图 1.成功共转染eGFP和mKate2。仅用单独的PC3.1eGFP（A）和pmKate2（B）转染的HeLa细胞荧光图像，以及使用X-tremeGENE HP试剂共转染此两种质粒的荧光图像。X-tremeGENE 9试剂（D）也显示了eGFP和mKate2的共表达。在图1E中，使用荧光细胞覆盖的面积与细胞覆盖的总面积的比率计算X-tremeGENE HP转染试剂的转染效率。图示质粒和试剂体积比率对应100 μl转染复合物。
质粒的瞬时共转染是一种细胞蛋白互作研究、转录因子研究和shRNA编码质粒基因敲减研究的常用方法。因此，共转染有益于广泛的科学研究领域。本研究中使用了两种自发荧光报告基因增强型绿色荧光蛋白（eGFP）和红色荧光蛋白（mKate2）对X-tremeGENE HP和X-tremeGENE 9转染试剂（罗氏）的共转染效率进行了检测。
转染及自动成像
将HeLa细胞（ATCC）以每96孔1.2 x 105个细胞/100μl的密度铺板。细胞铺板后24小时用PC3.1eGFP和pmKate2质粒（Evrogen）转染细胞。对三种不同的pmKate2/PC3.1eGFP比率（每100μl复合物0.5 + 1.0、0.5 + 0.5、1.0 +0.5μg质粒）进行测定。此外，对四种不同用量的X-tremeGENE HP和X-tremeGENE 9转染试剂的复合物形成（每100μl复合物1,2,3或4μl试剂）也分别进行了检测。使用Cellavista分析仪和HOECHST 33342染色法，在转染后48小时对转染效率进行测定。
结果
- 两种质粒的转染效率取决于质粒本身的不同比例以及总DNA/转染试剂的关系（见图1，A、B和E）。
- X-tremeGENE HP和X-tremeGENE 9转染试剂均显示出了高共转效率（见图1，C和D）。
- X-tremeGENE HP转染试剂在所有比例HeLa细胞中均显示出了更为一致的转染效率。
仅用于生命科学研究。不可用于诊断流程。
X-tremeGENE为罗氏公司商标。所有其产品名称和商标归其各自所有者所有。
材料
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1.
Hannig G, Jany C. 2013. Co-transfection of Plasmid DNA. BioTechniques. 54(1): https://doi.org/10.2144/000113979
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