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Merck

G2133

Sigma-Aldrich

Glucose-Oxidase aus Aspergillus niger

Type VII, lyophilized powder, ≥100,000 units/g solid (without added oxygen)

Synonym(e):

β-D-Glucose:oxygen-1-Oxidoreduktase, G.Od., GOx

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About This Item

CAS-Nummer:
EC-Nummer:
EG-Nummer:
MDL-Nummer:
UNSPSC-Code:
12352204
NACRES:
NA.54

Typ

Type VII

Qualitätsniveau

Form

lyophilized powder

Spezifische Aktivität

≥100,000 units/g solid (without added oxygen)

Mol-Gew.

160 kDa

Enthält nicht

extender

Zusammensetzung

Protein, ≥60%

Anwendung(en)

diagnostic assay manufacturing

Fremdaktivität

Catalase ≤10 Sigma units/mg protein

Versandbedingung

wet ice

Lagertemp.

−20°C

InChI

1S/C6H12O6/c7-1-2-3(8)4(9)5(10)6(11)12-2/h2-11H,1H2/t2-,3-,4+,5-,6-/m1/s1

InChIKey

WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N

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Allgemeine Beschreibung

Molekulargewicht: 160 kDa (Gelfiltration)
pI: 4,2
Extinktionskoeffizient: E1 % = 16,7 (280 nm)

Glucose-Oxidase aus Aspergillus niger ist ein Dimer, das aus 2 gleichen Untereinheiten mit einem Molekulargewicht von je 80 kDa besteht. Jede Untereinheit enthält einen Flavinadenindinukleotid-Anteil und ein Eisen. Das Enzym ist ein Glycoprotein, das ~ 16 % Neutralzucker und 2 % Aminozucker enthält. Das Enzym enthält auch 3 Cysteinreste und 8 potenzielle Stellen für die N-verknüpfte Glykosylierung.

Glucose-Oxidase kann D-Aldohexosen, Monodesoxy-D-Glucosen und Methyl-D-Glucosen mit unterschiedlichen Geschwindigkeiten oxidieren.

Der optimale pH-Wert für die Glucose-Oxidase ist 5,5, doch der Aktivitätsbereich erstreckt sich von pH 4 bis pH 7. Glucose-Oxidase ist spezifisch für β-D-Glucose mit einem KM von 33–110 mM.

Glucose-Oxidase erfordert keine Aktivatoren, wird aber von Ag+, Hg2+, Cu2+, Phenylquecksilberacetat und p-Chlorquecksilberbenzoat gehemmt. Es erfolgt keine Hemmung durch die nichtmetallischen SH-Reagenzien: N-Ethylmaleimid, Iodacetat und Iodacetamid.

Glucose-Oxidase eignet sich für die enzymatische Bestimmung von D-Glucose in einer Lösung. Da Glucose-Oxidase β-D-Glucose zu D-Gluconolacton und Wasserstoffperoxid oxidiert, wird für die Glucose-Bestimmung oft Meerrettichperoxidase als Kopplungsenzym verwendet. Obwohl Glucose-Oxidase für β-D-Glucose spezifisch ist, können D-Glucose-Lösungen quantifiziert werden, da die α-D-Glucose eine Mutarotation zu β-D-Glucose erfährt, während die β-D-Glucose durch die enzymatische Reaktion konsumiert wird.

Anwendung

Die Verwendung von G2133-Glucose-Oxidase in Protokollen verschiedener Anwendungen wird in mehreren Publikationen zitiert, darunter:
a) Biosensor development:
  • Diazoresin nanofilm coatings on alginate microspheres: Srivastava, R. et al., Biotechnol. Bioeng., 91(1), 124-131 (2005).
  • Paper-based glucose biosensor: Lankelma, J. et al., Anal. Chem., 84(9), 417-4152 (2012)
  • Microfluidic device with glucose oxidase immobilized on hydrogel for glucose analysis of blood: He, R.-Y. et al., RSC Adv., 9, 32367-32374 (2019).
b) Single-molecule FRET study of human RAD51 filament formation: Subramanyam, S. et al., Methods Enzymol., 600, 201-232 (2018).
c) Enzymatic fuel-cells with chitosan-based membranes: Bahar, T., and Yazici, M.S., Electroanalysis, 32(6), 1304-1314 (2020).
Glucose-Oxidase kommt in vielen Bereichen der Lebensmittel- und Pharmaindustrie zur Anwendung und ist ein Hauptbestandteil von Glucose-Biosensoren.

Biochem./physiol. Wirkung

Die Glucose-Oxidase katalysiert die Oxidation von β-D-Glucose zu D-Glucono-β-lacton und Wasserstoffperoxid, wobei molekularer Sauerstoff als Elektronenakzeptor fungiert.

Qualität

Kann Spuren von Amylase, Maltase, Glycogenase, Invertase und Galactose-Oxidase enthalten.

Einheitendefinition

Eine Einheit oxidiert 1,0 μmol von β-D-Glucose zu D-Gluconolacton und H2O2 pro Minute bei einem pH-Wert von 5,1 und einer Temperatur von 35 °C, was einer O2-Aufnahme von 22,4 μl pro Minute entspricht. Wenn das Reaktionsgemisch mit Sauerstoff gesättigt ist, kann sich die Aktivität bis auf 100 % erhöhen.

Physikalische Form

Lyophilisiertes Pulver, enthält Phosphat-Puffersalze und Natriumchlorid

Hinweis zur Analyse

Proteingehalt mittels Biuret-Reaktion bestimmt.

Piktogramme

Health hazard

Signalwort

Danger

H-Sätze

Gefahreneinstufungen

Resp. Sens. 1

Lagerklassenschlüssel

11 - Combustible Solids

WGK

WGK 1

Persönliche Schutzausrüstung

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves


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Protokolle

Glucose oxidase activity measured via continuous spectrophotometric assay at 500 nm, indicating glucose oxidation rate.

Unser Team von Wissenschaftlern verfügt über Erfahrung in allen Forschungsbereichen einschließlich Life Science, Materialwissenschaften, chemischer Synthese, Chromatographie, Analytik und vielen mehr..

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