L2524
Liticasi
lyophilized powder, ≥2,000 units/mg protein, Protein ≥20 % by biuret
Sinonimo/i:
Enzima di lisi, Liticasi batterica
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About This Item
Prodotti consigliati
Origine biologica
bacterial (Arthrobacter luteus)
Livello qualitativo
Forma fisica
lyophilized powder
Attività specifica
≥2,000 units/mg protein
Composizione
Protein, ≥20% biuret
tecniche
cell based assay: suitable
Compatibilità
suitable for cell lysis
applicazioni
diagnostic assay manufacturing
Temperatura di conservazione
−20°C
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Applicazioni
La liticasi ottenuta da Arthrobacter luteus è stata usata per lisare la parete cellulare del micete per isolarne il DNA.
La liticasi ricavata da Arthrobacter luteus è stata impiegata:
- per la trasformazione di cellule in sferoplasti
- come componente di una soluzione di digestione per l'incubazione di cellule di lievito ai fini della digestione della parete cellulare
- nell'idrolisi enzimatica del precipitato di micelio per la preparazione dei protoplasti
Azioni biochim/fisiol
L'enzima liticasi è spesso utilizzato nella ricerca sui miceti, in particolare per l'identificazione delle specie mediante tecniche basate sulla reazione a catena della polimerasi (PCR). È in grado di scindere i legami β (1→3) e β (1→4) tra le unità di glucosio. Il lisozima funge da indicatore della risposta dell'ospite mediata dai macrofagi, è correlato alla morte dei globuli bianchi e presenta un elevato tasso di turnover. Livelli elevati di lisozima sierico sono stati osservati in varie condizioni infiammatorie croniche, malattie infiammatorie intestinali, disturbi ematici e disturbi renali. Il lisozima di tipo c dall'albume d'uovo di gallina è comunemente usato come modello per lo studio della struttura e della funzione delle proteine. La muramidasi mostra principalmente un'attività battericida contro i batteri Gram-positivi. Il metodo descritto nel bollettino per la determinazione delle masse molecolari mediante cromatografia di filtrazione su gel è una versione modificata di tecniche esistenti già pubblicate. Gli standard proteici inclusi in questo kit possono essere compatibili con altri sistemi cromatografici come la cromatografia liquida ad alte prestazioni (HPLC). Tuttavia, alcuni sistemi tampone possono influenzare i volumi di eluizione dell'albumina e dell'anidrasi carbonica. Le proteine contenute in questo kit hanno masse molecolari comprese nell′intervallo tra 29 kDa e 699 kDa.
Le cellule di lievito sono difficili de lisare perché la loro parete cellulare può formare capsule o spore resistenti. L'estrazione del DNA dal lievito può avvenire utilizzando enzimi litici, come la liticasi, che inducono la formazione di sferoplasti parziali, che poi vengono lisati per ottenere il rilascio del DNA. La liticasi è preferibile per la digestione della parete cellulare di lievito, generando sferoplasti dai miceti per la successiva trasformazione. Ha attività β-(1-→3)-glucan-laminaripentaoidrolasica oltre ad attività β-(1→3)-glucanasica, proteasica e mannanasica. La liticasi si usa per cellule di lievito delle specie di Candida, Debaryomyces, Saccharomyces, Saccharomycopsis, Saccharomycodes, Eremotheciume Schwanniomyces.
La liticasi idrolizza il poli-β(1→3)-glucosio come ad esempio il glucano delle pareti cellulari del lievito.
Definizione di unità
Un′unità produce una ΔA800 di 0,001 al minuto a pH 7,5 a 25 °C usando una sospensione di lievito come substrato in 3 mL di miscela di reazione.
Stato fisico
Polvere liofilizzata parzialmente purificata contenente stabilizzatori e sali di tampone di fosfato di potassio
Altre note
Per ulteriori informazioni sugli enzimi per l′analisi dei carboidrati complessi, visitare il sito web www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer.
Solo per fini di Ricerca & Sviluppo. Non adatto per impieghi farmacologici o domestici o per altri usi. Per informazioni sui pericoli e sulle pratiche di manipolazione sicura, consultare la scheda di sicurezza.
Avvertenze
Danger
Indicazioni di pericolo
Consigli di prudenza
Classi di pericolo
Resp. Sens. 1
Codice della classe di stoccaggio
11 - Combustible Solids
Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)
WGK 3
Punto d’infiammabilità (°F)
Not applicable
Punto d’infiammabilità (°C)
Not applicable
Dispositivi di protezione individuale
Eyeshields, Gloves, type N95 (US)
Certificati d'analisi (COA)
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This procedure may be used for the determination of Lyticase activity using Baker’s yeast as the substrate.
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