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NA0410

Sigma-Aldrich

Kit de maxipreparación de plásmidos sin endotoxinas GenElute™ HP

greener alternative

sufficient for 25 preparations

Sinónimos:

Gen Elute, Kit de plásmidos sin endotoxinas GenElute

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About This Item

Código UNSPSC:
41105501
NACRES:
NA.52

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uso

sufficient for 25 preparations

características de los productos alternativos más sostenibles

Designing Safer Chemicals
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sustainability

Greener Alternative Product

técnicas

DNA extraction: suitable

categoría alternativa más sostenible

Aligned,

temp. de almacenamiento

15-25°C

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Descripción general

El kit maxipreparación de plásmidos sin endotoxinas GenElute HP ofrece un método sencillo y rápido para el aislamiento del ADN plasmídico sin endotoxinas de los cultivos de E. coli recombinantes. El kit utiliza un formato de vacío con una columna de filtración para la rápida eliminación del lisado bacteriano y una columna de sílice para la captura de ADN plasmídico. Una disolución patentada une el ADN plasmídico a la columna de unión y evita que las endotoxinas se adsorban. La tecnología permite al usuario alcanzar constantemente niveles de endotoxinas inferiores a 0,1 unidades de endotoxina por μg de ADN plasmídico.

El ADN de alta calidad sin endotoxinas está listo para su uso inmediato en las aplicaciones más exigentes, como la transfección con células sensibles a las endotoxinas.

Aplicación

El kit de maxipreparación de plásmidos sin endotoxinas GenElute™HP se ha utilizado en el aislamiento de plásmidos del hígado de cerdo[1] y de células Escherichia coli competentes.[2]

Características y beneficios

  • Hasta 1,2 mg de ADN plasmídico de alta copia con niveles de endotoxinas de ≤0,1 UE/μg
  • Solo 35 minutos desde el sedimento celular hasta el plásmido purificado
  • Cómodo formato de vacío

Principio

Se recolecta un cultivo de E. coli recombinante mantenido durante la noche con centrifugación y se somete a un procedimiento del lisis alcalina-SDS modificada. El lisado se clarifica mediante filtración seguida de la adición de una disolución de unión que se ha optimizado para preparaciones plasmídicas sin endotoxinas. El ADN plasmídico se captura luego en sílice, mientras que se evita la adsorción de las endotoxinas en la membrana. Dos pasos de lavado eliminan los contaminantes. Por último, el ADN ligado se diluye en agua sin endotoxinas. El ADN plasmídico recuperado se encuentra predominantemente en su forma superhelicoidal. El ADN y el ARN genómicos están por debajo de los niveles detectables por electroforesis en gel de agarosa teñida con bromuro de etidio.

Otras notas

Si desea más información, puede ver www.sigma-aldrich.com/genelutehp.

Información legal

GenElute is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

Palabra de señalización

Danger

Clasificaciones de peligro

Acute Tox. 4 Oral - Eye Irrit. 2 - Flam. Liq. 3 - Met. Corr. 1 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

Órganos de actuación

Central nervous system

Código de clase de almacenamiento

3 - Flammable liquids

Punto de inflamabilidad (°F)

77.0 °F - closed cup

Punto de inflamabilidad (°C)

25 °C - closed cup

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Lot/Batch Number
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Endotoxin-free Plasmid DNA Purification

GenElute HP Plasmid Maxiprep Kit isolates endotoxin-free plasmid DNA in 35 minutes, meeting industry standards.

Preguntas

1–6 de 6 Preguntas  

  1. Do the binding columns fit on other manufacturers’ manifolds?

    1 respuesta

    1. Yes. The columns fit on all standard vacuum manifolds.

      ¿Le ha resultado útil?

  2. Is plasmid DNA isolated with this kit suitable for use in transfection?

    1 respuesta

    1. Yes. However, if you are currently required to use an endofree plasmid purification kit, we recommend using the GenElute HP Endotoxin-free Kit.

      ¿Le ha resultado útil?

  3. Which format gives a better yield, vacuum or spin?

    1 respuesta

    1. There is no difference in plasmid recovery when using either format.

      ¿Le ha resultado útil?

  4. How do the GenElute HP Plasmid Kits differ from other plasmid purification systems?

    1 respuesta

    1. The GenElute HP Plasmid Kits are much faster than other commercially available kits. A filter syringe is used for preparing the cleared lysate, which replaces a lengthy centrifugation step. These kits also offer the option of using a vacuum or spin purification format rather than a gravity drip to bind, wash and elute the plasmid. In addition, samples are eluted in Tris buffer so there are no alcohol precipitations required.

      ¿Le ha resultado útil?

  5. What is the expected yield of plasmid DNA that you can isolate from these kits?

    1 respuesta

    1. Yields can reach as high as 350 mg for a midiprep and 1.2 mg for a maxiprep. As with any protocol, lower yields can be expected with low copy plasmids.

      ¿Le ha resultado útil?

  6. How long does it take to isolate plasmid using the vacuum format?

    1 respuesta

    1. A midiprep or maxiprep requires only 30 minutes to complete.

      ¿Le ha resultado útil?

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