Essai de ligature de proximité Duolink®
Les essais de ligature de proximité (PLA) Duolink® permettent d'étudier les interactions protéine-protéine (IPP) et les modifications post-traductionnelles en produisant un signal fluorescent associé à chaque événement qui peut être visualisé par microscopie ou par cytométrie en flux. Pour étudier les interactions protéine-protéine, la technologie PLA Duolink® s'appuie sur une paire d'anticorps marqués avec des oligonucléotides qui, lorsqu'ils se trouvent à moins de 40 nm, subissent une amplification par cercle roulant pour générer un signal fluorescent particulier après addition de sondes marquées.
Disponible pour la microscopie ainsi que la cytométrie en flux et en quatre couleurs différentes, la technologie PLA Duolink® permet de visualiser de multiples interactions protéine-protéine par cellule. Révélez de nouvelles opportunités de recherche en bénéficiant des performances amplifiées et des avantages de la technologie Duolink® PLA :
- Visualisation des interactions entre protéines : qu'elles soient stables ou transitoires
- Visualisation des modifications post-translationnelles
- Détection des protéines endogènes : sans surexpression ni manipulation génétique
- Haute spécificité : élimination des faux-positifs grâce à l'utilisation de deux anticorps/sondes
- Aucun équipement spécial nécessaire : méthodes classiques basées sur l'immunofluorescence et la cytométrie en flux
Produits Duolink® PLA
- Les kits de démarrage Duolink® PLA Starter contiennent tous les réactifs dont vous avez besoin pour réaliser une expérience de fluorescence et analyser jusqu'à 30 échantillons.
- Les kits Duolink® Probemaker permettent la conjugaison d'un oligomère PLA (positif ou négatif) avec n'importe quel anticorps.
- Les kits Duolink® PLA Multicolor permettent de visualiser de multiples IPP par microscopie.
- Les kits de détection Duolink® flowPLA permettent de réaliser des applications de cytométrie en flux avec quatre couleurs : vert, orange, rouge et rouge lointain.
- Le kit pour détection en fond clair Duolink® PLA Brightfield contient des oligonucléotides marqués à la peroxydase de raifort (HRP pour "Horseradish Peroxidase") qui permettent d'utiliser un microscope optique.
Ressources apparentées
- Application Note: An Introduction to Duolink® PLA
Duolink® PLA protein detection technology is based on in situ proximity ligation assay (PLA), and allows for the detection, visualization, and quantification of protein expression, protein-protein interactions, and post-translational modifications, in unmodified cells and tissue samples within a matter of hours.
- Duolink® Proximity Ligation Assay Instructional Video
This video will show you step-by-step how to perform a Duolink® PLA experiment with cells on a slide that have already been fixed and permeabilized by the user.
- Application Note: How to Optimize the Duolink® Proximity Ligation Assay
To successfully execute a Duolink® PLA experiment, there are some necessary considerations to properly prepare for, setup, and execute the assay protocol.
- Brochure: Amplified Detection Duolink® Proximity Ligation Assay (PLA)
Rely on Duolink® PLA to amplify protein signals by 1000x, allowing you to visually detect proteins and their interactions, all with a straightforward protocol.
- Application Note: Duolink® PLA Probemaker Guide
This guide describes the use of the Duolink® In Situ Probemaker for the conjugation of PLA oligonucleotides (PLUS or MINUS) to any antibody for use in Duolink® PLA experiments.
- Flyer: Duolink® Flow Cytometry
Traditional flow cytometry has been limited in the ability to detect protein interactions and low abundant proteins events — until now.
- Duolink® PLA Fluorescence Protocol
This protocol describes the use of Duolink® PLA reagents for the immunofluorescent detection, visualization, and quantification of individual proteins, protein modifications, and protein interactions in tissue and cell samples.
- Duolink® PLA Brightfield Protocol
This protocol describes the use of Duolink® PLA reagents for the brightfield detection, visualization, and quantification of individual proteins, protein modifications, and protein interactions in tissue and cell samples.
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