The experiment involved the Jurkat cell line and included treatment with hydrogen peroxide at a concentration of 100 uM for 10 minutes. Serum starvation was also conducted. Following treatment, the cells were fixed for 20 minutes on ice and permeabilized using 0.2% Triton X. The primary antibody was diluted to a concentration of 1ug/mL, and the secondary antibody used was AP182F at a dilution of 1:1000.
ABT135
Anti-Phospho-FAK (Tyr397)-Antikörper
from rabbit, purified by affinity chromatography
Synonym(e):
Focal adhesion kinase 1, FADK 1, Protein-tyrosine kinase 2, pp125FAK
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About This Item
UNSPSC-Code:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41
Empfohlene Produkte
Biologische Quelle
rabbit
Qualitätsniveau
Antikörperform
affinity isolated antibody
Antikörper-Produkttyp
primary antibodies
Klon
polyclonal
Aufgereinigt durch
affinity chromatography
Speziesreaktivität
rat
Speziesreaktivität (Voraussage durch Homologie)
human (based on 100% sequence homology), mouse (based on 100% sequence homology), Xenopus (based on 100% sequence homology), chicken (based on 100% sequence homology)
Methode(n)
cell based assay: suitable
western blot: suitable
NCBI-Hinterlegungsnummer
UniProt-Hinterlegungsnummer
Versandbedingung
wet ice
Posttranslationale Modifikation Target
phosphorylation (pTyr397)
Angaben zum Gen
human ... PTK2(5747)
Allgemeine Beschreibung
Fokale Adhäsionskinase (FAK) ist eine Nicht-Rezeptorprotein-Tyrosinkinase, die als Substrat für Src und Schlüsselelement der Integrinsignalisierung entdeckt wurde. FAK spielt eine zentrale Rolle bei Zellausbreitung, Differenzierung, Migration, Zelltod und Beschleunigung des Phasenübergangs von G1 zu S des Zellzyklus. Zur FAK-Regulation gehört die Phosphorylierung an mehreren Tyrosin- und Serinresten. Die Phosphorylierung von Tyrosin geht in der Regel mit einer positiven Regulation und Wachstumsförderung einher, jedoch tritt an diesen Stellen eine Dephosphorylierung auf, wenn die Zellen in die Mitose (M-Phase) eintreten. Im Gegensatz dazu bleibt die Serinphosphorylierung entweder hoch oder steigt, wenn Zellen in die Mitose eintreten und könnte beim Abbau der Fokal-Adhäsion eine Rolle spielen. FAK und seine Phosphorylierungszustände sind an der Krebsmetastasierung, dem Tumorzellüberleben und dem adhäsionsunabhängigen Wachstum beteiligt. Neue Beweise deuten darauf hin, dass eine erhöhte FAK-Aktivität in humanen Karzinomzellen mit einem höheren Invasionspotenzial einhergeht. Eine zentrale Rolle der Tumorbildung und -progression deutet darauf hin, dass FAK ein attraktives Ziel für therapeutische Erfindungen ist. Die Aktivierung von FAK durch Integrin-Clustering führt zu Autophosphorylierung an Tyr397.
Spezifität
Dieser Antikörper erkennt an Tyr397 phosphorylierte FAK.
Immunogen
Epitop: Phosphoryliertes Tyr397
KLH-konjugiertes lineares Peptid, das an Tyr397 phosphoryliertem menschlichem FAK entspricht.
Anwendung
Analyse des Peptidinhibitionstests: Eine 1:1.000 Verdünnung einer repräsentativen Charge eines Peptids, das auf RAT2-Zellen, die mit Src transfiziert wurden, blockiert wurde.
Dieser Anti-phospho-FAK-(Tyr397)-Antikörper ist für die Verwendung in WB, Zellfunktionstests validiert und wird für den Nachweis von phospho-FAK (Tyr397) eingesetzt.
Forschungskategorie
Zellstruktur
Zellstruktur
Forschungsunterkategorie
Adhäsion (CAM)
Adhäsion (CAM)
Qualität
Beurteilt mittels Western Blot in nicht-transfizierten und Src-transfizierten RAT2-Zelllysaten.
Western-Blot-Analyse: Mit einer Verdünnung dieses Antikörpers im Verhältnis 1:1.000 wurde phospho-FAK (Tyr397) in 10 µg nicht-transfizierten und Scr-transfizierten RAT2-Zelllysaten nachgewiesen.
Western-Blot-Analyse: Mit einer Verdünnung dieses Antikörpers im Verhältnis 1:1.000 wurde phospho-FAK (Tyr397) in 10 µg nicht-transfizierten und Scr-transfizierten RAT2-Zelllysaten nachgewiesen.
Zielbeschreibung
~125 kDa beobachtet.
In manchen Lysaten tritt bei ~ 190 kD eine nicht charakterisierte Bande auf.
In manchen Lysaten tritt bei ~ 190 kD eine nicht charakterisierte Bande auf.
Verlinkung
Ersetzt: 04-974
Physikalische Form
Affinitätsgereinigt
Aufgereinigter polyklonaler Kaninchenantikörper in Puffer mit 0,1 M Tris-Glycin (pH-Wert 7,4), 150 mM NaCl mit 0,05 % Natriumazid.
Lagerung und Haltbarkeit
Bei 2–8 °C 1 Jahr ab Empfangsdatum haltbar.
Hinweis zur Analyse
Kontrolle
nicht-transfizierte und Src-transfizierte RAT2-Zelllysate
nicht-transfizierte und Src-transfizierte RAT2-Zelllysate
Haftungsausschluss
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Lagerklassenschlüssel
12 - Non Combustible Liquids
WGK
WGK 1
Flammpunkt (°F)
Not applicable
Flammpunkt (°C)
Not applicable
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Where can I find the protocol for the experiment shown in the histogram of product ABT135, specifically for the hydrogen peroxide treatment details?
1 Antwort-
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