The concentrations of the reagents for this kit are as follows:
- Solution A (1 mmol/l Calcein-AM/DMSO)..... 50 µl x 4
- Solution B (1.5 mmol/l PI/purified water)..... 300 µl x 1
04511
生細胞/死細胞二重染色キット
suitable for fluorescence
別名:
生細胞/死細胞用の染色キット
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| あなたへ/カタログ番号 | 在庫状況 | 単価 |
|---|---|---|
1 kit | カートの在庫状況を確認する | ￥199,000 |
この商品について
NACRES:
NA.32
UNSPSC Code:
12161503
Application
生/死細胞二重染色キットは、生細胞と死細胞の同時蛍光染色に使用します。このキットには、カルセイン-AM溶液およびヨウ化プロピジウム（PI）溶液が含まれており、それぞれ生細胞、死細胞を染色します。カルセイン-AMはカルセインのアセトキシメチルエステルで、親油性が高く、細胞膜透過性です。カルセイン-AM自体は蛍光分子ではありませんが、生細胞中でエステラーゼによりカルセイン-AMから生成されたカルセインは強い緑色の蛍光を発光します（λex490 nm、λem515 nm）。したがって、カルセイン-AMは生細胞のみを染色します。一方、核染色色素PIは、生細胞膜を通過できません。PIは死細胞膜の不完全な部分から核に到達し、細胞のDNA二重らせんの間に入り、赤色の蛍光を発光します（λex535 nm、λem617 nm）。カルセインとPI-DNAはともに490 nmの光で励起することから、蛍光顕微鏡で生細胞と死細胞のモニタリングを同時に行うことができます。λex 545 nmを使用することで、死細胞のみを観察できます。
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当該品目 | |||
|---|---|---|---|
| suitability suitable for fluorescence | suitability - | suitability - | suitability - |
| storage temp. −20°C | storage temp. - | storage temp. - | storage temp. 2-8°C |
| Quality Level 100 | Quality Level 200 | Quality Level 100 | Quality Level 100 |
キットの構成要素のみ
製品番号
詳細
- Solution A (Calcein AM solution) 4 × 50
- Solution B (propidium iodide solution) 300 μL
保管分類
10 - Combustible liquids
wgk
WGK 2
flash_point_f
185.0 °F - closed cup
flash_point_c
85 °C - closed cup
適用法令
試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。
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jan
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what is the concentration of the stock solution？
1 回答-
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This kit can be used in bacteria or is just for eukaryotic cells?
1 回答-
This kit is designed for use with eukaryotic cells and has not been validated for use with bacterial cells.
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I want to use this kit for suspension cells. Protocol says to prepare a cell suspension with PBS at 1-10 x 10^5 cells/mL and then add 100uL of assay solution. Is it 100uL per mL of cell suspension?. Also, what is the concent of the original solutions?
1 回答-
200 microliters of cell suspension is mixed with 100 microliters of assay solution, and the mixture is incubated at 37 ºC.
Lot-specific concentrations of Solutions A and B are listed in the product's Certificate of Analysis.役に立ちましたか？
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I want to use this kit for suspension cells. Protocol says I first need to prepare a cell suspension with PBS at 1-10 x 10^5 cells/mL and then add 100uL of assay solution. Is it 100uL per mL of cell suspension?. What is the conc of the original solutions?
1 回答-
The original manufacturer of this kit recommends adding 100 microliters of assay solution to 200 microliters of the cell suspension. Unfortunately, this key bit of information is missing from the protocol. Each vial of Solution A contains a 1 mM solution of Calcein-AM in DMSO. The vial of Solution B contains a 1.5 mM solution of Propidium Iodide in pure water.
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Can this kit be used to assess cell viability within bacterial biofilms?
1 回答-
This product requires preparation of a cell suspension and has not been validated for bacterial biofilms or cells attached to any surface.
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How many assays or tests can be conducted using one kit of PN: 04511-1KT-F?
1 回答-
The 04511 kit consists of 2 components, with reagent B being the limiting reagent, requiring just 300 microliters of reagent. To prepare the staining solution, 10 microliters of Reagent A and 5 microliters of Reagent B are mixed with 5 ml of PBS. Each test necessitates 100 microliters of the staining solution. With 5 microliters of Reagent B being sufficient for 50 tests, 300 microliters of Reagent B is adequate for 60 batches of the staining reagent, resulting in 3000 tests (50 x 60). Although the maximum number of specimens might not always be stained in practice, the kit theoretically should allow for 3000 tests.
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Can the live/dead double staining kit be used on fixed cells?
1 回答-
The kit is not designed for use with just dead cells. When cells are fixed, it typically results in cell death for all cells. Consequently, if all the cells are dead, it is expected that the Calcein AM would not be able to enter the cells, as Calcein AM is not a fluorescent molecule. The available data sheet states, "While the cells are viable, the calcein generated from CalceinAM by esterase in a viable cell emits strong green fluorescence (excitation: 490 nm, emission: 515 nm)." Therefore, Calcein-AM only stains viable cells. If all the cells are dead, the only observed staining will be from the Propidium Iodide - which is the dead cell stain reagent in kit 04511.
If the cells are stained while viable, it is possible to image the cells after they have been fixed in paraformaldehyde or other fixatives. Although this is a common practice in some laboratories, It's suggested to consider a 10-minute fixation instead of 30 minutes, as fixing for 30 minutes may not be advisable.役に立ちましたか？
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