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Merck

세포 건강 분석

생존/사멸 세포 이중 염색

세포 건강 분석 시약, 키트 및 도구는 세포 배양 활력의 일반 및 특정 지표를 측정합니다. 생존성 분석은 세포 건강의 일반적인 척도로 사용되거나 세포독성 분석과 함께 치료 효과를 평가하도록 사용할 수 있습니다. 증식 분석은 조건 또는 처치의 결과로서 세포의 대사 활성 척도로서 종종 DNA 합성 및 세포 분열을 사용합니다. 세포독성 키트는 대사 활동을 평가하기 위해 생체환원 판독을 사용할 수 있습니다.  

배양 오염은 효율적이고 신뢰할 수 있는 세포 배양에 대한 가장 일반적인 장벽 중 하나입니다. 일부 오염 물질은 배양물의 조심스러운 현미경 검사로 검출할 수 있지만, 마이코플라스마와 같은 오염 물질은 가시적 검출 방법을 회피합니다. 따라서 배양물은 미생물 오염 물질을 안정적으로 검출하는 키트와 시약을 사용하여 정규적으로 스크리닝해야 합니다. 오염이 발생했을 때 오염을 최소화하고 제거하는 시약은 멸균 기술 및 우수한 배양실 관행을 강화하는 배양실 필수품입니다.

자사의 포괄적인 세포 건강 제품은 다음을 포함합니다.

세포 생존성 및 증식 분석법

세포 증식 및 세포 생존성을 측정하는 분석법은 다양한 자극물로 처리한 후 배양 세포의 반응과 건강 상태를 모니터링하도록 사용됩니다. 적절한 분석 방법의 선택은 평가되는 세포 수와 유형 그리고 기대하는 결과에 따라 달라집니다. 세포 증식 분석법은 시간 경과에 따른 세포 수, 세포 분열 수, 대사 활동 또는 DNA 합성을 모니터링할 수 있습니다. trypan blue 또는 calcein-AM 같은 생존성 염료를 사용한 세포 계수는 증식 속도뿐 아니라 생존 가능한 세포의 백분율도 제공할 수 있습니다. 5(6)-Carboxyfluorescein diacetate N-succinimidyl ester(CFSE)(21888, SCT110)는 세포 집단이 겪은 세포 분열 수 측정에 자주 선택됩니다. CFSE는 세포에 진입하면 세포 내부의 에스테라제에 의해 절단되어 형광 화합물을 형성하고, 숙시니미딜 에스테르군은 세포 내부 단백질에서 1차 아민에 공유 결합으로 반응합니다. 각 분열 시, 각 딸 세포의 형광 강도는 절반이 되어 유동 세포 분석에 의한 세포 분열 수를 간단히 검출할 수 있습니다.

96웰 플레이트에 보여진 생존 세포에 의한 MTT의 포르마잔 염으로의 대사

96웰 플레이트에 보여진 생존 세포에 의한 MTT의 포르마잔 염으로의 대사

세포 생존 및 증식 측정을 위한 자사의 포괄적인 도구 및 솔루션은 다양한 방법을 활용하며 다음을 포함합니다.

  • DNA 합성 증식 분석법
  • 대사 증식 분석법
  • 발광 세포 생존성 분석법
  • 형광 염색 증식 분석법
  • 3D 배양을 위한 생존/사멸/총 세포 삼중 염색
  • Trypan Blue 염료 배제 생존성 계수

세포독성 분석법

대사 활동을 측정하는 분석법은 증식, 생존성, 세포 독성을 분석하기에 적합합니다. MTT 및 XTT과 같은 테트라졸륨염의 유색 포르마잔 화합물로의 환원 또는 레자주린(R7017, TOX8)의 생체환원은 대사적으로 활성인 세포에서만 발생합니다. 활동적으로 증식하는 세포는 대사 활동을 증가시키는 반면, 독소에 노출된 세포와 같은 스트레스를 받은 세포는 감소된 활동을 보여 줍니다.

세포자멸사 분석법

세포 사멸은 발달과 항상성의 과정에서 여러 정상적인 생리학적 기능을 위해 필요합니다. 세포자멸사라고도 하는 프로그램된 세포 사멸을 피하는 종양 세포의 능력은 대부분 암 유형의 특징입니다. 세포 표면 수용체, 어댑터, 프로테아제 및 미토콘드리아 성분을 포함한 다양한 세포 단백질은 세포 생존과 세포자멸사에 의한 사멸 사이의 미세한 균형을 조절합니다. 사려 깊은 분석법 선택은 세포 건강에 대한 세포 배양 조건 및 처치의 영향뿐만 아니라 세포 건강에 영향을 미치는 기전을 분석하도록 도울 수 있습니다. 자사는 초기, 중기 및 후기 단계의 세포자멸사 검출을 위한 완전한 범위의 분석 제품을 제공합니다.

세포 오염 검출 및 제거

무오염 세포 배양의 유지는 세포 기반 연구에서 기본적입니다. 가장 만연한 세포 배양 문제 중 하나는 서브마이크론 크기 및 세포벽이 없는 형태를 특징으로 하는 박테리아 속인 마이코플라스마로 인한 오염으로 이러한 박테리아를 현미경으로 검출하기 어렵거나 불가능하게 하고 많은 항생제에 내성을 갖게 합니다. 마이코플라즈마는 일반적으로 세포 사멸을 일으키지 않지만 조절 장애, 증식 감소 및 염색체 이상을 포함하여 배양된 세포에 대한 다양한 영향을 유발합니다. 간단히 말하자면, 마이코플라스마 오염은 생명과학 연구를 위해 의미있는 데이터를 제공하기 위한 영향 받은 세포주의 정당성을 손상합니다.

DAPI 또는 Hoechst와 같은 일반적인 DNA 검출제는 형광 현미경을 사용하여 오염된 배양물에서 마이코플라스마의 존재를 나타냅니다.

마이코플라스마 검출 및 제거를 위한 자사의 도구는 다음과 같습니다.

  • 세포 배양에서 마이코플라즈마의 신뢰할 수 있고 민감한 마스크 해제를 위한 LookOut® Mycoplasma PCR Detection Kit 그리고 기타 PCR 및 qPCR 키트
  • 마이코플라즈마 배양에 의한 검출을 위한 tryptose phosphate 육즙 및 기타 시약
  • 형광 DNA 염색법에 의한 마이코플라즈마 검출용 DNA 안료
  • 마이코플라즈마 오염제거용 LookOut® Mycoplasma Erase 스프레이 및 시약


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