通过Duolink^®邻位连接技术研究蛋白质互作

上方视频介绍了如何在单次实验中通过简单直接的方法检测、定量和胞内定位蛋白质互作及其修饰情况。

• 固定玻片或微孔板上的细胞或组织，以保存蛋白的活性状态和瞬时互作。
• 加入针对靶标蛋白的验证一抗，再结合PLA邻位探针。
• 只有当靶蛋白的表位足够接近时(<40 nm)，PLA探针的寡核苷酸臂才能杂交形成滚环扩增(RCA)的模板。
• 进行RCA扩增反应后，再用检测探针标记RCA产物。
• 用标准显微镜即可检测和可视化获得的散点。
• 采用Duolink Image Tool图像分析软件可轻松定量分析图像，获得细胞群平均信号数据和单细胞信号数据。