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DUO92007

Sigma-Aldrich

Réactifs de détection in situ Duolink® Orange

Synonyme(s) :

in situ Proximity Ligation Assay reagent, Protein Protein Interaction Assay reagent

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About This Item

Code UNSPSC :
12352200
Nomenclature NACRES :
NA.32

Gamme de produits

Duolink®

Technique(s)

proximity ligation assay: suitable

Fluorescence

λex 554 nm; λem 576 nm (Cyanine 3; Zeiss Filter set 20)

Adéquation

suitable for fluorescence

Conditions d'expédition

dry ice

Température de stockage

−20°C

Application

L'essai de ligature de proximité (Proximity Ligation Assay, PLA®) Duolink® permet la détection endogène des interactions entre protéines, des modifications post-traductionnelles et du niveau d'expression des protéines au niveau monomoléculaire, sur des cellules fixées et des échantillons de tissus.

Pour utiliser ce produit, suivez le Protocole Duolink® par fluorescence in situ. Des instructions succinctes sont également disponibles.

Consultez notre Portail d'information sur les essais PLA Duolink® pour en savoir plus sur la façon de réaliser une expérience Duolink®, les applications, la résolution des problèmes et bien plus encore.

Pour réaliser une expérience PLA in situ Duolink® complète, vous avez besoin de deux anticorps primaires (validés par PLA, IHC, ICC ou IF) reconnaissant deux épitopes cibles. Il vous faut également une paire de sondes PLA de différentes espèces (une PLUS et une MOINS), des réactifs de détection, des tampons de lavage et un milieu de montage. Notez que les anticorps primaires doivent provenir de la même espèce que les sondes PLA Duolink®. L'analyse se fait sur un équipement d'analyse par immunofluorescence standard.

Spécificité
Les réactifs de détection par fluorescence orange sont souvent utilisés avec un filtre Cyanine 3.

Note d'application
Deux anticorps primaires développés dans des espèces différentes sont nécessaires. Testez vos anticorps primaires (de type IgG, monoclonaux ou polyclonaux) avec un test standard d'immunofluorescence (IF), d'immunohistochimie (IHC) ou d'immunocytochimie (ICC) pour déterminer les conditions optimales de fixation, de blocage et de titrage. Les réactifs de PLA in situ Duolink® peuvent être utilisés sur des cellules fixées, des cellules centrifugées sur un appareil Cytospin, des cellules cultivées sur une lame, fixées au formol et incluses dans la paraffine (FFPE), ou du tissu (frais ou congelé). Aucun nombre minimal de cellules n'est requis.

Laissez-nous faire le travail pour vous, et découvrez notreProgramme de service sur mesure pour accélérer vos projets avec Duolink®

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Spécificité
Les réactifs de détection par fluorescence dans l'orange sont souvent utilisés avec un filtre pour cyanine 3.

Note d'application
Cette application nécessite deux anticorps primaires produits par des espèces différentes. Testez vos anticorps primaires (de type IgG, monoclonaux ou polyclonaux) avec un test standard d'immunofluorescence (IF), d'immunohistochimie (IHC) ou d'immunocytochimie (ICC) pour déterminer les conditions optimales de fixation, de blocage et de titrage. Les réactifs de in situ Duolink® peuvent être utilisés sur des cellules fixées, des cellules centrifugées sur un appareil Cytospin, des cellules cultivées sur une lame, fixées au formol et incluses en paraffine (FFPE), ou du tissu (frais ou congelé). Aucun nombre minimal de cellules n'est requis.

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Caractéristiques et avantages

  • Aucune surexpression ou manipulation génétique nécessaire
  • Grande spécificité (moins de faux positifs)
  • Sensibilité à une seule molécule du fait de l'amplification par cercle roulant
  • Quantification relative possible
  • Aucun équipement spécial requis
  • Plus rapide et plus simple que la technique FRET
  • Plus précis qu'une co-immunoprécipitation
  • Résultats prêts à être publiés

Composants

Ce produit est constitué des éléments suivants :
  • 5x ligature - contient des oligonucléotides qui s′hybrident aux sondes PLA ainsi que tous les éléments nécessaires à la ligature, hormis la ligase
  • 1x ligase (1 unité/μl)
  • 1x polymérase (10 unités/μl)
  • 5x amplification Orange - contient tous les éléments nécessaires à l′amplification par cercle roulant (RCA), hormis la polymérase Contient également des sondes oligonucléotidiques marquées avec un fluorophore qui s′hybride au produit de RCA.
Se reporter à la fiche technique pour de plus amples informations.

Éléments non inclus dans le kit de détection :

Anticorps primaires, sondes PLA, tampons de lavage, milieu de montage

Informations légales

Duolink is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
PLA is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Pictogrammes

Health hazard
GHS08

Mention d'avertissement

Danger

Mentions de danger

H334

Conseils de prudence

P261 - P284 - P501

Classification des risques

Resp. Sens. 1

Code de la classe de stockage

10 - Combustible liquids

Certificats d'analyse (COA)

Recherchez un Certificats d'analyse (COA) en saisissant le numéro de lot du produit. Les numéros de lot figurent sur l'étiquette du produit après les mots "Lot" ou "Batch".

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