COLLDISP-RO

Colagenasa/Dispasa ^®

lyophilized, non-sterile, optimum pH 7.0-8.0

• Sinónimos: colagenasa
• Código UNSPSC: 12352204

Propiedades

• origen biológico: enzyme from Bacillus polymyxa ( Dispase ); enzyme from bacterial ( Collagenase from Vibrio alginolyticus)
• Nivel de calidad: 100
• esterilidad: non-sterile
• Formulario: lyophilized
• collagenase activity: >0.1 U/mg lyophilizate, 25 °C (4-phenyl-azobenzyl-oxycarbonyl-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg as substrate)
• actividad específica: >0.8 U/mg lyophilizate, pH 7.5, 37 °C (casein as substrate, Dispase)
• envase: pkg of 100 mg (10269638001); pkg of 500 mg (11097113001)
• fabricante / nombre comercial: Roche
• concentración: 1 mg/mL (Collagenase: 0.1U/mL, Dispase: 0.8U/mL)
• técnicas: tissue processing: suitable
• color: light yellow to brown
• pH óptimo: 7.0-8.0
• solubilidad: water: soluble
• Nº de acceso UniProt: P43154
• aplicaciones: life science and biopharma; sample preparation
• actividad extraña: proteolytic activities <0.1 U/mg (hemoglobin as the substrate)
• temp. de almacenamiento: 2-8°C

Descripción

Descripción general

La dispasa es una proteasa neutra, suave y de acción rápida que separa la epidermis intacta de la dermis. También separa las células epiteliales intactas cultivadas del sustrato. Escinde la zona de la membrana basal y deja intactas las células epiteliales.[1] La colagenasa es una proteasa que rompe la triple hélice proteica denominada colágeno. Hay tres tipos de colagenasas en los tejidos, que pertenecen a la familia de las metaloproteinasas de la matriz extracelular (MMP).[2] La colagenasa obtenida de Clostridium histolyticum tiene una actividad muy fuerte, ya que digiere el colágeno desde ambos extremos, a temperaturas de tan sólo 4-10 °C.[3]

Especificidad

La colagenasa degrada el colágeno nativo. La dispasa^® es una proteasa inespecífica.

Aplicación

La colagenasa/dispasa^® se utiliza para la preparación de células procedentes de una amplia variedad de tejidos y órganos diferentes.[4][5][6]

Componentes

EC 3.4.24.4 & 3.4.24.3

Definición de unidad

Una unidad es la actividad enzimática que, en condiciones de análisis en 1 minuto libera aminoácidos y péptidos Folin positivos correspondientes a 1 μmol de tirosina.

Nota de preparación

Activador: Ca²⁺

Concentración de trabajo: Aproximadamente 1mg/ml (Colagenasa: 0,1 U/ml, dispasa: 0,8 U/ml)

Actividad enzimática:
Colagenasa 0,1 U Wünsch/mg de liofilizado (+25°C, 4-fenil-azobencil-oxicarbonil-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg como sustrato)
Dispasa^®: 0,8 U Wünsch/mg liofilizado (+37°C, caseína como sustrato, pH 7,5)
Actividades proteolíticas contaminantes: <0,1 U/mg de liofilizado (hemoglobina como sustrato)

Disolución de trabajo: Preparación de la disolución de trabajo Disuelva la enzima en agua hasta una concentración final de 100 mg/ml. Diluya con PBS (sin Ca²⁺/Mg²⁺) hasta una concentración final de 1 mg/ml y filtre a través de una membrana de filtración estéril de 0,2μm.
Concentración enzimática de la disolución estéril: Colagenasa, 0,1 U/ml de PBS; dispasa^®, 0,8 U/ml de PBS.

Inhibidores:
Inhibidores de la colagenasa: EDTA, EGTA
La colagenasa/dispasa no es inhibida por el suero.

Condiciones de almacenamiento (disolución de trabajo): entre -15 y -25°C
La disolución reconstituida es estable entre -15 y -25°C.
Nota: Conserve en las alícuotas apropiadas y evite congelaciones y descongelaciones repetidas.

Reconstitución

Reconstitución en agua (100 mg/ml). Dilución ulterior con PBS (disolución salina tamponada con fosfato) (sin Ca²⁺/Mg²⁺).

Almacenamiento y estabilidad

Conservar en seco

Otras notas

Colagenasa de Vibrio alginolyticus, dispasa^® de Bacillus polymyxa

Sólo para investigación en ciencias de la vida. No indicada para procedimientos diagnósticos.

Información legal

Dispase is a registered trademark of Godo Shusei Co., Ltd.

Información de seguridad

• Pictogramas: GHS07,GHS08
• Palabra de señalización: Danger
• Frases de peligro: H315 - H319 - H334 - H335
• Consejos de prudencia: P261 - P264 - P280 - P284 - P304 + P340 + P312 - P342 + P311
• Clasificaciones de peligro: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• Órganos de actuación: Respiratory system
• Código de clase de almacenamiento: 11 - Combustible Solids
• Clase de riesgo para el agua (WGK): WGK 1
• Punto de inflamabilidad (°F): does not flash
• Punto de inflamabilidad (°C): does not flash