PRON-RO

Pronasa

from Streptomyces griseus

• Sinónimos: proteasa inespecífica
• Comisión internacional de enzimas: 3.4.24.4 (BRENDA, IUBMB)
• Código UNSPSC: 12352204

Propiedades

• origen biológico: Streptomyces griseus
• Nivel de calidad: 100
• esterilidad: non-sterile
• Formulario: lyophilized powder
• envase: pkg of 1 g (10165921001); pkg of 5 g (11459643001)
• fabricante / nombre comercial: Roche
• concentración: 0.5-2 mg/mL
• Parámetros: 35-40 °C optimum reaction temp.
• técnicas: DNA extraction: suitable
• color: white
• pH óptimo: 7.0-8.0
• intervalo de pH: 6.0-9.0
• solubilidad: water: soluble 10-20 g/L
• idoneidad: suitable for molecular biology
• Nº de acceso NCBI: WP_012381357.1
• Nº de acceso UniProt: B1W0S5; P00776
• aplicaciones: life science and biopharma
• actividad extraña: Deoxyribonuclease <0.002 U/mg ( based on lyoph.); Ribonuclease <0.002 U/mg ( based on lyoph.)
• temp. de almacenamiento: 2-8°C
• Información sobre el gen: Streptomyces griseus ... SGR_RS27460(6214424)

Descripción

Descripción general

a 40°C con caseína como sustrato, pH 7,5, equivalente a aproximadamente 1270 PU/mg o aproximadamente 25 PUK/mg

Especificidad

La pronasa tiene una amplia especificidad al descomponer prácticamente todas las proteínas en sus aminoácidos constituyentes; resuelve ácidos carboxílicos y alcoholes.

Aplicación

Uso de pronasa para hidrolizar por completo las proteínas en aplicaciones experimentales. La pronasa se utiliza para la degradación de proteínas durante el aislamiento del ADN y el ARN, como en la extracción del ADN de los fagos o el aislamiento del ADN plasmídico. No es necesario permitir que la pronasa se autodigiera antes de su uso. También se utiliza en histoquímica y en cultivos celulares para disociación de los tejidos junto con la colagenasa y la tripsina,[1][2][3] y para la producción de glucopéptidos a partir de glucoproteínas purificadas. Se ha utilizado para la descorionación de los embriones del pez cebra.[4]

Acciones bioquímicas o fisiológicas

La pronasa tiene una amplia especificidad. No obstante, suele utilizarse cuando se requiere una degradación extensa o completa de las proteínas. Entre sus aplicaciones destacan el análisis de proteínas en los orgánulos celulares, la eliminación de las proteínas durante el aislamiento del ADN y el ARN, y la producción de hidrolizados de proteínas para el análisis de aminoácidos.[5] Además, la pronasa supera a la tripsina en su capacidad para dispersar las líneas celulares de fibroblastos, destacando tanto en el desprendimiento de monocapas como en la creación de suspensiones unicelulares.[6]

Definición de unidad

Una unidad de actividad proteasa inespecífica aumenta la velocidad de liberación de aminoácidos y péptidos folin-positivos de la caseína a +40 °C y pH 7,5. Para una unidad (U) se libera 1 μmol/min de tirosina y para la unidad «PU», el valor es de 1 μg/minuto (1 U = 181 PU); para la unidad «PUK», es de 0,1/minuto (se mide el cambio en la absorbancia de azul de molibdeno, formado por reacción con el reactivo de folin en condiciones tales que 1 PUK = 50 PU).

Nota de preparación

Estabilizadores: protección efectiva de los iones calcio

La preparación contiene acetato de calcio al 20% para estabilidad. Carece de almidón, como se indica en los procedimientos de control de calidad vigentes. La actividad de una disolución diluida que contenía calcio 0,01-0,1 M fue estable durante 24 horas a pH neutro entre 4 y 8 °C. La pronasa está también protegida de la inactivación por calor por bajos niveles de calcio.
Concentración de trabajo: de 0,5 a 2 mg/ml
Disolución de trabajo: Se recomienda agua destilada como disolvente.
La disolución de reserva se prepara añadiendo pronasa en polvo a agua destilada (de 10 a 20 mg/ml).
Condiciones de almacenamiento (disolución de trabajo): entre -15 y -25 °C

Reconstitución

El liofilizado es soluble en agua (de 10 a 20 mg/ml).

Almacenamiento y estabilidad

Conservar en seco

Otras notas

Sólo para investigación en ciencias de la vida. No indicada para procedimientos diagnósticos.

Información de seguridad

• Pictogramas: GHS07,GHS08
• Palabra de señalización: Danger
• Frases de peligro: H315 - H319 - H334 - H335
• Consejos de prudencia: P261 - P264 - P280 - P284 - P304 + P340 + P312 - P342 + P311
• Clasificaciones de peligro: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• Órganos de actuación: Respiratory system
• Código de clase de almacenamiento: 11 - Combustible Solids
• Clase de riesgo para el agua (WGK): WGK 1
• Punto de inflamabilidad (°F): does not flash
• Punto de inflamabilidad (°C): does not flash