11635379001
Roche
Kit de ligadura rápida de ADN
Sinónimos:
kit de ligadura de adn, rápido, kit de ligadura, adn rápido
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About This Item
Código UNSPSC:
41106618
Productos recomendados
uso
sufficient for 40 reactions (DNA ligation)
Nivel de calidad
fabricante / nombre comercial
Roche
temp. de almacenamiento
−20°C
Descripción general
El kit de ligadura de ADN Rapid contiene todos los reactivos necesarios para la ligadura. No se requieren otros reactivos ni aditivos. El kit puede ligar rápidamente el ADN con extremos romos o cohesivos entre +15 y +25°C. Dependiendo de la concentración de ADN en la reacción, los productos de la ligadura serán circulares (si la concentración de ADN es baja) o concatémeros (si la concentración de ADN es alta). El ADN ligado es adecuado para uso directo en experimentos de transformación.
Nota: La electroporación puede realizarse después de la ligadura en combinación con el kit de purificación de productos de PCR de High Pure®.
Nota: La electroporación puede realizarse después de la ligadura en combinación con el kit de purificación de productos de PCR de High Pure®.
Especificidad
ADN con extremos romos o cohesivos (≤200 ng).
Inactivación por calor: 10 min a 65 °C (lipasa T4)
La inactivación de la ligasa T4 solo es necesaria si la mezcla de reacción de ligadura va a utilizarse en experimentos distintos de los ensayos de transformación.
Nota: La inactivación por calor de la mezcla de reacción de ligadura antes de la transformación hace que el número de colonias transformadas disminuya de manera notable (> factor de 20).
Actividad estrella: También debe evitarse la actividad estrella. Cuando vaya a realizar digestiones dobles con enzimas propensas a actividad estrella, consulte el póster de enzimas de restricción de Roche (o el catálogo de ciencias aplicadas de Roche) para seleccionar el tampón óptimo para una combinación de enzimas dada. Siempre que sea posible, utilice el tampón H para digestiones dobles.
Inactivación por calor: 10 min a 65 °C (lipasa T4)
La inactivación de la ligasa T4 solo es necesaria si la mezcla de reacción de ligadura va a utilizarse en experimentos distintos de los ensayos de transformación.
Nota: La inactivación por calor de la mezcla de reacción de ligadura antes de la transformación hace que el número de colonias transformadas disminuya de manera notable (> factor de 20).
Actividad estrella: También debe evitarse la actividad estrella. Cuando vaya a realizar digestiones dobles con enzimas propensas a actividad estrella, consulte el póster de enzimas de restricción de Roche (o el catálogo de ciencias aplicadas de Roche) para seleccionar el tampón óptimo para una combinación de enzimas dada. Siempre que sea posible, utilice el tampón H para digestiones dobles.
Aplicación
El kit de ligadura de ADN Rapid une covalentemente fragmentos de ADN de extremo escalonado o fragmentos de extremo romo, por ejemplo, para:
- Clonación en vectores plásmidos o fagos.
- Adición de conectores a plásmidos u otros ADN.
- Recircularización del ADN lineal.
Características y beneficios
- Rápido: la ligadura tarda solo 5 minutos.
- Cómodo: la ligadura se realiza entre +15°C y +25°C.
- Fácil: el kit contiene todos los tampones y enzimas necesarios.
- Flexible: el kit puede utilizarse para todas las reacciones de ligadura habituales.
- Fiable: procedimiento sencillo y reactivos listos para usar que garantizan exactitud y reproducibilidad.
Envase
1 kit que contiene 3 componentes.
Nota de preparación
Tiempo de incubación: 5 minutos
Proporción molar del ADN que se va a ligar: La proporción molar de ADN vector a ADN insertado en la reacción de ligadura convencional es normalmente de 1:3. Sin embargo, cuando sea apropiado, usted puede usar otras proporciones. Por ejemplo:
Si los dos ADN difieren mucho en longitud, pruebe una relación de 1:1 o 1:2
Si los extremos de los dos ADN son romos, pruebe con una proporción de 1:5
Proporción molar del ADN que se va a ligar: La proporción molar de ADN vector a ADN insertado en la reacción de ligadura convencional es normalmente de 1:3. Sin embargo, cuando sea apropiado, usted puede usar otras proporciones. Por ejemplo:
Si los dos ADN difieren mucho en longitud, pruebe una relación de 1:1 o 1:2
Si los extremos de los dos ADN son romos, pruebe con una proporción de 1:5
Otras notas
El nuevo kit Rapid DNA Dephos y ligadura contiene todos los reactivos del kit de ligadura Rapid del ADN además de nuestra nueva fosfatasa alcalina Rapid.
Información legal
High Pure is a registered trademark of Roche
Solo componentes del kit
Referencia del producto
Descripción
- Dilution Buffer 5x concentrated
- T4 DNA Ligation Buffer 2x concentrated
- T4 DNA Ligase 5 U/μl
Código de clase de almacenamiento
12 - Non Combustible Liquids
Clase de riesgo para el agua (WGK)
WGK 1
Punto de inflamabilidad (°F)
does not flash
Punto de inflamabilidad (°C)
does not flash
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Protocolos
Rapid DNA Ligation Kit Protocol
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