일반 배지 및 버퍼
세포 배양 배지 변형은 다양한 포유류 세포 배양을 위해 더욱 생리학적으로 관련된 환경에 대한 필요성에 적합하도록 개선되었습니다. 이러한 배지 및 염류는 구성 요소와 함께 다양한 세포 배양 응용분야에 적격하며 당사의 최첨단 시설에서 제조됩니다. 글루코스 농도, L-글루타민이나 안정적인 글루타민 보충제, 페놀 레드 pH 지시약 포함, 분말 또는 액체 형식을 포함하는 매개변수에 기반하여 귀하의 응용분야에 적합한 배지를 선택하십시오.
DMEM(Dulbecco 변형 Eagle 배지)
DMEM(Dulbecco 변형 Eagle 배지)은 세포 및 조직 배양용으로 정의된 배지 중 많은 부착성 세포 표현형에 대해 가장 광범위하게 적합한 배지입니다. Dulbecco의 변형은 원조 Eagle 배지의 선택 아미노산과 비타민 함량을 최대 4배까지 향상시키는 강화된 보충 제형입니다. 자사 제품에는 여러 포도당 농도 범위뿐만 아니라 L-글루타민 포함 및 비포함 제형도 포함됩니다. pH 지시약 페놀 레드가 없는 제품은 에스트로겐에 민감한 애플리케이션에 사용할 수 있으며 자사의 포괄적인 제품에는 편리하고 바로 사용할 수 있는 액상 그리고 더 용이한 보관 및 더 긴 저장 수명을 위한 경제적인 분말형 배지가 포함됩니다.
RPMI 1640 배지
Roswell Park 연구소의 이름을 따서 Moore et al이 개발한 RPMI 1640 배지는 림프구 및 기타 혈액 세포와 같은 비부착성 세포 유형의 배양에 최적화되어 있습니다. 제형은 중탄산염 완충 시스템과 변경된 아미노산 및 비타민 양을 활용하는 배지의 RPMI 1630 시리즈를 기반으로 합니다. RPMI 1640 배지는 인간 정상 및 신생물 백혈구의 배양에 사용되었습니다. 적절하게 보충될 때, 이 제형은 72시간 파이토헤마글루티닌(PHA) 자극 분석에서 신선한 인간 림프구를 포함하여 다양한 유형의 배양된 세포 성장을 지원하기 위한 광범위한 적용성을 입증했습니다.
DMEM/F12 배지 제형
최근 몇 년 동안, 연구자들은 혈청을 대체하여 영양소, 성장 인자 및 호르몬을 함유한 무혈청 배지에서 다양한 세포주의 배양을 보고했습니다. Mather와 Sato(BBRC, 1985)는 인슐린, 트랜스페린, 표피 성장 인자, 황체형성 호르몬 또는 난포 자극 호르몬, 소마토메딘 및 성장 호르몬을 함유한 무혈청 배지에서 Leydig 및 Sertoli 세포의 성공적인 배양을 보고했습니다. 호르몬 및 그 농도는 연구 중인 세포 유형에 따라 특이적이지만, 이러한 연구에 최적인 것으로 밝혀진 배지는 Dulbecco의 변형 Eagle 배지(DMEM)와 Ham의 F-12 영양 혼합물의 1:1 혼합물(DMEM/F12로도 알려짐)이었습니다. HEPES 완충액은 혈청을 제거함으로써 발생하는 완충 능력의 손실을 보상하기 위해 15mM의 최종 농도로 제형에 포함될 수 있습니다.
MEM(최소 필수 배지)
NIH에서 근무하는 Harry Eagle이 개발한 MEM(최소 필수 배지)은 여러 종의 요구에 보편적인 필수 아미노산을 포함하며 모든 합성 세포 배양 배지 중 가장 널리 사용되는 배지 중 하나입니다. 정상적인 포유류 섬유아세포와 특정 HeLa 세포 서브클론을 배양하려는 초기 시도에서 Eagle's 기초 배지(BME)로 충족할 수 없는 특이적인 영양 요건이 있음이 밝혀졌습니다. 배양에서 이들 및 다른 세포를 사용한 후속 연구에서 BME에 첨가하여 더욱 다양한 까다로운 세포의 성장을 도울 수 있음이 밝혀졌습니다. 이러한 변형을 포함하는 MEM에는 더 높은 농도의 아미노산이 포함되어 있어 해당 배지는 포유류 세포의 단백질 구성에 더 가깝습니다.
MEM은 단층에서 성장하는 다양한 세포의 배양에 사용되었습니다. Hanks' 또는 Earle's 염류를 포함하는 제형에 비필수 아미노산을 선택적으로 보충하여 이 배지의 유용성을 넓혔습니다. 해당 제형은 현탁액에서 세포의 성장을 허용하기 위해 선택적으로 칼슘을 제거함으로써 추가로 수정되었습니다.
Ham’s F-10 및 F-12 배지 제형
Ham의 영양 혼합물은 원래 중국 햄스터 난소(CHO) 세포의 여러 클론 그리고 HeLa 및 마우스 L-세포 클론의 성장을 지원하기 위해 개발되었지만, 간세포 배양, 바이러스 융합 및 독성 분석법에도 적합합니다. 이러한 혼합물은 배양된 세포 유형에 따라 혈청 보충 유무에 관계없이 사용하도록 제형화되었습니다.
- Ham's F-10은 인간 이배체 세포, 백혈구 및 래트, 토끼 및 닭 조직의 1차 외식편 성장을 지원하는 것으로 나타났습니다.
- Ham's F-12는 일차 래트 간세포 및 래트 전립선 상피세포의 성장을 위해 사용되었습니다. CHO 세포를 사용한 클론 독성 분석은 최적 pH 범위 7.2 - 7.4에서 보다 효과적인 완충을 제공하는 25mM HEPES와 함께 사용 가능한 Ham's F-12를 사용하는 것으로 보고되었습니다.
- Ham's F-12에 대한 Coon의 변형은 바이러스 융합에 의해 생산된 잡종 세포를 배양하기 위해 개발되었습니다. 이 변형은 아미노산 및 피루브산 표준 농도의 2배 그리고 아스코르브산 및 조정된 염 농도를 포함하여 구성됩니다. Coon의 조제법은 0.863 mg/L 황산아연이 포함되어 있어, 마우스 L 세포 배양에 적합하지 않을 수 있습니다.
- Ham's F-12의 Kaighn 변형(Ham's F-12K라고도 함)은 변형된 염류(Konigsberg 조제법)뿐만 아니라 특정 아미노산과 피루브산의 농도를 증가시켰습니다. 이 배지는 1차 인간 간세포뿐만 아니라 분화된 랫트 및 닭 세포의 성장을 지원하도록 설계되었습니다.
Medium 199(M199)
초기 조직 배양 배지는 주로 동물 제품 및/또는 조직 추출물로 제형화되었습니다. 1950년에 Morgan과 그의 동료들은 세포 배양을 위해 엄격하게 정의된 영양 공급원을 생산하기 위한 노력을 보고했습니다. 비타민, 아미노산 및 기타 요소의 다양한 조합으로 수행된 그들의 실험은 외식 조직의 성장이 Medium 199(M199)로 알려진 것으로 측정될 수 있다고 밝혔으며, 이것은 현재 바이러스학, 백신 생산, 1차 조직 외식편 배양 그리고 마우스 췌장 상피 및 래트 수정체 조직의 in vitro 배양에 널리 사용되고 있습니다.
연구자들은 결국 세포를 장기간 배양하려면 배양액에 혈청 보충제를 추가해야 한다는 것을 발견했습니다. 적절하게 보충될 경우, Medium 199는 특히 형질전환되지 않은 세포의 배양을 위해 광범위한 종 적용 가능성이 있습니다.
세포 배양을 위한 기초 염류
D-PBS, Hanks', Earle's, Tyrode's ─ 어디에서나 구할 수 있는 가장 완벽한 균형 잡힌 염류 컬렉션에서 귀하의 배양 애플리케이션에 올바른 제형을 찾을 수 있습니다.
기타 고전적인 세포 배양 배지
Ames' 및 Iscove’s 변형에 더하여 Click's, L-15, McCoy's, NCTC 등을 포함한 전문 제형을 찾아보십시오.
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