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生物源
rabbit
品質等級
無性繁殖
polyclonal
物種活性
mouse, human, rat
製造商／商標名
RIPAb+
Upstate®
技術
RIP: suitable
immunocytochemistry: suitable
immunohistochemistry: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable
NCBI登錄號
UniProt登錄號
運輸包裝
dry ice
基因資訊
human ... ELAVL1(1994)
一般說明
使用RNA结合蛋白免疫沉淀（RIP）测定法评估RipAb+抗体。 每组RipAb+抗体均包含定量RT-PCR对照引物（RIP引物），通过成功共沉淀特异性RNA靶标（已知这种特异性靶标）对IP结果进行生物学验证。提供了qPCR方案和引物序列，使研究人员能够在实验环境中使用抗体时验证RIP方案。每组还包括阴性对照抗体，以确保RIP反应的特异性。
RipAb+HuR组包括HuR抗体，阴性对照抗体（纯化的兔IgG）和阳性qPCR引物，可扩增人β肌动蛋白（ACTB）cDNA的100 bp片段。HuR和阴性对照抗体以可扩展的“每个RIP”反应大小提供，可用于功能验证沉淀HuR相关RNA。
RipAb+HuR组包括HuR抗体，阴性对照抗体（纯化的兔IgG）和阳性qPCR引物，可扩增人β肌动蛋白（ACTB）cDNA的100 bp片段。HuR和阴性对照抗体以可扩展的“每个RIP”反应大小提供，可用于功能验证沉淀HuR相关RNA。
免疫原
表位：氨基酸1-13 HuR
應用
RIP裂解液的免疫沉淀：
使用0.5 μg正常兔IgG或抗HuR抗体对MCF7细胞的RIP裂解液（每个IP 2 X 106细胞当量）进行免疫沉淀。沉淀的蛋白质通过电泳分离，转移到硝酸纤维素膜上并用抗HuR（1.0 μg/mL）进行探测。
使用一步IP-Western试剂盒（GenScript目录号L00231）对蛋白质进行可视化（请参见图）。
蛋白质印迹分析：
通过电泳分离3T3/A31裂解液，转移到PVDF膜上，并用HuR，hu（1:500稀释度）探测。使用与HRP偶联的驴抗兔蛋白可视化，并使用化学发光检测系统可视化。（请参见图）。
免疫沉淀分析：
10 ug该抗体从500 ug 3T3/A31 RIPA裂解液中免疫沉淀的HuR（请参见图）。
免疫细胞化学分析：
使用抗HuR（红色）对HeLa，NIH/3T3进行共聚焦IF分析。肌动蛋白丝已用AlexaFluor 488-鬼笔环肽（绿色）标记。细胞核用DAPI（蓝色）染色（请参见图）。
使用0.5 μg正常兔IgG或抗HuR抗体对MCF7细胞的RIP裂解液（每个IP 2 X 106细胞当量）进行免疫沉淀。沉淀的蛋白质通过电泳分离，转移到硝酸纤维素膜上并用抗HuR（1.0 μg/mL）进行探测。
使用一步IP-Western试剂盒（GenScript目录号L00231）对蛋白质进行可视化（请参见图）。
蛋白质印迹分析：
通过电泳分离3T3/A31裂解液，转移到PVDF膜上，并用HuR，hu（1:500稀释度）探测。使用与HRP偶联的驴抗兔蛋白可视化，并使用化学发光检测系统可视化。（请参见图）。
免疫沉淀分析：
10 ug该抗体从500 ug 3T3/A31 RIPA裂解液中免疫沉淀的HuR（请参见图）。
免疫细胞化学分析：
使用抗HuR（红色）对HeLa，NIH/3T3进行共聚焦IF分析。肌动蛋白丝已用AlexaFluor 488-鬼笔环肽（绿色）标记。细胞核用DAPI（蓝色）染色（请参见图）。
经RipAb+HuR-RIP验证的抗体&引物组方便地包含抗体&，即特异性对照PCR引物。
品質
RNA结合蛋白免疫沉淀：
使用5 µg正常兔IgG或抗HuR抗体和Magna RIP试剂盒（目录号17-700）对从HeLa细胞制备的RIP裂解液（每个IP 2 x 107细胞当量）进行免疫沉淀。
使用RIP引物ACTB通过qPCR确认了HuR相关RNA的成功免疫沉淀（请参见图）。
请参阅Magna RIP®（目录号17-700）或EZ-Magna RIP（目录号17-701）方案以获取实验详细信息。
使用5 µg正常兔IgG或抗HuR抗体和Magna RIP试剂盒（目录号17-700）对从HeLa细胞制备的RIP裂解液（每个IP 2 x 107细胞当量）进行免疫沉淀。
使用RIP引物ACTB通过qPCR确认了HuR相关RNA的成功免疫沉淀（请参见图）。
请参阅Magna RIP®（目录号17-700）或EZ-Magna RIP（目录号17-701）方案以获取实验详细信息。
標靶描述
35 kDa
外觀
形式：纯化
抗HuR（兔多克隆抗体）。一个小瓶，包含50 μg纯化兔多克隆抗体，溶于100 μL缓冲液中，缓冲液中含有0.05%叠氮化钠和50%甘油中的PBS。在-20°C下液体化。
正常兔IgG。一个小瓶，包含125 μg纯化兔IgG，溶于125 μL含有0.1%叠氮化钠的储存缓冲液。在-20°C下储存。
RIP引物ACTB。一个小瓶，包含75 μL 5 μM人β肌动蛋白（ACTB）特异性引物。在-20°C下储存。
对于： TTG TTA CAG GAA GTC CCT TGC C
REV: ATG CTA TCA CCT CCC CTG TGT G
正常兔IgG。一个小瓶，包含125 μg纯化兔IgG，溶于125 μL含有0.1%叠氮化钠的储存缓冲液。在-20°C下储存。
RIP引物ACTB。一个小瓶，包含75 μL 5 μM人β肌动蛋白（ACTB）特异性引物。在-20°C下储存。
对于： TTG TTA CAG GAA GTC CCT TGC C
REV: ATG CTA TCA CCT CCC CTG TGT G
分析報告
对照
包括阴性对照兔IgG抗体和人β肌动蛋白（ATCB）特异性对照引物。
包括阴性对照兔IgG抗体和人β肌动蛋白（ATCB）特异性对照引物。
法律資訊
MAGNA RIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
儲存類別代碼
12 - Non Combustible Liquids
閃點（°F）
Not applicable
閃點（°C）
Not applicable
Jian Pu et al.
Frontiers in oncology, 11, 754835-754835 (2021-11-05)
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Luana Carvalho et al.
Molecular psychiatry (2023-08-04)
We previously discovered using transcriptomics that rats undergoing withdrawal after chronic ethanol exposure had increased expression of several genes encoding RNA splicing factors in the hippocampus. Here, we examined RNA splicing in the rat hippocampus during withdrawal from chronic ethanol
Heat resistance of Bacillus spores when adhered to stainless steel and its relationship to spore hydrophobicity.
P Simmonds,B L Mossel,T Intaraphan,H C Deeth
Journal of Food Protection null
Jesús Morillo-Bernal et al.
Cancers, 16(2) (2024-01-23)
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