MABC604
Anticorps anti-MLKL, clone 3H1
clone 3H1, from rat
Synonyme(s) :
Mixed lineage kinase domain-like protein, MLKL
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About This Item
Code UNSPSC :
12352203
eCl@ss :
32160702
Nomenclature NACRES :
NA.41
Produits recommandés
Source biologique
rat
Niveau de qualité
Forme d'anticorps
purified antibody
Type de produit anticorps
primary antibodies
Clone
3H1, monoclonal
Espèces réactives
mouse
Technique(s)
immunocytochemistry: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable
Isotype
IgG
Numéro d'accès NCBI
Numéro d'accès UniProt
Conditions d'expédition
wet ice
Modification post-traductionnelle de la cible
unmodified
Informations sur le gène
mouse ... Mlkl(74568)
Description générale
La protéine MLKL, aussi connue sous le nom de protéine du type domaine kinase de lignée mixte, et codée par le gène MLKL, est une protéine intéressante qui est nécessaire à l'exécution de la nécrose programmée ou nécroptose, par exemple en réponse à une nécrose induite par le TNF-alpha. La MLKL est un composant du "nécrosome", le complexe multiprotéique qui déclenche la mort cellulaire induite par le facteur de nécrose tumorale (TNF) par nécroptose. La nécrose programmée induite par le TNF-α requiert aussi les activités de RIP1 et RIP3 ("receptor-interacting serine-threonine kinases"), qui elles aussi interagissent directement avec la protéine du type domaine kinase de lignée mixte MLKL. RIP3 est une kinase intervenant en amont, essentielle à la nécroptose. La pseudokinase MLKL agit comme un substrat de RIP3 pour médier la signalisation en aval et, lorsque les deux protéines sont complexées, le complexe RIP3-MLKL est stabilisé par l'AMP-PNP pour adopter une conformation inactive.
Immunogène
Peptide linéaire conjugué à de la KLH correspondant à une séquence issue de la région de liaison à deux hélices (région "brace") en position N-terminale du domaine pseudokinase de la protéine MLKL de souris (Hildebrand, J.M., et al. (2014). Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 111(42):15072-15077; Murphy, J.M., et al. (2013). Immunity. 39(3):443-453).
Épitope : Région "Brace".
Application
Analyse par immunocytochimie : Un lot représentatif a permis de détecter la MLKL dans des fibroblastes de derme de souris (MDF) issus de souris de type sauvage, mais pas dans ceux issus de souris Mlkl-/- (avec la permission du Prof. James M. Murphy, Institut Walter et Eliza Hall, Australie).
Analyse par immunoprécipitation : Un lot représentatif a permis d'immunoprécipiter la MLKL à partir d'un extrait soluble de fibroblastes de derme de souris (MDF) Mlkl-/- hébergeant une construction exprimant la MLKL de souris de type sauvage inductible par doxycycline, uniquement après traitement à la doxycycline, mais pas avant (Murphy, J.M., et al. (2013). Immunity. 39(3):443-453).
Analyse par western blotting : Un lot représentatif a permis de détecter la translocation membranaire induite par traitement au Q-VD-OPh (TSQ ; réf. 551476) d'un fragment N-terminal de la MLKL murine et équine (a.a. 1-180 et 1-189, respectivement) exprimé de façon exogène dans des fibroblastes de derme de souris (MDF) issus de souris Mlkl-/- (Tanzer, M.C., et al. (2016). Cell Death Differ. sous presse).
Analyse par western blotting : Un lot représentatif a permis de détecter la MLKL dans des cellules HT-29 et U937 humaines (Tanzer, M.C., et al. (2015). Biochem. J. 471(2):255-265).
Analyse par western blotting : Des lots représentatifs ont permis de détecter la translocation membranaire de la MLKL dans des fibroblastes de derme de souris (MDF) traités par Q-VD-OPh (TSQ ; réf. 551476) (Tanzer, M.C., et al. (2015). Biochem. J. 471(2):255-265; Hildebrand, J.M., et al. (2014). Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 111(42):15072-15077).
Analyse par western blotting : Des lots représentatifs ont permis de détecter l'expression de la MLKL dans des fibroblastes de souris L292, ainsi que dans des fibroblastes de derme de souris (MDF), des fibroblastes d'embryon de souris (MEF) et des macrophages dérivés de moelle osseuse (BMDM) issus de souris de type sauvage, mais pas dans ceux issus de souris Mlkl-/- (Cook, W.D., et al. (2014). Cell Death Differ. 21(10):1600-1612; Murphy, J.M., et al. (2013). Immunity. 39(3):443-453).
Analyse par western blotting : Un lot représentatif a permis de détecter la MLKL de souris complète recombinante ainsi que les fragments de MLKL correspondant aux a.a. 1-180 et 124-464, mais pas ceux correspondant aux a.a. 1-125 ou a.a. 179-464 (Hildebrand, J.M., et al. (2014). Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 111(42):15072-15077).
Analyse par western blotting : Un lot représentatif a permis de détecter l'expression de la MLKL dans tous les tissus testés issus de souris de type sauvage hormis le cerveau, alors qu'aucune bande cible n'a été observée dans des tissus de souris Mlkl-/- (Murphy, J.M., et al. (2013). Immunity. 39(3):443-453).
Analyse par immunoprécipitation : Un lot représentatif a permis d'immunoprécipiter la MLKL à partir d'un extrait soluble de fibroblastes de derme de souris (MDF) Mlkl-/- hébergeant une construction exprimant la MLKL de souris de type sauvage inductible par doxycycline, uniquement après traitement à la doxycycline, mais pas avant (Murphy, J.M., et al. (2013). Immunity. 39(3):443-453).
Analyse par western blotting : Un lot représentatif a permis de détecter la translocation membranaire induite par traitement au Q-VD-OPh (TSQ ; réf. 551476) d'un fragment N-terminal de la MLKL murine et équine (a.a. 1-180 et 1-189, respectivement) exprimé de façon exogène dans des fibroblastes de derme de souris (MDF) issus de souris Mlkl-/- (Tanzer, M.C., et al. (2016). Cell Death Differ. sous presse).
Analyse par western blotting : Un lot représentatif a permis de détecter la MLKL dans des cellules HT-29 et U937 humaines (Tanzer, M.C., et al. (2015). Biochem. J. 471(2):255-265).
Analyse par western blotting : Des lots représentatifs ont permis de détecter la translocation membranaire de la MLKL dans des fibroblastes de derme de souris (MDF) traités par Q-VD-OPh (TSQ ; réf. 551476) (Tanzer, M.C., et al. (2015). Biochem. J. 471(2):255-265; Hildebrand, J.M., et al. (2014). Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 111(42):15072-15077).
Analyse par western blotting : Des lots représentatifs ont permis de détecter l'expression de la MLKL dans des fibroblastes de souris L292, ainsi que dans des fibroblastes de derme de souris (MDF), des fibroblastes d'embryon de souris (MEF) et des macrophages dérivés de moelle osseuse (BMDM) issus de souris de type sauvage, mais pas dans ceux issus de souris Mlkl-/- (Cook, W.D., et al. (2014). Cell Death Differ. 21(10):1600-1612; Murphy, J.M., et al. (2013). Immunity. 39(3):443-453).
Analyse par western blotting : Un lot représentatif a permis de détecter la MLKL de souris complète recombinante ainsi que les fragments de MLKL correspondant aux a.a. 1-180 et 124-464, mais pas ceux correspondant aux a.a. 1-125 ou a.a. 179-464 (Hildebrand, J.M., et al. (2014). Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 111(42):15072-15077).
Analyse par western blotting : Un lot représentatif a permis de détecter l'expression de la MLKL dans tous les tissus testés issus de souris de type sauvage hormis le cerveau, alors qu'aucune bande cible n'a été observée dans des tissus de souris Mlkl-/- (Murphy, J.M., et al. (2013). Immunity. 39(3):443-453).
L'utilisation de cet anticorps anti-MLKL, clone 3H1, a été validée en immunocytochimie, immunoprécipitation et western blotting pour la détection de la MLKL.
Qualité
Produit évalué par western blotting sur du lysat de tissu cardiaque de souris.
Analyse par western blotting : Une concentration de 0,5 µg/ml de cet anticorps a permis de détecter la MLKL dans 10 µg de lysat de tissu cardiaque de souris.
Analyse par western blotting : Une concentration de 0,5 µg/ml de cet anticorps a permis de détecter la MLKL dans 10 µg de lysat de tissu cardiaque de souris.
Description de la cible
~52 kDa (poids observé). 54,48/30,28 kDa (isoforme 1/2 humaine) et 54,32/53,38 kDa (isoforme 1/2 de souris) (poids déterminés par calcul). Une ou plusieurs bandes non caractérisées peuvent apparaître avec certains lysats cellulaires.
Forme physique
Format : Produit purifié
IgG de rat purifiée dans un tampon contenant de la Tris-glycine 0,1 M (pH 7,4), du NaCl 150 mM et 0,05 % d'azoture de sodium.
Autres remarques
Concentration : La concentration de chaque lot figure sur le certificat d'analyse.
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En option
Réf. du produit
Description
Tarif
Code de la classe de stockage
12 - Non Combustible Liquids
Classe de danger pour l'eau (WGK)
WGK 1
Point d'éclair (°F)
Not applicable
Point d'éclair (°C)
Not applicable
Certificats d'analyse (COA)
Recherchez un Certificats d'analyse (COA) en saisissant le numéro de lot du produit. Les numéros de lot figurent sur l'étiquette du produit après les mots "Lot" ou "Batch".
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RIPK1- and RIPK3-induced cell death mode is determined by target availability.
Cook, WD; Moujalled, DM; Ralph, TJ; Lock, P; Young, SN; Murphy, JM; Vaux, DL
Cell Death and Differentiation null
A V Jacobsen et al.
Cell death & disease, 7, e2051-e2051 (2016-01-19)
Necroptosis is a caspase-independent form of regulated cell death that has been implicated in the development of a range of inflammatory, autoimmune and neurodegenerative diseases. The pseudokinase, Mixed Lineage Kinase Domain-Like (MLKL), is the most terminal known obligatory effector in
D M Moujalled et al.
Cell death & disease, 5, e1086-e1086 (2014-03-01)
Necroptosis is a mechanism by which cells can kill themselves that does not require caspase activity or the presence of the pro-apoptotic Bcl-2 family members Bax or Bak. It has been reported that RIPK3 (receptor interacting protein kinase 3) activates
Joanne M Hildebrand et al.
Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 111(42), 15072-15077 (2014-10-08)
Necroptosis is considered to be complementary to the classical caspase-dependent programmed cell death pathway, apoptosis. The pseudokinase Mixed Lineage Kinase Domain-Like (MLKL) is an essential effector protein in the necroptotic cell death pathway downstream of the protein kinase Receptor Interacting
M C Tanzer et al.
Cell death and differentiation, 23(7), 1185-1197 (2016-02-13)
The pseudokinase, MLKL (mixed-lineage kinase domain-like), is the most terminal obligatory component of the necroptosis cell death pathway known. Phosphorylation of the MLKL pseudokinase domain by the protein kinase, receptor interacting protein kinase-3 (RIPK3), is known to be the key
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