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ホーム1分子カウント(SMC®)技術SMC® Plate Washer Evaluation Kitによるサンプル性能の最適化

SMC® Plate Washer Evaluation Kitによるサンプル性能の最適化


SMC®技術を用いたイムノアッセイは、fg/mLレベルの感度を達成します。つまり、アッセイワークフローの各ステップを通じて非常に優れた性能と一貫性が求められることを意味します。貴重なサンプルを使用する前に、SMC® Plate Washer Evaluation Kitを使用してプレートウォッシャーの性能を評価する方法をご覧ください。

SMC® Plate Washer Evaluation Kitとは?

SMC® Plate Washer Evaluation Kitには、5つのプレートを実行するために必要なすべての試薬が含まれています。そのため、複数のウォッシャーのテストやプレートウォッシャーのメンテナンス前後でのテストが実施できます。また、SMC®イムノアッセイのステップを模倣する独自の試薬も含まれており、プレートウォッシャーの性能を分離して強調する簡略化されたワークフローになっています。この試薬は、BioTek 405 TSとTecan HydroFlex™の両方のマイクロプレートウォッシャーを解析し、SMCxPRO®イムノアッセイプラットフォームでデータを解析するように最適化されています。このキットを用いると、貴重なサンプルの評価を行う前に、プレートウォッシャーの最適な性能を確認できます。

Plate Washer Evaluation Kitのワークフロー

すでに述べたように、このPlate Washer Evaluation Kitは、約1時間でアッセイを実行できるようにワークフローを簡略化しています。このワークフローのステップにより、アッセイ実行時のエラーの原因を最小限に抑え、プレート内の精度を求めることができます。

このワークフローは、以下に示す8つのステップで構成されています。

SMC® Plate Washer Evaluation Kitのワークフローのステップ:

96ウェルプレートに200 µL/ウェルの形成済み複合体を添加

96ウェルプレートに200 µL/ウェルの形成済み複合体を添加

    プレートウォッシャープロトコル:

    a. Post capture wash(~8分)

    b. 4 cycle pre-transfer(~10分)

    c. Final aspirate(~2分)

    d. プレートをウォッシャーから取り出す

      各ウェルに10 µLの溶出バッファーを添加

      その後、10分間振とうしながらインキュベート

        プレートをマグネット上に2分間静置
          10 µLの溶出液をSMC<sup>&reg;</sup> 384ウェル読み取りプレートに移す

          プレートには10 µLのBuffer Dを入れておく

            プレートをSMCxPRO<sup>&reg;</sup>システムにセットし、解析
              蛍光を励起
                データ取得

                  SMCxPRO®プラットフォームに関するヒントについては、技術資料「SMCxPRO®プラットフォーム:ベストプラクティス」をご覧ください。

                  予防保全(メンテナンス)前後のプレートウォッシャーのデータ

                  最初のデータセットは、予防保全(メンテナンス)が必要なプレートウォッシャーから得られたデータです(表1)。ハイライト表示されたウェルは、Response Event値が低く、アッセイ精度の低下につながるビーズの消失を示しています。ほぼすべての列と行で20%を超えるCV値を示しています。

                  表1.予防保全(メンテナンス)前のプレートウォッシャー。
                  オレンジ色のウェルは、ビーズの消失が見られるウェルを示す。ピンク色は、CV値が20%超であることを示す。

                  2番目のデータセットは、推奨されるメンテナンス手順の実施後に評価した同一のプレートウォッシャーのデータです(表2)。
                  すべてのプレート、列、および行の精度が20% CV未満まで減少しています。

                  表2.予防保全(メンテナンス)後の同一プレートウォッシャー。

                  SMC® Plate Washer Evaluation Kitにより、プレートウォッシャーの性能を評価し、貴重なサンプルを安心してアッセイできます。

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                  研究目的での使用に限定されます。診断目的では使用しないでください。

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