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DUO92004

Sigma-Aldrich

Sonde PLA® in situ DuolinkDuolink® anti-souris MINUS

Affinity purified Donkey anti-Mouse IgG (H+L)

Synonyme(s) :

in situ Proximity Ligation Assay reagent, Protein Protein Interaction Assay reagent

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About This Item

Code UNSPSC :
12352203
Nomenclature NACRES :
NA.32

Source biologique

donkey (polyclonal)

Niveau de qualité

Forme d'anticorps

affinity purified immunoglobulin (secondary antibody)

Type de produit anticorps

primary antibodies

Gamme de produits

Duolink®

Espèces réactives

mouse

Technique(s)

immunofluorescence: suitable
proximity ligation assay: suitable

Adéquation

suitable for brightfield
suitable for fluorescence

Conditions d'expédition

wet ice

Température de stockage

2-8°C

Description générale

La sonde PLA® MINUS anti-souris in situ Duolink® contient de l′IgG (H+L) d′âne anti-souris purifiée par affinité, qui réagit avec l′ensemble de la molécule d′IgG de souris et également avec les chaînes légères d′autres immunoglobulines de souris.

Application

L'essai de ligature de proximité (Proximity Ligation Assay, PLA®) Duolink® permet la détection endogène des interactions entre protéines, des modifications post-traductionnelles et du niveau d'expression des protéines au niveau monomoléculaire, sur des cellules fixées et des échantillons de tissus.

Selon les réactifs de détection employés, ce produit peut être utilisé pour le protocole à fluorescence in situ Duolink® ou le protocole à fond clair in situ Duolink®.

Pour réaliser une expérience PLA in situ Duolink® complète, vous avez besoin de deux anticorps primaires (validés par PLA, IHC, ICC ou IF) reconnaissant deux épitopes cibles. Il vous faut également une paire de sondes PLA de deux espèces différentes (une sonde positive et une sonde négative), des réactifs de détection, des tampons de lavage et du milieu de montage. Notez que les anticorps primaires doivent provenir de la même espèce que les sondes PLA Duolink®. L'analyse s'effectue sur un équipement de test d'immunofluorescence standard. De la peroxydase de raifort (HRP) est également disponible pour la méthode de détection en fond clair.
Spécificité
La sonde PLA anti-souris réagit avec l'ensemble de la molécule d'IgG de souris ainsi qu'avec les chaînes légères d'autres immunoglobulines de souris. Cette sonde peut réagir de façon croisée avec les anticorps de rat, mais elle présente une très faible réactivité croisée avec les protéines sériques humaines, de bovin, de poulet, de chèvre, de cobaye, de hamster doré, de cheval, de lapin et de mouton. Ce produit doit être utilisé avec une sonde positive d'une espèce différente. Consultez notre guide de sélection de produits pour obtenir de plus amples informations.

Note d'application
Cette application nécessite deux anticorps primaires produits par des espèces différentes. Testez vos anticorps primaires (de type IgG, monoclonaux ou polyclonaux) avec un test standard d'immunofluorescence (IF), d'immunohistochimie (IHC) ou d'immunocytochimie (ICC) pour déterminer les conditions optimales de fixation, de blocage et de titrage. Les réactifs de PLA in situ Duolink® peuvent être utilisés sur des cellules fixées, des cellules centrifugées sur un appareil Cytospin, des cellules cultivées sur une lame, fixées au formol et incluses en paraffine (FFPE), ou du tissu (frais ou congelé). Aucun nombre minimal de cellules n'est requis.

Laissez-nous faire le travail pour vous et découvrez notre Programme de services sur mesure pour accélérer vos projets Duolink®.

Consulter la liste complète des produits Duolink®.

Caractéristiques et avantages

  • Aucune surexpression ou manipulation génétique nécessaire
  • Grande spécificité (moins de faux positifs)
  • Sensibilité à une seule molécule du fait de l′amplification par cercle roulant
  • Quantification relative possible
  • Aucun équipement spécial requis
  • Plus rapide et plus simple que la technique FRET
  • Exactitude accrue par rapport à co-IP
  • Résultats prêts à être publiés

Composants

Ce produit est constitué des éléments suivants :
  • 5x Sonde PLA MINUS anti-souris - anticorps secondaire d′âne anti-souris conjugué à un oligonucléotide MINUS
  • 1x Solution de blocage - réactif permettant de bloquer l′échantillon
  • 1x Diluant pour anticorps - pour la dilution des sondes PLA et des anticorps primaires
Se reporter à la fiche technique pour de plus amples informations.

Notes préparatoires

Stockage et stabilité : conserver la sonde PLA MINUS anti-souris entre 2 et 8 °C. Ne pas conserver la solution diluée de sonde PLA MINUS anti-souris.

Informations légales

Duolink is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
PLA is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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Pictogrammes

Exclamation markEnvironment

Mention d'avertissement

Warning

Mentions de danger

Classification des risques

Aquatic Chronic 2 - Skin Sens. 1

Code de la classe de stockage

12 - Non Combustible Liquids

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable


Certificats d'analyse (COA)

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Proximal Ligation Assay (PLA) on Lung Tissue and Cultured Macrophages to Demonstrate Protein-protein Interaction.
Mendez R and Santanu B
Bio-protocol, 7(21) (2017)
Novel function of ceramide for regulation of mitochondrial ATP release in astrocytes.
Kong J N, et al.
Journal of Lipid Research, M081877-M081877 (2018)
Interaction of the Mouse Polyomavirus Capsid Proteins with Importins Is Required for Efficient Import of Viral DNA into the Cell Nucleus.
Soldatova I, et al.
Viruses, 10(4), 165-165 (2018)
Roberto Di Maio et al.
Science translational medicine, 10(451) (2018-07-27)
Missense mutations in leucine-rich repeat kinase 2 (LRRK2) cause familial Parkinson's disease (PD). However, a potential role of wild-type LRRK2 in idiopathic PD (iPD) remains unclear. Here, we developed proximity ligation assays to assess Ser1292 phosphorylation of LRRK2 and, separately
M Aubele et al.
British journal of cancer, 103(5), 663-667 (2010-08-12)
Protein tyrosine kinase 6 (PTK6; breast tumour kinase) is overexpressed in up to 86% of the invasive breast cancers, and its association with the oncoprotein human epidermal growth factor receptor 2 (HER2) was shown in vitro by co-precipitation. Furthermore, expression

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Protocoles

Duolink® PLA reagents enable brightfield detection and quantification of proteins and interactions in tissue samples.

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