성장 조절제 – 식물 조직 배양 프로토콜

머크는 식물 세포 배양에 대해 특별한 테스트를 거친 광범위한 식물 성장 조절제를 공급합니다. 각 제품은 물리적 및 화학적 특성을 분석한 다음 분말 배지에 대해 설정된 기준에 따라 생물학적으로 테스트됩니다. 모든 옥신은 체외에서 캘러스 성장 및/또는 뿌리내림을 향상시키기 위해 테스트됩니다. 모든 시토키닌은 싹을 생산하는 자극에 대해 테스트됩니다. 

식물 성장 조절제 용액은 이중으로 된 0.2 µm 필터 유닛을 통해 멸균 여과되어 멸균 용기 내에 보관합니다. 식물 성장 조절제 용액의 각 로트는 미국 약제국 Vol. XXI에 의해 확립된 규격에 따라 멸균율을 테스트하고, 식물 조직 배양 매체에 대해 확립된 기준과 동일한 기준으로 식물 세포 배양에서 생물학적 테스트를 수행합니다.

본 내용은 식물 조직 배양 매체 제조 및 식물 연구 목적으로 실험실 내 사용에만 해당합니다. 성장한 식물에 대한 식물 성장 조절제로 사용하지 마십시오. 약물이 아닙니다. 가정용으로 사용하지 마십시오.

성장 조절제 준비 및 사용

1. 1 mg/mL 원액을 준비하려면 100 mL 부피 플라스크 또는 기타 유리 용기에 식물 성장 조절제를 100 mg 첨가합니다.
2. 용제를 2~5 mL 첨가하여 분말을 녹입니다. 완전히 용해된 후 이중 처리된 용수(제품 W3500번)로 부피를 조절합니다. 용수를 첨가한 상태에서 용액을 저어야 용액 내 물질을 보존할 수 있습니다. 하기 표에서 권장하는 대로 원액을 저장합니다.
3. 원액 1.0 mL를 배양액 1 L에 첨가하고 배양 배지에서 최종 농도 1.0 mg/L의 식물 성장 조절제를 얻습니다(표 1-3).

원액의 부피 = (원하는 균일 농도 X 배지 부피) / 원액 농도

식물 세포 배양 검사 대상 옥신은 일반적으로 0.01~10.0 mg/L 농도의 식물 세포 배양에 사용됩니다. 적절한 농도로 첨가되면 세포의 신장, 조직 팽창, 세포 분열, 부정근 형성, 부정 및 액성 줄기 형성 억제, 캘러스 개시 및 성장, 발아 유도를 조절할 수 있습니다.

식물 세포 배양 검사 대상 시토키닌은 일반적으로 0.1~10.0 mg/L 농도의 식물 세포 배양에 사용됩니다. 시토키닌을 적절한 농도로 첨가하면 세포 분열 조절, 액성 및 부정근 증식 자극, 분화 조절, 뿌리 형성 억제, RNA 합성 활성화, 단백질 및 효소 활동 자극이 이뤄질 수 있습니다.

몰 등가표 및 용액 제조

• 옥신
  
• 시토키닌
  
• 기타 식물 성장 조절제

옥신

		몰 등가		용액 제조
제품명	제품 번호	몰 중량	1 mg/L당 µM	용제	희석액	분말 보관	액상 보관	멸균*	작용 농도 (mg/L)
p-Chlorophenoxyacetic acid(4-CPA)	C0413	186.6	5.36	EtOH	—	RT	2-8 °C	CA	0.1-10.0
2,4-Dichlorophenoxyacetic acid	D7299	221	4.53	—	—	RT	2-8 °C	CA	0.01-6.0
2,4-Dichlorophenoxyacetic acid Sodium salt	D6679	243	4.12	Water	—	RT	2-8 °C	CA	0.01-6.0
Indole-3-acetic acid Free acid(IAA)	I2886	175.2	5.71	EtOH/1N NaOH	Water	-0 °C	-0 °C	CA/F	0.01-3.0
Indole-3-acetic acid Sodium salt	I5148	197.2	5.07	Water	Water	2-8 °C	-0 °C	CA/F	0.01-3.0
Indole-3-acetic acid methyl ester	I9770	189.2	5.29	—	—	2-8 °C	2-8 °C	—	—
Indole-3-acetyl-L-aspartic acid	I9387	290.3	3.45	0.5N NaOH	Water	-0 °C	-0 °C	F	0.01-5.0
Indole-3-butyric acid(IBA)	I5386	203.2	4.90	EtOH/1N NaOH	Water	2-8 °C	-0 °C	CA/F	0.1-10.0
Indole-3-butyric acid Potassium salt(K-IBA)	I7512	241.3	4.14	Water	—	2-8 °C	-0 °C	CA/F	0.1-10.0
alpha-Naphthaleneacetic acid Free acid(NAA)	N0640	186.2	5.37	1N NaOH	Water	RT	2-8 °C	CA	0.1-10.0
beta-Naphthoxyacetic acid Free acid(NOA)	N3019	202.2	4.95	1N NaOH	Water	RT	2-8 °C	CA	0.1-10.0
Phenylacetic acid(PAA)	P6061	136.2	7.34	EtOH	—	RT	2-8 °C	CA/F	0.1-50.0
Picloram	P5575	241.5	4.14	DMSO	—	RT	2-8 °C	CA	0.01-10.0
2,4,5-Trichlorophenoxyacetic acid (2,4,5-T)	T5785	255.5	3.91	EtOH	—	RT	2-8 °C	CA	0.01-5.0
2,3,5-Triiodobenzoic acid Free acid (TIBA)	T5910	499.8	2.00	1N NaOH	Water	-0 °C	-0 °C	F	0.05-5.0

*CA = 다른 배지 요소와 함께 오토클레이브에서 사용할 수 있습니다. F = 필터를 멸균합니다. CA/F = 다른 미디어 구성 요소와 함께 오토클레이브에서 사용할 수 있지만, 약간의 활성 손실이 발생할 수 있습니다. 이는 구성 요소 농도를 높여 보정할 수 있습니다. 구성 요소는 필터로 살균될 수 있습니다.

시토키닌

		몰 등가		용액 제조
제품명	제품 번호	몰 중량	1 mg/L당 µM	용제	희석액	분말 보관	액상 보관	멸균*	작용 농도 (mg/L)
Adenine Free base	A5665	135.1	7.40	1.0 HCl	Water	RT	2-8 °C	CA	50-250
Adenine hemisulfate Hemisulfate salt	A2545	184.2	5.43	Water	—	RT	2-8 °C	CA	50-250
6-Benzylaminopurine(BA)	B3408	225.3	4.44	1N NaOH	Water	RT	2-8 °C	CA/F	0.1-5.0
6-Benzylaminopurine Hydrochloride	B5920	261.7	3.82	Water	—	RT	2-8 °C	CA/F	0.1-5.0
6-Benzylaminopurine(BA)	B3274	225.3	4.44	1N NaOH	Water	RT	2-8 °C	CA/F	0.1-5.0
N-Benzyl-9-(2-tetrahydropyranyl)adenine(BPA)	B2275	309.4	3.23	EtOH	—	-0 °C	-0 °C	CA/F	0.1-5.0
N-(2-Chloro-4-pyridyl)-N'-phenylurea(4-CPPU)	C2791	247.7	4.04	DMSO	—	2-8 °C	2-8 °C	F	0.001-1.0
6-(gamma,gamma-Dimethylallylamino)purine(2iP)	D7674	203.2	4.92	1N NaOH	Water	-0 °C	-0 °C	CA/F	1.0-30.0
6-(gamma,gamma-Dimethylallylamino)purine(2iP)	D5912	203.2	4.92	1N NaOH	Water	-0 °C	-0 °C	CA/F	1.0-30.0
1,3-Diphenylurea(DPU)	D7535	212.3	4.71	DMSO	—	RT	2-8 °C	F	0.1-1.0
Kinetin	K0753	215.2	4.65	1N NaOH	Water	-0 °C	-0 °C	CA/F	0.1-5.0
Kinetin	K3378	215.2	4.65	1N NaOH	Water	-0 °C	-0 °C	CA/F	0.1-5.0
Kinetin	K3253	215.2	4.65	1N NaOH	Water	-0 °C	-0 °C	CA/F	0.1-5.0
1-Phenyl-3-(1,2,3-thiadiazol-5-yl)urea	P6186	220.2	4.54	DMSO	—	RT	2-8 °C	CA/F	0.001-0.05
trans-Zeatin Free base	Z0876	219.2	4.56	1N NaOH	Water	-0 °C	-0 °C	CA/F	0.01-5.0
Zeatin	Z0164	219.2	4.56	1N NaOH	Water	-0 °C	-0 °C	CA/F	0.01-5.0
trans-Zeatin Hydrochloride	Z2753	255.7	3.91	Water	—	-0 °C	-0 °C	CA/F	0.01-5.0
trans-Zeatin riboside	Z3541	351.4	2.85	1N NaOH	Water	-0 °C	-0 °C	F	0.01-5.0

*CA = 다른 배지 요소와 함께 오토클레이브에서 사용할 수 있습니다. F  = 필터를 멸균합니다. CA/F = 다른 미디어 구성 요소와 함께 오토클레이브에서 사용할 수 있지만, 약간의 활성 손실이 발생할 수 있습니다. 이는 구성 요소 농도를 높여 보정할 수 있습니다. 구성 요소는 필터로 살균될 수 있습니다.

기타 식물 성장 조절제

		몰 등가		용액 제조
제품명	제품 번호	몰 중량	1 mg/L당 µM	용제	희석액	분말 보관	액상 보관	멸균*	작용 농도 (mg/L)
(±)-cis,trans-Abscisic acid(ABA)	A1049	264.3	3.78	1N NaOH	Water	-0 °C	-0 °C	CA/F	0.1-10.0
Ancymidol	A9431	256.3	3.90	DMSO	—	2-8 °C	-0 °C	CA/F	1.0-10.0
Chlorocholine chloride(CCC)	C4049	158.1	6.33	Water	—	RT	2-8 °C	F	up to 500
3,6-Dichloro-o-anisic acid(Dicamba)	D5417	221.0	4.52	EtOH/Water	—	2-8 °C	2-8 °C	F	0.01-10.0
지베렐린산(GA3)	G7645	346.4	2.89	EtOH	—	RT	2-8 °C	CA/F	0.01-5.0
Gibberellic acid Potassium salt (K-GA3)	G1025	384.5	2.60	Water	—	2-8 °C	-0 °C	CA/F	0.01-5.0
Gibberellin A4 Free acid (GA4)	G7276	332.4	3.01	EtOH	—	-0 °C	-0 °C	F	0.01-5.0
(±)-Jasmonic acid	J2500	210.3	4.76	EtOH	—	2-8 °C	-0 °C	F	0.01-100.0
Phloroglucinol	P1178	126.1	7.93	Water	—	RT	2-8 °C	CA/F	up to 162
N-(Phosphonomethyl)glycine(Glyphosate)	P9556	169.1	5.91	1N NaOH	Water	RT	2-8 °C	F	—
Succinic acid 2,2-dimethylhydrazide	S2022	160.2	6.24	Water	—	2-8 °C	2-8 °C	CA/F	0.1-10.0

*CA = 다른 배지 요소와 함께 오토클레이브에서 사용할 수 있습니다. F  = 필터를 멸균합니다. CA/F = 다른 미디어 구성 요소와 함께 오토클레이브에서 사용할 수 있지만, 약간의 활성 손실이 발생할 수 있습니다. 이는 구성 요소 농도를 높여 보정할 수 있습니다. 구성 요소는 필터로 살균될 수 있습니다.