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等级
Molecular Biology
for molecular biology
表单
buffered aqueous solution
浓度
0.5 μg/mL
运输
dry ice
储存温度
−20°C
一般描述
一般描述
pCMV-FLAG-MAT-Tag®-1 是一个 4.7 kb 的哺乳动物表达载体，用于在哺乳动物细胞中瞬时产生双标签融合蛋白。该载体是 pCMV5 瞬时表达载体的衍生物，可在细胞内表达正确插入的开放阅读框，作为 Met-N-端 FLAG®，C-端 MAT-Tag（金属亲和力标签）融合蛋白。
pCMV-FLAG-MAT-Tag-1 表达载体是一种穿梭载体，包含细菌和 SV40 复制起点，可在大肠杆菌和哺乳动物细胞中扩增。当使用表达 SV40 大 T 抗原的宿主细胞时，在哺乳动物细胞中复制的效率最佳。使用肠激酶可以去除 FLAG 标签，肠激酶可在 FLAG 的 C-末端的 Asp-Asp-Asp-Asp-Lys 识别位点之后进行切割。
融合蛋白的 FLAG 表位可以使用单克隆 ANTI-FLAG M2（货号 F3165）进行检测。可以使用 ANTI-FLAG M2 亲和凝胶（货号 A2220）纯化融合蛋白。利用 MAT-Tag 的金属亲和特性，可以使用 HIS-Select® 镍亲和凝胶（货号 P6611）纯化融合蛋白。
载体图谱和序列
pCMV-FLAG-MAT-Tag®-1 是一个 4.7 kb 的哺乳动物表达载体，用于在哺乳动物细胞中瞬时产生双标签融合蛋白。该载体是 pCMV5 瞬时表达载体的衍生物，可在细胞内表达正确插入的开放阅读框，作为 Met-N-端 FLAG®，C-端 MAT-Tag（金属亲和力标签）融合蛋白。
pCMV-FLAG-MAT-Tag-1 表达载体是一种穿梭载体，包含细菌和 SV40 复制起点，可在大肠杆菌和哺乳动物细胞中扩增。当使用表达 SV40 大 T 抗原的宿主细胞时，在哺乳动物细胞中复制的效率最佳。使用肠激酶可以去除 FLAG 标签，肠激酶可在 FLAG 的 C-末端的 Asp-Asp-Asp-Asp-Lys 识别位点之后进行切割。
融合蛋白的 FLAG 表位可以使用单克隆 ANTI-FLAG M2（货号 F3165）进行检测。可以使用 ANTI-FLAG M2 亲和凝胶（货号 A2220）纯化融合蛋白。利用 MAT-Tag 的金属亲和特性，可以使用 HIS-Select® 镍亲和凝胶（货号 P6611）纯化融合蛋白。
载体图谱和序列
应用
pCMV-FLAG-MAT-Tag-1 表达载体适用于 CMV 启动子下双标签融合蛋白的瞬时胞内表达。
组分
pCMV-FLAG-MAT-Tag-1 表达载体 20 μg（E1155），浓度为 0.5 mg/ml，在含 1 mM EDTA 的 10 mM Tris-HCl（pH 8.0）中提供。
pCMV-FLAG-MAT-Tag-1-MAPK1 对照载体 20 μg（C0489），浓度为 0.5 mg/ml，在含 1 mM EDTA 的 10 mM Tris-HCl（pH 8.0）中提供。
pCMV-FLAG-MAT-Tag-1-MAPK1 对照载体 20 μg（C0489），浓度为 0.5 mg/ml，在含 1 mM EDTA 的 10 mM Tris-HCl（pH 8.0）中提供。
原理
人巨细胞病毒的启动子调节区驱动包含 FLAG® 表位（DYKDDDDK）和过渡金属结合 MAT-Tag®（HNHRHKH）的融合蛋白的转录。
法律信息
FLAG is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
HIS-Select is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
MAT-Tag is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
储存分类代码
10 - Combustible liquids
A short polypeptide marker sequence useful for recombinant protein identification and purification.
Hopp, T.V., et al.,
Biotechnology Journal, 6, 1204-1210 (1988)
S Andersson et al.
The Journal of biological chemistry, 264(14), 8222-8229 (1989-05-15)
The conversion of cholesterol into bile acids in the liver represents the major catabolic pathway for the removal of cholesterol from the body. In this complex biosynthetic pathway, at least 10 enzymes modify both the ring structure and side chain
D R Thomsen et al.
Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 81(3), 659-663 (1984-02-01)
The DNA templates containing immediate early (IE) genes of human cytomegalovirus (CMV) were transcribed in vitro by using a HeLa cell extract. When IE region 1, 2, and 3 were used, transcription was detected qualitatively only from IE region 1.
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