01-185

Vascular Endothelial Growth Factor human

recombinant, expressed in baculovirus infected Sf9 cells, liquid, suitable for cell culture

• Sinonimo/i: Fattore di crescita VEGF
• UNSPSC Code: 12352202
• eCl@ss: 32160405
• NACRES: NA.75
• Biological source: human
• Recombinant: expressed in baculovirus infected Sf9 cells
• Form: liquid

Proprietà

• Nome del prodotto: Proteina VEGF, ricombinante umana, The human recombinant VEGF Protein is available in a 10 µg format.
• biological source: human
• Quality Segment: 100
• recombinant: expressed in baculovirus infected Sf9 cells
• form: liquid
• manufacturer/tradename: Upstate^®
• technique(s): cell culture | mammalian: suitable
• input: sample type neural stem cell(s); sample type hematopoietic stem cell(s); sample type mesenchymal stem cell(s)
• NCBI accession no.: NM_001025366.1, NM_001025367.1, NM_001025368.1, NM_001025369.1, NM_001025370.1, NM_001033756.1, NM_003376.4
• UniProt accession no.: P15692
• shipped in: dry ice
• storage temp.: -10 to -25°C
• Gene Information: human ... VEGFA(7422)

Descrizione

General description

Origine del prodotto: DNA ricombinante espresso in cellule Sf9 infettate da baculovirus

Application

Saggio di proliferazione del VEGF

1. Prima dell'uso in questo test, mantenere le cellule HUVE in terreno F-12K integrato con 10% (v/v) FBS, 1% penicillina-streptomicina-glutammina, 0,1 mg/ml di eparina e 0,05 mg/ml di supplemento per la crescita delle cellule endoteliali (ECGS).

2. Per il dosaggio del VEGF, sottoporre a subcoltura le cellule HUVE in una piastra a 96 pozzetti a una densità di 4.000 cellule per pozzetto nel terreno di coltura per tutta la notte.

3. Aggiungere VEGF a una concentrazione finale di 0,2, 0,4, 0,8, 1,6, 3,2, 6,2, 12,5, 25 and 50 ng/ml. Aggiungere il diluente VEGF a una serie di pozzetti come controllo negativo.
4. Quattro giorni dopo, aggiungere 20 µl di reagente Cell Titer 96 Aqueous One Solution Reagent della Promega a ciascun pozzetto.
5. Incubare a 37 °C per 2 ore e leggere a 490 nm.

Physical form

10 µg di proteina VEGF è stata liofilizzata da un tampone contenente HEPES 25 mM e NaCl 150 mM a pH 7,0. Privo di vettore.

10 µg di proteina liofilizzata VEGF da tampone contenente HEPES 25 mM e NaCl 150 mM a pH 7,0. Privo di vettore.

Sterilizzazione con un filtro a membrana da 0,2 micron

Preparation Note

La polvere liofilizzata è stabile per alcune settimane a temperatura ambiente; è comunque preferibile la conservazione a -20 °C fino ad un massimo di 12 mesi dalla data di ricezione. Dopo una rapida centrifugata, ricostituire con acqua sterile o HEPES 25 mM e NaCl 150 mM a pH 7,0. Dopo la ricostituzione può essere conservato a 2°-8 °C per una settimana, ma se ne consigliano frazioni non diluite a -20 °C. Evitare cicli ripetuti di congelamento/scongelamento.

Questo prodotto è stabile agli acidi. Per mantenere la stabilità, diluire in TFA allo 0,1% o Hcl 4mM, contenente 25 µg di BSA per µg di VEGF. I reagenti riducenti (come il ditiotrietolo o il 2-mercaptoetanolo) inibiscono l'attività del VEGF.

Analysis Note

Testato regolarmente in un test di crescita di 5 giorni su cellule endoteliali della vena ombelicale umana

Saggio di proliferazione cellulare: l'attività biologica di questo lotto di VEGF è stata determinata dalla sua attività mitogena sulle cellule endoteliali della vena ombelicale umana (HUVEC) con una ED50 di circa 1,0 ng/mL. I risultati possono variare a seconda della linea cellulare utilizzata. Il VEGF stimola anche le cellule endoteliali di altre specie.

Legal Information

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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Informazioni sulla sicurezza

• Classe di stoccaggio: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk: nwg