DIUTPS-RO

Digoxigenina-11-dUTP estable a los álcalis

• Sinónimos: Digoxigenina-11-dUTP estable a los álcalis
• Código UNSPSC: 41105500

Propiedades

• Ensayo: ≥85% (HPLC)
• Nivel de calidad: 100
• Formulario: solution
• mol peso: M_r 1090.7
• envase: pkg of 125 μL (11558706910 [1 mM]); pkg of 5 × 125 μL (11570013910 [5x1 mM]); pkg of 25 μL (11093088910 [1 mM])
• fabricante / nombre comercial: Roche
• λmáx.: 222 and 292 nm; 22430 and 8780
• temp. de almacenamiento: −20°C

Descripción

Descripción general

La digoxigenina-11-dUTP estable a los álcalis se proporciona en disolución de sal de tetralitio 1 mM.

Aplicación

La digoxigenina-11-dUTP estable a los álcalis se ha utilizado para marcar sondas destinadas a .
hibridación fluorescente in situ (FISH)[1][2] y reacción en cadena de la polimerasa (PCR)[3]
Nota: cuando este nucleótido se somete a NaOH 0,1 - 0,5 a +15 a +25°C, el resto DIG se mantendrá unido. Es por tanto ideal para su utilización en ADN marcado con DIG que tenga que sobrevivir a la exposición a tratamiento alcalino. Sin embargo, si lo que intenta es hacer una sonda marcada con DIG que pueda separarse mediante desnaturalización alcalina (por ejemplo, durante la deshibridación y la producción de nuevas sondas de transferencia), no utilice esta preparación estable a los álcalis. En cambio, utilice la forma lábil a álcalis del DIG-11-dUTP.

Acciones bioquímicas o fisiológicas

La digoxigenina (DIG)-11-trifosfato de desoxiuridina (dUTP) sustituye al trifosfato de desoxitimidina (dTTP) en la reacción de marcaje aleatorio de cebadores ADN o en el traslado de mellas en una proporción del 35 % de DIG-11-dUTP y un 65 % de dTTP. La DIG-11-dUTP también puede sustituir al dTTP en el marcaje durante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) (por ejemplo, con la ADN polimerasa Taq), prolongación en 3′ (con transferasa terminal) y síntesis de ADNc (por ejemplo, con transcriptor o transcriptasa inversa M-MuLV). Es ideal como sustrato para la ADN polimerasa, la ADN polimerasa Taq, la transferasa terminal y la transcriptasa inversa.

Características y beneficios

La digoxigenina se une al trifosfato de desoxiuridina por medio de un enlace éter resistente a álcalis.

Resistencia a álcalis: La preparación es estable en presencia de NaOH 0,1 - 0,5 M entre +15 y +25°C.

Calidad

Análisis típico: Al menos el 85 % de DIG-11-dUTP (HPLC, % de área).
Función probada mediante RPL.

Nota de preparación

Disolución de trabajo: Recomendamos preparar una mezcla de desoxinucleótidos que contenga dATP, dCTP, dGTP, dTTP (10 mM, de cada uno); (por ejemplo, para la preparación de una mezcla de 100 μl de nucleótidos, añada 10 μl de dATP, dCTP, dGTP, dTTP (cada uno) a 60 μl de agua, calidad PCR).
Condiciones de almacenamiento (disolución de trabajo): Puede producirse una descomposición de aproximadamente el 5% en 4 semanas entre 15 y 25 °C.

Otras notas

Sólo para investigación en ciencias de la vida. No indicada para procedimientos de diagnóstico.

Información de seguridad

• Código de clase de almacenamiento: 12 - Non Combustible Liquids
• Clase de riesgo para el agua (WGK): nwg
• Punto de inflamabilidad (°F): does not flash
• Punto de inflamabilidad (°C): does not flash