mPAGE®-Lux-Gießsystem für SDS-PAGE-Gele
Entdecken Sie das mPAGE®-Lux-Gießsystem, mit dem Sie gebrauchsfertige SDS-PAGE-Gele in nur 3 Minuten erhalten. Frische SDS-PAGE-Gele, die vorbereitet sind, wenn diese benötigt werden. Wenn Sie Fragen haben und mehr darüber erfahren möchten, wie Sie den Gießprozess beschleunigen können, füllen Sie bitte dieses Formular aus. Unser Team wird sich dann mit Ihnen in Verbindung setzen.
mPAGE®-Lux-Gießsystem für SDS-PAGE-Gele
Wie gießen Sie ein Gel für SDS-PAGE? Das Gießen von Gelen beinhaltet in der Regel das Gießen von Trenn- und Sammelgelen in einem zeitaufwändigen, schrittweise durchgeführten Verfahren. Forschende haben traditionell nur wenige Optionen, ihren Bedarf in Bezug auf das Gießen von Gel und die Elektrophorese abzudecken. Unser innovatives mPAGE®-Lux-Gießsystem für SDS-PAGE-Gele vereint die Flexibilität von handgegossenen Gelen und die Verlässlichkeit von vorgegossenen Gelen: ohne Qualitätsverluste, höheren Zeitaufwand oder die wesentlich höheren Kosten, die mit alternativen Optionen einhergehen. Mit unserem mPAGE®-Lux-Gießsystem stellen Sie Gele in weniger als drei Minuten her. Sie können sich von herkömmlichen Verfahren und deren zeitaufwändigen, manuellen Schritten zur Gelherstellung verabschieden. Das ist überzeugend.
Lesen Sie mehr über
- mPAGE®-Lux-Gießsystem: Eigenschaften und Vorteile
- Die Schritte beim Gießen von Gel
- mPAGE®-Lux-Gießsystem und Bis-Tris-Reagenzienkit
- Protokoll für das Gießen von SDS-PAGE-Gel mit dem mPAGE®-Lux-System
- Nachhaltiges Gießen von Gel mit dem mPAGE®-Lux-Gießsystem
- mPAGE®-Lux-Gießsystem und zugehörige Reagenzien bestellen
mPAGE®-Lux-Gießsystem: Eigenschaften und Vorteile
Das mPAGE®-Lux-Gießsystem ersetzt Ihren Gelgießprozess durch ein schnelleres, einfacheres und sichereres Verfahren mit besser reproduzierbaren Ergebnissen. Ein Minigel härtet mit dem mPAGE®-Lux-Gießsystem in 90 Sekunden aus, wohingegen herkömmliche Verfahren länger als 90 Minuten dauern. Durch unseren Schnellgieß-Workflow mit UV-Bestrahlung wird die Aushärtung der mPAGE®-Lux-Bis-Tris-Reagenzien beschleunigt und die Bis-Tris-Gelchemie ermöglicht im Vergleich zu herkömmlichen Methoden kürzere Laufzeiten.
Die einstufige Photopolymerisation mit präziser Systemsteuerung und weniger Vorbereitungsschritten resultiert in einer geringeren Anzahl Fehlermöglichkeiten. Durch unsere mPAGE®-Gießvorrichtung werden Leckagen verhindert und die Verwendung von Bis-Tris-Gelen bietet eine bessere Bandenqualität als handgegossene Tris-Glycin-Gele. Darüber hinaus basieren sowohl das mPAGE®-Lux-Reagenzienkit, das mPAGE®-TurboMix-Reagenzienkit als auch die vorgegossenen Gele der Marke mPAGE® auf Bis-Tris sowie den gleichen Laufpuffern und Gelfärbemitteln. In unserem mPAGE®-Lux-Gießsystem wird kein APS oder TEMED eingesetzt. Es stellt somit eine sicherere Alternative mit weniger giftigen Chemikalien dar.
Workflow für das traditionelle Gießen von Hand
Abbildung 1.Infografik zum Workflow von traditionellem Gießen von Hand für SDS-PAGE-Gele, in der erweiterte Schritte und Polymerisationszeiten von 90 Minuten und mehr dargestellt werden.
mPAGE®Lux Workflow
Abbildung 2.Traditionelles Gießen von Gel im Vergleich zum mPAGE® Lux Workflow. Gegenüber der herkömmlichen Technologie zum Gießen von Gel erfordert das mPAGE®-Lux-Gießsystem insgesamt weniger Arbeitsschritte und es zeichnet sich durch eine kürzere Polymerisationszeit und geringere Menge an toxischem Abfall aus. Die mit dem mPAGE®-Lux-Gießsystem hergestellten Gele sind mit dem mPAGE®-Mini-Gel-Tank und den Bio-Rad-Mini-PROTEAN-Zellen kompatibel. Für eine hervorragende Auflösung und kürzere Laufzeiten sind unsere mPAGE® Puffer geeignet. Lux-Gele sind mit Bis-Tris-kompatiblen Puffern und Färbereagenzien kompatibel.
Die Schritte beim Gießen von Gel
Das Gießen eines Gels für SDS-PAGE umfasst häufig das Wiegen, das Vormischen der Gellösungen, das Gießen selbst und die Wartezeit für die Polymerisation. Herkömmliche Handguss-Gelmethoden werden zwar oft als wirtschaftlichere Lösung angeführt, sind aber zeitaufwändig und erfordern viele Arbeitsschritte von Hand, die zu inkonsistenten Gelformulierungen führen können. Die Qualität handgegossener Gele und die Daten, die diese liefern können, hängen von der Konsistenz der Formulierung ab, damit kostbare Reagenzien und Zeit nicht aufgrund von Gelausfällen verschwendet werden.
Abbildung 3.Vergleich der Datenqualität von mPAGE®-Lux-Bis-Tris-Gel und handgegossenem Tris-Glycin-Gel. Bandenqualität des mPAGE®-Lux-Bis-Tris-Gels (links) im Vergleich zum handgegossenen Tris-Glycin-Gel (rechts). Beide Gele bestehen aus 10 % Acrylamid und sind mit einer Titration von humanem A431-Zell-Lysat beladen. Die Laufzeit der Elektrophorese beträgt 42 Minuten bei 200 V (Lux-Gel) und 119 Minuten bei 120 V (Tris-Glycin-Gel). Die Gele werden mit ReadyBlue™-Coomassie-Gelfärbung gefärbt.
Das mPAGE®-Lux-Gießsystem stellt eine innovative Lösung für Ihr Gelgießverfahren dar. Sie müssen sich nicht mehr entscheiden, ob Sie Zeit oder Ressourcen sparen wollen. Unser neuartiges Gelgieß-System ermöglicht es Forschenden, Gele schnell und einfach zu gießen, und zwar dann, wenn sie diese brauchen. Und das zu einem Bruchteil der Technologiekosten vorgegossener Gele. Steigern Sie die Effizienz Ihres Labors und verbessern Sie Ihren Gelelektrophorese-Workflow mit dem mPAGE®-Lux-Gießsystem.
Abbildung 4.Western Blotting für den Vergleich von Nass-, Schnell- und Halbtrocken-Transfermethoden. Die Vergleiche wurden mit 12 %igen mPAGE®-Lux-Bis-Tris-Gelen durchgeführt, die mit einer Titration von A431-Humanzelllysat und mit verschiedenen Transfermethoden auf Immobilon®-P-Membranen gelaufen sind. Die Membranen wurden mit Anti-EGFR- und Anti-ErK1/2-Antikörpern geblottet und anschließend mit Immobilon®-ECL-Ultra-Western-HRP-Substrat nachgewiesen. Turbo-Methode = Transfer mit dem Bio-Rad-Trans-Blot®-Turbo™-Transfersystem und den Trans-Blot®-Turbo™-Transferpacks.
Abbildung 5: Reproduzierbarkeit von mPAGE®-Lux-Bis-Tris-Gelen. A. Vier 8 %-Gele wurden gegossen und Läufe mit einer Titration von A341-Humanzelllysat durchgeführt, die anschließend mit ReadyBlue™ Coomassie-Gelfärbung gefärbt wurden. B. Der relative Migrationsabstand (Rf) für den ungefärbten Molekulargewichtsmarker wurde für jedes Gel berechnet. Die Standardabweichung ist für jede Proteinbande angegeben.
Abbildung 6.Analyse der Haltbarkeit von mPAGE®-Lux-Bis-Tris-Reagenzien. mPAGE®-Lux-Bis-Tris-Gele, die mit Reagenzien gegossen wurden, die (A) 0 Monate, (B) 6 Monate oder (C) 12 Monate alt sind. Es wurde kein Unterschied im Laufverhalten oder in der Laufzeit festgestellt.
mPAGE®-Lux-Gießsystem und Bis-Tris-Reagenzienkits
Ergänzen Sie Ihr Labor mit dem mPAGE®-Lux-Gießsystem und erhalten Sie in weniger als 3 Minuten gebrauchsfertige Gele. Atmen Sie durch und genießen Sie ein schnelles Gelgießverfahren mit weniger Abfall und ohne Angst vor Fehlschlägen. Das ist überzeugend. Unsere mPAGE®-Lux-Gießsysteme bestehen aus der mPAGE®-Lux-Aushärtestation, dem mPAGE®-Lux-Mischrohr, der mPAGE®-Gel-Gießvorrichtung, dem mPAGE®-Kamm mit 10 und 15 Wells, der mPAGE®-Mini-Spacer-Platte und den kurzen mPAGE®-Lux-Abdeckplatten mit 10 und 15 Wells. Im Lieferumfang des mPAGE®-Lux-Gießsystems für Gele mit einer Stärke von 0,75 mm sind der 15-Well-Kamm und die kurzen Abdeckplatten nicht im Lieferumfang enthalten. Kitbeschreibungen und -konfigurationen folgen
Abbildung 7.mPAGE®-Lux-Aushärtestation
Das mPAGE®-Lux-Bis-Tris-Reagenzienkit ist ein spezielles Reagenzienkit für das mPAGE®-Lux-Gießsystem. Das mPAGE®-Lux-Bis-Tris-Reagenzienkit besteht aus 3 Komponenten: Trennlösung, Verdünnungsmittel und Sammellösung. Das Kit eignet sich für eine Vielzahl von Acrylamidgelen zwischen 8,0 und 13,5 %. Nachfolgend sind die Beschreibung und die Komponenten des mPAGE®-Lux-Reagenzienkits aufgeführt:
mPAGE® Lux SDS-PAGE Protokoll für das Gießen von Gel
Alle Lösungen müssen vor Sonnenlicht geschützt werden, um eine Polymerisation zu verhindern. Vor dem Gießen von Gelen müssen alle Lösungen auf Raumtemperatur gebracht werden.
Trenngel
- Die Gel-Trennlösung durch Mischen von Trennlösung und Verdünnungsmittel vorbereiten. Die Mischvolumina sind der nachstehenden Tabelle zu entnehmen. Die Gel-Trennlösung kann in einer großen Charge vorbereitet werden, um mehrere Gele nacheinander herzustellen.
- Die Trennlösung mit einer sauberen Pipette in ein schwarzes Mischrohr oder einen anderen undurchsichtigen Behälter geben.
- Das Verdünnungsmittel mit einer sauberen Pipette in dasselbe Mischrohr geben.
- Durch vorsichtiges Über-Kopf-Drehen des Behälters mischen. Nicht vortexen.
Volumina von Gel-Trennlösungen
Die nachstehend angegebenen Volumina einsetzen, um ein einzelnes 1,0-mm-Gel herzustellen. In der vollständigen Gebrauchsanweisung auf der Produktseite auf SigmaAldrich.com sind die entsprechenden Volumina für 0,75-mm- und 1,5-mm-Gele enthalten.
Sammelgel
Die Sammellösung ist direkt aus der Flasche gebrauchsfertig. 1,5-ml Sammellösung für ein 1,0-mm-Gel verwenden. Wichtig: Die Sammellösung nicht verdünnen.
Gießen von Gel
- Die Glasplatten mit einem milden Reinigungsmittel reinigen und mit VE-Wasser abspülen. Vor Gebrauch mit Ethanol 70 % abwischen.
- Die mPAGE®-Gel-Gießvorrichtung mit mPAGE®-Spacer-Platte und der kurzen mPAGE®-Lux-Abdeckplatte zu einer Glaskassette zusammensetzen. Die kurze Abdeckplatte so ausrichten, dass sich der Text auf der linken Seite der Kassette befindet. Sicherstellen, dass vor dem Schließen der Befestigungsklemmen beide Glasplatten am unteren Ende des Gießrahmens ausgerichtet sind. Hinweis: Die kurze mPAGE®-Lux-Abdeckplatte muss in der mPAGE®-Aushärtestation verwendet werden.
- Die mPAGE®-Lux-Aushärtestation durch Drücken des Netzschalters einschalten. Die Aushärtestation führt einen Selbsttest durch. Nach Abschluss des Selbsttests wird auf dem Display die Betriebsbereitschaft angezeigt.
- Die Tür öffnen und die Gel-Gießvorrichtung in die Aushärtestation stellen, dabei die Gießvorrichtung hinter den Anschlägen ausrichten.
- Die vorbereitete Gel-Trennlösung mit einer sauberen 5-ml-Pipette bis zur angegebenen Fülllinie auf dem Rahmen der mPAGE®-Gel-Gießvorrichtung hinzufügen.
- Mit einer sauberen 5-ml-Pipette langsam Sammellösung bis zum oberen Rand der Kurzplatte hinzufügen.
- Den mPAGE®-Kamm langsam und mit leichtem Neigungswinkel einsetzen, um die Bildung von Luftblasen unter den Zähnen zu vermeiden. Wichtig: Die Verwendung verschiedener Well-Formate kann zu einer ungenauen Well-Bildung führen. Verwendung:
- 10-Well-Kämme mit kurzen mPAGE®-Lux-10-Well-Abdeckplatten
- 15-Well-Kämme mit kurzen mPAGE®-Lux-15-Well-Abdeckplatten
- Übergelaufene Lösung von der Vorderseite der Kurzplatte abwischen, um eine unvollständige Aushärtung zu verhindern, wenn übergelaufene Mengen vorhanden sind.
- Die Tür der Aushärtestation schließen und die Geldicke auswählen.
- Start drücken, um mit der Aushärtung des Gels zu beginnen. Tipp: Beim Gießen mehrerer Gele den Gießvorgang mit der zweiten Gel-Gießvorrichtung beginnen, während das erste Gel aushärtet.
- Nach Abschluss der Aushärtung die Tür öffnen und die Gel-Gießvorrichtung herausnehmen. Den Spannclip lösen und den Rahmen mit der Kassette aus der Gießvorrichtung herausnehmen. Danach die Seiten des Rahmens öffnen und die Kassette nach oben herausschieben.
- Das Gel sofort verwenden oder die Kassette in ein feuchtes Papiertuch wickeln und flach liegend in einem Beutel mit Zippverschluss oder einem anderen luftdichten Behälter bei 2–8 °C bis zu 2 Wochen lagern. Die Kassetten immer einwickeln, da das Gel sonst austrocknet.
Entfernen des Gels nach der Elektrophorese
Das Gel mit einem Gelschaber aus der Glaskassette entnehmen. Entlang der Gelränder (rechts) schneiden, um ein Einreißen des Gels zu vermeiden. mPAGE®-Lux-Bis-Tris-Gele sollten AUSSCHLIESSLICH mit MOPS-SDS- oder MES-SDS-Laufpuffer verwendet werden. Bis-Tris-Gele sind NICHT mit Tris-Glycin-Laufpuffer kompatibel.
Nachhaltiges Gießen von Gel mit dem mPAGE®-Lux-Gelgießsystem
Zur Quantifizierung der positiven Auswirkungen unseres mPAGE®-Lux-Gießsystems auf die Nachhaltigkeit wurden Vergleichsberechnungen anhand eines repräsentativen Schnellguss-Sets zum manuellen Gießen von Polyacrylamidgelen für die Proteinelektrophorese durchgeführt. Bei beiden Systemen kommen wiederverwendbare Gießsets und Reagenzienkits für das manuelle Gießen zum Einsatz. Das mPAGE®-Lux-Gießsystem erfordert zusätzlich die Verwendung der mPAGE®-Lux-Gel-Aushärtestation, während das Referenzsystem die Verwendung von APS & TEMED erfordert, die separat vom Reagenzienkit für das manuelle Gießen vertrieben werden.
Alle Komponenten, die für das Gießen von Elektrophoresegelen im Laufe der 5-jährigen Mindestlebensdauer der mPAGE®-Lux-Aushärtestation erforderlich sind, wurden in dieser Bewertung berücksichtigt. Dabei wurden die Auswirkungen in Bezug auf Herstellung, Verpackung, Distribution, Verwendung und End-of-Life-Phase des Handgießkits, der erforderlichen Reagenzien und aller erforderlichen Verbrauchsmaterialien berücksichtigt. Die Berechnungen wurden unter Annahme von 250, 500 oder 1000 hergestellten Gelen pro Jahr durchgeführt, wobei die kleinste Differenz gegenüber dem Referenzsystem angegeben wurde.
Material- und produktbezogene Nachhaltigkeitseigenschaften
Das mPAGE®-Lux-Gießsystem stellt zwar eine innovative Lösung für den das Gießen von Polyacrylamidgelen per Hand dar, erfordert jedoch nach wie vor die Verwendung von Verbrauchsmaterialien aus Kunststoff und gefährlichen Reagenzien. Auch wenn es für diese Anwendung keinen geeigneten Ersatz für Acrylamid gibt, wurden alle verbliebenen Gefährdungen durch chemische Stoffe (Chemische Gefahren) aus diesem System eliminiert. Zudem ist die Menge der benötigten Verbrauchsmaterialien aus Kunststoff im Vergleich zum Referenzsystem deutlich geringer.
Das zusätzliche Gewicht der Gel-Aushärtestation, die für das mPAGE®-Lux-Gießsystem erforderlich ist, wird ausgeglichen durch die Verringerung der für den Gelgießprozess erforderlichen Produkte (siehe Grafik). Während der gesamten Lebensdauer des Geräts wird das Gesamtgewicht (Gesamtmasse) des Systems im Vergleich zu Schnellgießsystemen um mindestens 20 % reduziert.
Systemmasse (kg) über die Lebensdauer beim Gießen von 500 Gelen/Jahr:
Abbildung 5.Vergleich der Systemmasse (kg) über die Lebensdauer beim Gießen von 500 Gelen/Jahr mit dem mPAGE®-Lux-Gießsystem und dem Referenzproduktsystem. Dunkelblau = Referenzprodukt. Hellblau = mPAGE®-Lux-Gießsystem.
Darüber hinaus steht dieses Produkt im Einklang mit den Grundsätzen unserer SMASH-Packaging-Initiative, die darauf abzielt, die Nachhaltigkeit von Verpackungen durch weniger Verpackungsmaterial, nachhaltigere Materialien und einfacheres Recycling zu verbessern.
- Die Verpackung für Produkte und zusätzliche Artikel, die für eine funktionsfähige Einheit erforderlich sind, ist im Vergleich zum Referenzsystem um 30 % reduziert.
- 100 % der faserbasierten Verpackungen des Systems verfügen über eine Zertifizierung für nachhaltige Forstwirtschaft.
- Alle Formteile zum Schutz der Systeme bestehen zu 100 % aus recyceltem Polyethylen.
- Die Verpackungen enthalten keine Materialien, die das Recycling gemäß unseren SMASH-Richtlinien beeinträchtigen würden.
mPAGE®-Lux-Gießsystem: Vertrieb und Gebrauch
Der geringere Bedarf an Verbrauchsmaterialien und die Vermeidung bestimmter Reagenzien führen zu einer deutlichen Verringerung der mit dem Versand verbundenen Umweltauswirkungen. Die Gewichtseinsparungen bei den regelmäßig versendeten Komponenten und den zugehörigen Verpackungen belaufen sich über die Mindestlebensdauer des Geräts auf mindestens 24 %.
Obwohl das zusätzliche Gerät während des Betriebs Energie verbraucht, wurde die mPAGE®-Lux-Gießstation energieeffizient konzipiert. Durch die Verwendung von LED-Beleuchtung und einer einfachen gehaltenen, aber intuitiv zu bedienenden Benutzeroberfläche bleibt der Gesamtenergieverbrauch dennoch bemerkenswert niedrig. Der kumulative Energieverbrauch, der für die Aushärtung von 1000 Gelen erforderlich ist, beträgt lediglich 1,65 kWh, was in etwa dem Stromverbrauch eines Laptops über einen Zeitraum von 33 Stunden entspricht. Die Menge an Einweg-Kunststoffabfällen, die entlang des gesamten Gelgießprozesses anfallen, wird um mindestens 25 % reduziert. Darüber hinaus polymerisieren mPAGE®-Lux-Reagenzien unter Einwirkung von Umgebungslicht von selbst, sodass keine unpolymerisierten Acrylamidrückstände in den Abfallströmen verbleiben.
Durch das bedarfsgerechte Gießen frischer, gebrauchsfertiger Gele wird das Risiko minimiert, dass vorgegossene Gele nicht verbraucht werden. Das mPAGE®-Lux-System erfordert keine Bevorratung von Reagenzienkits oder vorgegossenen Gelen in verschiedenen Konzentrationen, wodurch die Abfallmenge durch abgelaufene Komponenten reduziert wird. Die mPAGE®-Lux-Aushärtestation ist ein elektronisches Gerät und muss daher gemäß den geltenden Vorschriften entsorgt werden. Weitere Informationen zur Entsorgung von Elektroaltgeräten finden Sie auf unserer Seite zur WEEE-Richtlinie.
Dieses Produkt hat über den gesamten Produktlebenszyklus hinweg erhebliche Verbesserungen gegenüber dem Referenzsystem erzielt und wurde als umweltfreundlicheres Alternativprodukt (Greener Alternative Product) gekennzeichnet. Weitere Informationen finden Sie auf unserer Seite zum „Design for Sustainability“-Rahmenwerk und zu unseren umweltfreundlicheren Alternativprodukten.
Um weiterzulesen, melden Sie sich bitte an oder erstellen ein Konto.
Sie haben kein Konto?