C6885

Colagenasa from Clostridium histolyticum

suitable for release of physiologically active rat epididymal adipocytes, Type II, 0.5-5.0 FALGPA units/mg solid, ≥125 CDU/mg solid

• Sinónimos: Clostridiopeptidasa A
• Número de CAS: 9001-12-1
• Comisión internacional de enzimas: 3.4.24.3 (BRENDA, IUBMB)
• EC Number: 232-582-9
• MDL number: MFCD00130830
• UNSPSC Code: 12352204
• NACRES: NA.54

Propiedades

• biological source: Clostridium histolyticum
• Quality Level: 200
• form: powder
• specific activity: ≥125 CDU/mg solid; 0.5-5.0 FALGPA units/mg solid
• suitability: suitable for release of physiologically active rat epididymal adipocytes
• application(s): diagnostic assay manufacturing
• shipped in: wet ice
• storage temp.: −20°C

Descripción

General description

Clostridium histolyticum es un clostridio patógeno que produce colagenasas. Ésta es una mezcla de enzimas que contienen colagenasa, proteasas inespecíficas y clostripaína.

Application

La colagenasa puede utilizarse:

• para la preparación de tejido arterial para el estudio de los productos finales de la glucosilación avanzada (AGE)
• para utilizarse junto con otras proteasas para la disgregación de tumores humanos, riñón de ratón, cerebro humano, epitelio pulmonar y muchos otros tejidos.
• en los estudios de perfusión de hígado y riñón, de digestión del páncreas y de aislamiento de hepatocitos no parenquimatosos
• para la preparación de hepatocitos viables a partir del hígado de rata y para el aislamiento de células grasas del tejido adiposo de rata.

Biochem/physiol Actions

La colagenasa es activada por cuatro átomo-gramos de calcio por mol de enzima. Es inhibida por el ácido etilenglicol-bis(β-aminoetill éter) - N, N, N′,N′-tetraacético, el β-mercaptoetanol, el glutatión, el ácido tioglicólico y la 8-hidroxiquinolina. Las enzimas colagenasa y proteasa neutra desempeñan un papel importante en la liberación efectiva de las células de los tejidos. La colagenasa reconoce la secuencia -R-Pro-8-X-Gly-Pro-R-, donde X es más a menudo un aminoácido neutro.

La colagenasa es activada por cuatro átomo-gramos de calcio por mol de enzima. Es inhibida por el ácido etilenglicol-bis(beta-aminoetil éter) - N, N, N′,N′-tetraacético, el beta-mercaptoetanol, el glutatión, el ácido tioglicólico y la 8-hidroxiquinolina.

Caution

Tal como se suministra, este producto es estable durante un año a -20°C. No hay pérdida de actividad FALGPA ni actividad proteasa en 30 días a 37°C, 50°C y -20°C. Las disoluciones de colagenasa cruda son estables si se congelan rápidamente en alícuotas (a 10 mg/ml) y se conservan congeladas a -20°C. Otros ciclos de congelación-descongelación dañarán la disolución. El producto retiene el 100 % de su actividad durante 7 horas si se conserva en hielo.

Unit Definition

Una unidad de digestión de colágeno (CDU) libera péptidos del colágeno del tendón de Aquiles bovino que equivalen en la reacción de color de la ninhidrina a 1,0 μmoles de leucina en 5 horas a pH 7,4 y 37 °C en presencia de iones calcio. Una unidad de hidrólisis FALGPA hidroliza 1,0 μmoles de furilacriloil-Leu-Gly-Pro-Ala por minuto a 25°C. Una unidad de proteasa neutra hidroliza la caseína para producir color equivalente a 1,0 μmoles de tirosina por 5 horas a pH 7,5 y 37°C. Una unidad de clostripaína hidroliza 1,0 μmoles de BAEE por minuto a pH 7,6 y 25°C en presencia de DTT.

Preparation Note

Las disoluciones se preparan normalmente a 1-2 mg/ml en tampón TESCA (que contiene TES 50 mM, cloruro de calcio 0,36 mM a pH 7,4 y 37°C.)
Este producto contiene también clostripaína, proteasa neutra inespecífica, y actividades trípticas.

Información de seguridad

• pictograms: GHS08,GHS07
• signalword: Danger
• hcodes: H315,H319,H334,H335
• pcodes: P261 - P264 - P271 - P280 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338
• Hazard Classifications: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• target_organs: Respiratory system
• Storage Class: 11 - Combustible Solids
• wgk_germany: WGK 1
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable
• ppe: dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves