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MAB5290

Sigma-Aldrich

Anti-Dopamin-D1A-Rezeptor-Antikörper, Klon SG2-D1a

clone SG2-D1a, Chemicon®, from mouse

Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise


About This Item

UNSPSC-Code:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41
Preise und Verfügbarkeit sind derzeit nicht verfügbar.

Biologische Quelle

mouse

Antikörperform

purified immunoglobulin

Antikörper-Produkttyp

primary antibodies

Klon

SG2-D1a, monoclonal

Speziesreaktivität

mouse, sheep, rat

Darf nicht reagieren mit

pig, rabbit, human, bovine, canine

Hersteller/Markenname

Chemicon®

Methode(n)

immunohistochemistry: suitable
western blot: suitable

Isotyp

IgG2b

NCBI-Hinterlegungsnummer

UniProt-Hinterlegungsnummer

Versandbedingung

wet ice

Posttranslationale Modifikation Target

unmodified

Angaben zum Gen

human ... DRD1(1812)

Spezifität

Dopaminrezeptor D1A, keine Kreuzreaktivität mit D1B(D5)-Rezeptor. Die Immunreaktivität ist spezifisch für den D1A-Rezeptor von Maus und Ratte. Proben von Mensch, Schwein, Hund, Kaninchen, Schaf und Rind waren in der Western-Analyse nicht reaktiv.

Immunogen

Rekombinanter D1A-Rezeptor der Ratte, Carboxyterminus.

Anwendung

Anti-Dopamin-D1A-Rezeptor-Antikörper, Klon SG2-D1a weist Konzentrationen des Dopamin-D1A-Rezeptors nach, wurde publiziert und zur Verwendung in IH und WB validiert.
Forschungskategorie
Neurowissenschaft
Forschungsunterkategorie
Neurotransmitter & Rezeptoren
Western Blot: 1:250–1:500 auf ungekochten Membranfraktionen aus Caudatus-Gewebe der Ratte. Eine Reaktivität wurde auch in präfrontalem Kortex und temporalen Kortex festgestellt. Eine identifizierte Bande zwischen 45 und 66 kDa wird erkannt (Luedtke, 1999).

Immunhistochemie: In 4 % PFA fixierte Vibratomschnitte, blockiert mit 3 % NGS, 1 % BSA mit 0,2 % Triton X-100. Nur in PBS mit überschüssigen Blockierungsreagenzien verdünnte Primärantikörper.

Optimale Arbeitsverdünnungen müssen vom Anwender bestimmt werden.

VORGESCHLAGENES WESTERN-BLOT-PROTOKOLL

Lösungen

10X Transferpuffer 1 Liter

Tris 115,3 g

Glycin 24,2 g

[SDS 4 g (kann weggelassen werden)]

Für eine 1X-Arbeitslösung: 1 Liter

mischen mit 700 ml Wasser

200 ml MeOH

100 ml 10X Transfer-TBST

Stammlösung 1 Liter

1 mol/l Tris pH-Wert 7,5 10 ml

5 mol/l NaCl 30 ml

10 % Tween-20 5 ml

1. SDS-PAGE-Gel wie gewünscht laufen lassen.

2. PVDF-Membran (ImmobilonP von Millipore) 1–2 Minuten in 100%igem Methanol eintauchen, um die Membran zu benetzen.

3. Membran in Transferpuffer (siehe nachstehend) eintauchen, bis sie für das Einrichten des Blot-Transfers bereit ist (>15 min).

4. Geltransfer-Sandwich mit dem Blot zur positiven Elektrode einrichten.

5. Protein vom Gel auf die Membran übertragen, bei 100 Volt 1–2 Stunden für Proteine mit niedrigen Molekülmassen oder 65 mA für 16 Stunden (über Nacht) für einen vollständigen Transfer von Proteinen mit höherer Molekülmasse.

6. Die übertragenen Banden mit Chemicon BLOT-FastStain (Katalognr. 2076) färben.

7. Mit entionisiertem Wasser entfärben.

8. Mit 5 % fettfreier Milch (Marvel oder Carnation) in TBS oder PBS über Nacht bei 4 °C blockieren. Die fettfreie Milch sollte frisch gelöst, bei 10.000 U/min für 10 min zentrifugiert und durch einen Glasfilter (Gelman Acrodisc) filtriert werden.

9. Inkubieren mit dem ersten Antikörper über Nacht bei sanftem Rühren und 4 °C.

Optimale Arbeitsverdünnungen und Inkubationszeit müssen vom Anwender bestimmt werden.

10. Mindestens 3 x 5 min mit TBST waschen. Ab diesem Schritt sollte Azid weggelassen werden.

11. Inkubieren mit dem Sekundärantikörper (an HRP konjugierter Anti-Maus-Antikörper der Ziege, z. B. Chemicon Katalognr. AP124P, geeignet verdünnt) für 1 Std. bei Raumtemperatur.

12. Mindestens 3 x 5 min mit TBST waschen.

13. ECL mit einem im Handel erhältlichen Kit (femtoLUCENT, Chemicon Katalognr. 2078) durchführen.

Physikalische Form

Aufgereinigtes Immunglobulin. Flüssigkeit in 0,02 mol/l Phosphatpuffer, 0,25 mol/l NaCl, pH-Wert 7,6, mit 0,1 % Natriumazid.
Format: Aufgereinigt

Lagerung und Haltbarkeit

Bei 2–8 °C in unverdünnten Aliquoten ab Empfangsdatum bis zu 6 Monate haltbar.

Sonstige Hinweise

Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.

Rechtliche Hinweise

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Haftungsausschluss

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.

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10 - Combustible liquids

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WGK 2

Flammpunkt (°F)

Not applicable

Flammpunkt (°C)

Not applicable


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