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詳細
Random Primed DNA Labeling Kitは、プライマーとしてランダムオリゴヌクレオチドを用いて、修飾デオキシリボヌクレオシド三リン酸でDNAを放射性および非放射性標識するキットです。この方法では、プライマーとしてランダムオリゴヌクレオチドの3′-OH末端を使用するKlenowポリメラーゼにより、変性DNAの相補的なDNA鎖を合成します。
特異性
熱失活:2 μL 0.2 M EDTA(pH 8.0)を添加、および/または 65°Cで10分間加熱することにより反応を停止します。
アプリケーション
Random Primed DNA Labeling Kitは、1 kbよりも短いプローブまたはフラグメントの標識に使用されています。
Random Primed DNA Labeling Kitは、[α-32P]-dNTPまたは修飾dNTPでプラスミドまたはファージDNAを均一に標識するために使用します。高い比活性を持つ標識DNAプローブは、以下を含む様々なハイブリダイゼーション技術で使用されます。
- 遺伝子ライブラリーのスクリーニング
- サザンブロット、ドットブロット、およびノーザンブロット
- In situハイブリダイゼーション
包装
1キットに7構成要素が含まれています。
調製ノート
標準溶液:dNTPストックミックスの調製
少量によるピペッティングの不正確さを回避するため、非標識dNTPのストックミックスを調製します。アリコートは-15~-25°Cで保存する必要があります。凍結融解を繰り返さないでください。
DIGストックミックスの調製
少量によるピペッティングの不正確さを回避するため、DIGストックミックスを調製します。そのためには、ジゴキシゲニン-11-dUTP[3 mM]およびdTTP(バイアル5)1:1を混合します。各標識反応には1.6 μLを使用します。
少量によるピペッティングの不正確さを回避するため、非標識dNTPのストックミックスを調製します。アリコートは-15~-25°Cで保存する必要があります。凍結融解を繰り返さないでください。
- dATP、dGTP、dTTP混合物:
1回の標識反応について、反応バイアルに以下をピペットで移します:
1 μL dATP
1 μL dGTP
1 μL dTTP
DIGストックミックスの調製
少量によるピペッティングの不正確さを回避するため、DIGストックミックスを調製します。そのためには、ジゴキシゲニン-11-dUTP[3 mM]およびdTTP(バイアル5)1:1を混合します。各標識反応には1.6 μLを使用します。
その他情報
ライフサイエンス研究専用。診断目的での使用はできません。
キットの構成要素のみ
製品番号
詳細
- Control DNA lambda, 20 μl 12.5 µg/ml
- dATP, 50 μl 0.5 mM
- dCTP, 50 μl 0.5 mM
- dGTP, 50 μl 0.5 mM
- dTTP, 50 μl 0.5 mM
- Hexanucleotide mixture in 10x reaction buffer (100 μl)
- Klenow enzyme, labeling grade (100 U)
保管分類コード
12 - Non Combustible Liquids
WGK
WGK 1
引火点(°F)
does not flash
引火点(℃)
does not flash
試験成績書(COA)
製品のロット番号・バッチ番号を入力して、試験成績書(COA) を検索できます。ロット番号・バッチ番号は、製品ラベルに「Lot」または「Batch」に続いて記載されています。
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