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D4545

Sigma-Aldrich

Taq DNA polimerasi

with 10× PCR reaction buffer without MgCl2

Sinonimo/i:

Taq polymerase, Taq polymerase enzyme

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About This Item

Numero CAS:
Classificazione EC (Enzyme Commission):
Numero MDL:
Codice UNSPSC:
12352204
NACRES:
NA.55

Origine biologica

enzyme from bacterial (Thermus Aquaticus)

Ricombinante

expressed in E. coli

Forma fisica

liquid

impiego

sufficient for 1500 reactions
sufficient for 250 reactions
sufficient for 50 reactions
sufficient for 5000 reactions

Caratteristiche

dNTPs included: no
hotstart: no

Concentrazione

5 units/μL

tecniche

PCR: suitable

Colore

colorless

input

purified DNA

Compatibilità

suitable for PCR and automated sequencing reactions

applicazioni

agriculture

Condizioni di spedizione

wet ice

Temperatura di conservazione

−20°C

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Descrizione generale

La Taq polimerasi è una DNA polimerasi termostabile che deve il proprio nome al batterio termofilo Thermus aquaticus. Una DNA (acido deossiribonucleico) polimerasi stabile (con temperatura ottimale di 80 °C) è stata purificata a partire dal termofilo estremo Thermus aquaticus. L′enzima è privo di attività di fosfomonoesterasi, fosfodiesterasi ed esonucleasi a singolo filamento. Per la massima attività dell′enzima sono necessari tutti e quattro i deossiribonucleotidi e il DNA di timo di vitello attivato.

Applicazioni

La Taq DNA polimerasi derivata da Thermus aquaticus è stata impiegata:
  • nella procedura di estrazione del DNA (durante l′amplificazione e il sequenziamento genico)
  • nella genotipizzazione
  • nella reazione a catena della polimerasi (PCR) per studiare la produzione costitutiva del peptide 78 che attiva i neutrofili epiteliali (ENA-78) e dell′interleuchina-8 (IL-8)
  • per l′amplificazione dell′RNA da cellule endoteliali primarie mediante PCR convenzionale.

Azioni biochim/fisiol

La Taq polimerasi catalizza l′incorporazione (dipendente da templati di DNA e promossa dagli oligonucleotidi che agiscono da primer) dei dNTP nei filamenti di DNA complementari. Mostra un′attività della 5′-3′ polimerasi ed esonucleasi.

Caratteristiche e vantaggi

  • MgCl2 fornito in una provetta separata per consentire l′ottimizzazione di MgCl2
  • Sopporta il riscaldamento ripetuto a 95 °C senza una significativa perdita di attività

Confezionamento

La Taq DNA polimerasi può essere acquistata a scelta con un tampone di reazione 10× ottimizzato con MgCl2 (D1806) o con un tampone di reazione 10× senza MgCl2 e una provetta separata di MgCl2 per la titolazione (D4545). La seconda opzione può essere necessaria per determinare le condizioni ottimali per l′amplificazione.
Taq DNA polimerasi con tampone di reazione 10× senza MgCl2. Include una provetta separata di 25 mM di MgCl2

Altre note

La Taq DNA polimerasi è un enzima termostabile specializzato isolato dal batterio termofilo Thermus aquaticus. La forma ricombinante di questo enzima è espressa in E. coli. Questa proteina da 94 kDa non mostra livelli rilevabili di endonucleasi o esonucleasi contaminanti secondo SDS-PAGE. Mostra un′attività della 5′→3′ polimerasi ed esonucleasi.

Definizione di unità

Un′unità incorpora 10 nmol di dNTP totali in DNA precipitabile in acido in 30 minuti a 74 °C.

Note legali

L′utilizzo di questo prodotto è coperto da uno o più brevetti USA tra i seguenti e dalle corrispondenti richieste di brevetto al di fuori degli USA: US 8,404,464 e US 7,972,828. L′acquisto di questo prodotto include un′immunità limitata e non trasferibile dalle azioni giudiziarie ai sensi delle rivendicazioni di brevetto in corso.

Indicazioni di pericolo

Consigli di prudenza

Classi di pericolo

Aquatic Chronic 3

Codice della classe di stoccaggio

12 - Non Combustible Liquids

Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)

WGK 2

Punto d’infiammabilità (°F)

Not applicable

Punto d’infiammabilità (°C)

Not applicable


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Fertility and sterility, 89(5 Suppl), 1530-1536 (2007-09-01)
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