin bzw. Tetracyclin selektierbar; daher können diese Stämme nicht mit Plasmiden verwendet werden, die nur mit Kanamycin oder Tetracyclin selektiert werden können. Diese Stämme umfassen auch die lon- und ompT-Defizite von BL21, die die Proteinstabilität erhöhen.

DE3 weist darauf hin, dass der Wirt ein Lysogen von λDE3 ist und daher eine chromosomale Kopie des T7-RNA-Polymerase-Gens enthält, das durch den lacUV5-Promoter kontrolliert wird. Solche Stämme eignen sich zur Herstellung von Protein aus Zielgenen, die in pET-Vektoren kloniert werden, wobei IPTG als Induktor verwendet wird.

pLysS-Stämme exprimieren T7-Lysozym, das die basale Expression von T7-RNA-Polymerase vor der Induktion weiter unterdrückt, wodurch die pET-Rekombinanten, welche Zielproteine codieren, die das Zellwachstum und die Zellviabilität beeinflussen, stabilisiert werden.

Origami-B-Wirtsstamm, der von einer lacZY-Mutante von BL21 abgeleitet wurde, um eine präzise Kontrolle der Expressionsniveaus unter Verwendung von IPTG zu ermöglichen. Die Expression von T7-Lysozym unterdrückt die basale T7-Expression.

Komponenten

0,4 ml1 mlKomponente

•2 × 0,2 ml5 × 0,2 mlKompetente Origami-B(DE3)pLysS-Zellen

•2 × 2 ml4 × 2 mlSOC-Medium

•2 ng2 ngTest-Plasmid

Warnhinweis

Toxizität: Mehrere Toxizitätswerte, siehe MSDS (O)

Rechtliche Hinweise

NOVAGEN is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 10 - Combustible liquids