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Ribonucleasa H (RNasa H)

from Escherichia coli H 560 pol A1

• Sinónimos: rnasa h
• UNSPSC Code: 12352204

Propiedades

• biological source: Escherichia coli ( H 560 pol A1)
• Quality Level: 100
• assay: 100%
• form: solution
• specific activity: ~40000 units/mg protein
• packaging: pkg of 100 U
• manufacturer/tradename: Roche
• technique(s): cDNA synthesis: suitable
• color: colorless
• optimum pH: 7.5-9.1
• solubility: water: miscible
• suitability: suitable for molecular biology
• NCBI accession no.: NP_414750.1
• application(s): life science and biopharma
• foreign activity: RNase, none detected (up to 10 U with MS- II- RNA); endonuclease ~10 units, none detected (using lambda-DNA); nicking activity 10 units, none detected
• shipped in: dry ice
• storage temp.: −20°C (−15°C to −25°C)
• Gene Information: Escherichia coli ... rnhA(946955)

Descripción

General description

Endorribonucleasa inespecífica que escinde de manera específica el ARN de los híbridos ARN: ADN. Requiere un mínimo de cuatro pares de bases continuas (ARN:ADN) para su actividad. La RNasa H rompe el ARN para liberar 5′-oligorribonucleótidos.

Origen: E. coli H560 pol A1
Tampón de almacenamiento: Tris-HCl 25 mM, KCl 50 mM, ditiotreitol 1 mM, EDTA 0,1 mM, glicerol al 50 % (v/v), pH 8,0 (+4°C)
Volumen de actividad: 1 x 103 U/ml analizadas según Hillenbrand y Staudenbauer.

La ribonucleasa H (RNasa H) es una endorribonucleasa inespecífica, localizada en el núcleo y el citoplasma. Es ubicua y está ampliamente presente entre muchos organismos, entre ellos los virus y los seres humanos.

Application

La ribonucleasa H (RNasa H) se ha utilizado para:

• Inicio de la síntesis de ADN cebado con ARN in vivo
• Eliminación del ARNm durante la síntesis de la segunda cadena de ADNc
• Escisión específica de sitio del ARN
• Detección de regiones ARN:ADN en el ADN bicatenario de origen natural
• Eliminación de secuencias poli (A) del ARNm si hay oligo (dT) presentes
• Extracción de ARN y reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa con transcriptasa inversa (RT-PCR)

Biochem/physiol Actions

La ribonucleasa H (RNasa H) escinde de manera específica el ARN en los híbridos ARN:ADN. Requiere un mínimo de cuatro pares de bases continuas (ARN:ADN) para su actividad. La RNasa H rompe el ARN para liberar 5′-oligorribonucleótidos. La RNasa H se asocia con la inmunidad a los ácidos nucleicos. La utilización de RNasa H para degradar el ARNm tiene como consecuencia la reducción del 80% del ARNm y la expresión de proteínas. La RNasa H reconoce el codón de inicio y las regiones 3′ y 5′ no traducidas. Esta enzima participa en la replicación del ADN.

Features and Benefits

• Elimina posibles fuentes de errores de la PCR.
• Aumenta la accesibilidad de los cebadores durante la PCR subsiguiente.

Quality

Ausencia de endonucleasas, actividades melladoras (nicking) y ribonucleasas.

Unit Definition

La RNasa H se analiza según Hillenbrand y Staudenbauer. Una unidad de RNasa H es la cantidad de enzima que produce 1 nmol de ribonucleótidos solubles en ácido a partir de [³H] poli(A) x poli(dT) en 20 minutos a +37 °C en las condiciones de análisis establecidas.

Volumen de actividad: aproximadamente 1 U/μl

Preparation Note

Activador: La enzima tiene su máxima actividad en presencia de reactivos SH

Storage and Stability

Guardar a -15–-25 °C. (Sin abrir)

Other Notes

Sólo para investigación en ciencias de la vida. No indicada para procedimientos diagnósticos. La utilización de la RNasa H después de la etapa de síntesis del ADNc puede aumentar la sensibilidad de una retro-PCR en dos etapas.

Información de seguridad

• Storage Class: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk_germany: WGK 1
• flash_point_f: does not flash
• flash_point_c: does not flash