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P5147

Sigma-Aldrich

Protéase from Streptomyces griseus

Type XIV, ≥3.5 units/mg solid, powder

Synonyme(s) :

Actinase E, Pronase E

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About This Item

Numéro CAS:
Numéro CE :
Numéro MDL:
Code UNSPSC :
12352204
eCl@ss :
32160410
Nomenclature NACRES :
NA.54

Source biologique

Streptomyces griseus

Niveau de qualité

Type

Type XIV

Forme

powder

Activité spécifique

≥3.5 units/mg solid

Solubilité

10 mM NaAc (pH 7.5) and 5 mM CaAc: soluble 0.2 mg/mL at 37 °C, clear, colorless to tan

Conditions d'expédition

wet ice

Température de stockage

−20°C

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Spécificité

Mélange d′au moins trois activités protéolytiques incluant une sérine protéase extracellulaire. En général, les sérines protéases sont actives sur une large gamme de substrats, et cette activité est attribuée à un site actif composé d′un résidu Asp, un résidu His et un résidu Ser dans la molécule. Cette enzyme hydrolyse préférentiellement les liaisons peptidiques du côté carboxylique de l′acide glutamique ou aspartique.

Application

Cette enzyme est plus active dans une plage de pH plus élevée que les protéases alcalines connues, présentant une activité protéolytique même dans une solution de NaOH à 0,2 N. Elle s′avère utile pour la protéolyse des protéines insolubles et pour les études structurelles sur les protéines.
La protéase de Streptomyces griseus a été utilisée :
  • pour la digestion du tissu de noyau gélatineux
  • dans la catalyse de la réaction de Mannich à un récipient
  • pour la déprotéinisation de l′amidon
  • dans la digestion de tranches de cerveau pour la dissociation des cellules

La protéase est généralement utilisée pour les procédures d′isolement des acides nucléiques, en réalisant des incubations de 0,5 à 3,0 heures en présence de dodécylsulfate de sodium à 0,2 % et d′EDTA à 10 mM.
La protéase est une enzyme utilisée pour décomposer les protéines par hydrolyse des liaisons peptidiques. Elle est utilisée pour dégrader les protéines, pour étudier les inhibiteurs de protéases et pour évaluer la cinétique d′inactivation thermique. La protéase est utilisée lors des incubations dans les procédures d′isolement des acides nucléiques. La protéase de Streptomyces griseus a été utilisée dans des études de cristallographie et de cinétique du complexe covalent formé par les aldéhydes tétrapeptides et les protéases à sérine.
L′enzyme proposée par Sigma a été utilisée pour la digestion et l′analyse des complexes antithrombine-héparine. Elle a également été utilisée pour l′isolement de l′amidon résistant aux enzymes.

Actions biochimiques/physiologiques

Ce produit est un mélange d′au moins trois activités caséinolytiques et d′une activité d′aminopeptidase. Les enzymes caséinolytiques correspondent à la protéase A de Streptomyces griseus, la protéase B de Streptomyces griseus et la trypsine de Streptomyces griseus. Ce produit peut être utilisé lorsqu′une dégradation extensive ou complète des protéines est nécessaire. Ce mélange est très peu spécifique et peut digérer la caséine jusqu′à l′obtention de >70 % d′acides aminés individuels.
La protéase dégrade les protéines par hydrolyse des liaisons peptidiques. Les protéases sont inactivées par les inhibiteurs à site actif de sérine, comme le fluorure de phényl méthyl sulfonyle (PMSF) et le di-isopropyl-fluorophosphate. La protéase de Streptomyces griseus est un mélange d′au moins trois activités protéolytiques incluant une sérine protéase extracellulaire. Les sérines protéases sont actives sur une large gamme de substrats, et cette activité est attribuée à un site actif composé d′un résidu Asp, un résidu His et un résidu Ser présents dans la molécule. Cette enzyme hydrolyse préférentiellement les liaisons peptidiques du côté carboxylique de l′acide glutamique ou aspartique.

Caractéristiques et avantages

  • très stable dans la gamme de pH comprise entre 5,0 et 9,0 avec une activité optimale à pH 8,8
  • compatible avec de nombreux tampons d′isolement de l′ADN et de l′ARN
  • accepte un large éventail de substrats

Qualité

Contient de l′acétate de calcium.

Propriétés physiques

Complètement inactivée par chauffage à une température supérieure à 80 °C pendant 15 à 20 minutes.

Définition de l'unité

Une unité hydrolyse la caséine et produit une couleur équivalente à 1,0 μmole (181 μg) de tyrosine par min à pH 7,5 et à 37 °C (couleur obtenue avec le réactif de Folin-Ciocalteu).

Notes préparatoires

Isolée à partir de milieu de culture de S. griseus.

Produit(s) apparenté(s)

Réf. du produit
Description
Tarif

Pictogrammes

Health hazardExclamation mark

Mention d'avertissement

Danger

Mentions de danger

Classification des risques

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

Organes cibles

Respiratory system

Code de la classe de stockage

11 - Combustible Solids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 2

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable

Équipement de protection individuelle

Eyeshields, Gloves, type N95 (US)


Certificats d'analyse (COA)

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G D Brayer et al.
Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 76(1), 96-100 (1979-01-01)
X-ray crystallographic data show that a specific tetrapeptide aldehyde inhibitor (N-acetylprolylalanylprolylphenylalaninal) forms a stable, covalent, tetrahedral addition complex with the serine protease, SGPA, from Streptomyces griseus. Earlier proposals, based on kinetic measurements, for the covalent nature of such linkages are
Protease-catalysed direct asymmetric Mannich reaction in organic solvent
Xue Y, et al.
Scientific reports, 2, 761-761 (2012)
A Chan et al.
The Journal of biological chemistry, 272(35), 22111-22117 (1997-08-29)
Although heparin has been used clinically for prophylaxis and treatment of thrombosis, it has suffered from problems such as short duration within compartments in vivo that require long term anticoagulation. A covalent antithrombin-heparin complex has been produced with high anticoagulant
An improved fractionation system for pronase on CM-sephadex.
J Jurásek et al.
Canadian journal of biochemistry, 49(11), 1195-1201 (1971-11-01)
Simone Valentin Hansen et al.
PloS one, 13(10), e0205461-e0205461 (2018-10-12)
Drosophila DNA replication-related element binding factor (DREF) is a transcription regulatory factor that binds the promoters of many genes involved in replication and cell proliferation and is required for normal cell cycle progression. Human DREF/zinc finger BED domain-containing protein 1

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