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Merck

PMEF-CFL

Fibroblasti primari embrionali di topo EmbryoMax®

Sinonimo/i:

CF-1 MEF Feeder Cells, CF-1 MEFs, CF-1 PMEFs, CF1 Mouse Feeder Cells, MEF Feeder Cells, CF-1 PMEFs, CF-1 MEFs, MEFs, Mouse Feeder Cells

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Informazioni su questo articolo

UNSPSC Code:
41106509
NACRES:
NA.75
eCl@ss:
32011203
Biological source:
mouse

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Specialty Media, EmbryoMax®

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cell culture | stem cell: suitable

input

sample type: human embryonic stem cell(s)
sample type: mouse embryonic stem cell(s)
sample type primary embryotic fibroblasts (PMEFs)
sample type induced pluripotent stem cell(s)

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PMEF-HLPMEF-HPMEF-DR4X-M
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General description

I fibroblasti primari embrionali di topo, ceppo CF1, non sono trattati con mitomicina C e fungono da feeder layer per cellule ES/IPS sia umane che di topo. Le cellule sono fornite al passaggio 3, possono essere espanse per altri 5-6 passaggi circa e ricongelate per usi successivi.

Piastratura del feeder layer di cellule MEF

Procedura:

1. Prima di scongelare le cellule PMEF, ricoprire le piastre/fiasche con una soluzione di gelatina.
2. Scongelare rapidamente le vial di PMEF in un bagno ad acqua a 37 °C. Trasferirle in una provetta da 15 mL pre-riempita con 10 mL di PMEF Feeder Cell Medium pre-riscaldato. Capovolgere delicatamente la provetta per mescolare e centrifugare a 300 xg per 4–5 minuti.
3. Rimuovere il surnatante e risospendere il pellet in PMEF Feeder Cell Medium pre-riscaldato.
4. Rimuovere la soluzione di gelatina dalle piastre/fiasche e aliquotare la sospensione di PMEF alle densità consigliate nella tabella 4.1 della guida ai protocolli per ES di topo
5. Incubare le cellule PMEF a 37 °C con il 5% di CO2. Utilizzare le figure 4A, B e C riportate nella guida ai protocolli per ES di topo come riferimento per stabilire la densità e l′aspetto ottimali
Le piastre ricoperte con la gelatina possono essere utilizzate per 12–14 giorni.
La gamma di cellule PMEF EmbryoMax offre ai ricercatori una soluzione conveniente per la coltura delle cellule staminali, eliminando la necessità di isolare e preparare le cellule per il feeder layer, con grande risparmio di tempo. Molti protocolli per la coltura delle cellule staminali embrionali richiedono l'uso di fibroblasti primari embrionali di topo (PMEF). In questi protocolli, le cellule ES sono infatti coltivate su un monostrato di PMEF (feeder layer). Le cellule del feeder layer svolgono due importanti ruoli per la coltura delle cellule staminali: secernono nel terreno diversi importanti fattori di crescita, che aiutano a mantenere la pluripotenza delle ES, e forniscono una matrice cellulare che aiuta a supportarne la crescita.

Biochem/physiol Actions

Fibroblasti primari embrionali di topo

Packaging

5-6x106 ciascuna

Physical form

Le cellule vengono fornite congelate in vial contenenti circa 5-6 x 106 fibroblasti ciascuna. Sono vendute in confezioni da 5 vial contenenti cellule al passaggio 3. Per indicazioni riguardo la coltura e i terreni per PMEF fare riferimento al manuale per le cellule staminali (ES Stem Cell Manual).

Preparation Note

Dopo il ricevimento conservare le vial a -80°C. Per tempi di conservazione maggiori di 6 mesi: le cellule possono essere conservate nella fase vapore dell′azoto liquido, assicurandosi che il tappo sia ben chiuso, per un massimo di 2 anni.

Legal Information

EmbryoMax is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

Salvo diversa indicazione nel nostro catalogo o in altra documentazione fornita dall′azienda insieme al prodotto, i nostri prodotti sono destinati esclusivamente a scopi di ricerca e non devono essere utilizzati per altre finalità, inclusi a titolo esemplificativo ma non esaustivo, fini commerciali non autorizzati, applicazioni diagnostiche in vitro, usi terapeutici ex vivo o in vivo o qualsiasi altro tipo di assunzione o applicazione rivolta agli esseri umani o agli animali.

Classe di stoccaggio

12 - Non Combustible Liquids

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WGK 2

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Mouse embryonic fibroblasts (MEFs) serve as a feeder layer for both mouse and human embryonic stem cells (ES cells) and induced pluripotent stem cells (iPSCs).

Protocolli

This page covers the indirect co-culture of embryonic stem cells with embryonic fibroblasts.

Stem Cell protocols for cryopreservation, thawing of cryopreserved stem cells and media preparation.

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The cell culture protocols described in this instructional manual include the in vitro culture of murine ES cells using EmbryoMax products along with ESGRO® mLIF medium supplement, as well as feeder-free and serum-free ES cell culture using the ESGRO Complete™ line of products. Also included in this instructional manual are: methods for serum-free neuronal differentiation of mouse ES cells, iPS cell generation using STEMCCA™ lentivirus kits, cre-recombinase mediated excision of STEMCCA™ genes from iPS cells, derivation and rescue of new and existing ES cell lines using RESGRO™ Culture Medium and ESGRO Complete™ system.

"As transgenic mouse core laboratories know well, mouse models are a powerful means of determining the function of mammalian genes in the context of whole organisms—especially since over 95% of the mouse genome is similar to the human genome. However, you may not know that: 1. Laboratory mouse strains are descended from ancestors in modern-day Pakistan. 2. The first inbred strain of lab mouse was created in 1909. It was named DBA for its coat color: dilute brown non-agouti. 3. There is a mutant mouse actually named“Bad Hair Day” (Bhrd). Someone get this little guy a stylist! 4. Male mice, when treated with anticancer drugs, have been shown to pass on DNA instability to their offspring. 5. The founder of Jackson Laboratories, C. C. Little, once had lunch with Walt Disney to request that an animated film be created linking Mickey Mouse and the laboratory mouse. The request was denied."

Numero articolo commerciale globale

SKUGTIN
PMEF-CFL04053252552045

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