A1978

Anti-β-actina, anticuerpo monoclonal

clone AC-15, purified from hybridoma cell culture

• Sinónimos: Anti-β-actina monoclonal
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41

Propiedades

• biological source: mouse
• Quality Level: 300
• conjugate: unconjugated
• antibody form: purified immunoglobulin
• antibody product type: primary antibodies
• clone: AC-15, monoclonal
• form: buffered aqueous solution
• mol wt: antigen 42 kDa
• species reactivity: sheep, carp, feline, chicken, rat, mouse, Hirudo medicinalis, rabbit, canine, pig, human, bovine, guinea pig
• should not react with: Dictyostelium discoideum
• technique(s): immunocytochemistry: 10-40 μg/mL using human foreskin fibroblasts; immunohistochemistry (frozen sections): suitable; indirect immunofluorescence: suitable; microarray: suitable; western blot: 0.5-1 μg/mL using cell extract of human foreskin fibroblasts or chicken fibroblasts.
• isotype: IgG1
• UniProt accession no.: P60709
• application(s): research pathology
• shipped in: dry ice
• storage temp.: −20°C
• target post-translational modification: unmodified
• Gene Information: human ... ACTB(60) ; mouse ... Actb(11461) ; rat ... Actb(81822)

Descripción

General description

El gen ACTB (β-actina) se ha cartografiado en el cromosoma humano 7p22.1. La β-actina es la proteína más abundante localizada en el citoplasma. La expresión del ACTB es ubicua. La actina es una de las proteínas eucariotas más conservadas; se expresa en mamíferos y aves. Cuatro de las isoformas de la actina representan los marcadores de diferenciación del tejido muscular y dos se encuentran prácticamente en todas las células. El anticuerpo anti-β-actina monoclonal de ratón (isotipo IgG1 de ratón) se obtiene del hibridoma AC-15 producido por la fusión de células de mieloma de ratón y esplenocitos de ratones BALB/c inmunizados con un péptido N-terminal Ac-Asp-Asp-Asp-Ile-Ala-Ala-Leu-Val-Ile-Asp-Asn-Gly-Ser-Gly-Lys de la actina citoplásmica b sintética ligeramente modificado, conjugado con KLH.
En la tinción de criocortes ultrafinos de molleja de pollo, el anticuerpo marca los cuerpos densos y los canales longitudinales que unen cuerpos densos consecutivos que también están ocupados por desmina y la placa densa asociada a la membrana. No tiñe los músculos cardiaco ni esquelético adultos excepto trazas debidas a la contaminación de la muestra con células no musculares o si se está utilizando tejido embrionario.

En la tinción de criosecciones tisulares ultrafinas de molleja de pollo, el anticuerpo marca los cuerpos densos y los canales longitudinales que unen cuerpos densos consecutivos que también están ocupados por desmina y la placa densa asociada a la membrana. No tiñe los músculos cardiaco y esquelético adultos excepto las trazas debidas a la contaminación de la muestra con células no musculares o si se está utilizando tejido embrionario.

Specificity

El anticuerpo anti-β-actina, monoclonal de ratón 1,2 reconoce un epítopo localizado en el extremo N-terminal de la isoforma β de la actina.

Immunogen

péptido N-terminal de la actina β-citoplasmática ligeramente modificado, Ac-Asp-Asp-Asp-Ile-Ala-Ala-Leu-Val-Ile-Asp-Asn-Gly-Ser-Gly-Lys, conjugado con KLH.

Application

El anticuerpo monoclonal anti-actina de ratón se utilizó como control de carga para el análisis mediante inmunoelectrotransferencia de las proteínas inmunoprecipitadas de cocultivos de los ganglios radiculares dorsales de rata.

La actina de células de varias especies y origen tisular es muy similar en sus propiedades físicas e inmunológicas. Como consecuencia, ha sido difícil producir anti sueros potentes frente a esta proteína. Por consiguiente, la disponibilidad de anticuerpos monoclonales frente a la β-actina proporciona una herramienta específica y útil para estudiar la distribución intracelular de la β-actina y los aspectos estático y dinámico del citoesqueleto.
Pueden utilizarse anticuerpos anti-beta-actina monoclonales para micromatrices, inmunofluorescencia indirecta y análisis inmunohistoquímicos. Además, el producto se ha utilizado para inmunocitoquímica a 10-40 μg/ml utilizando fibroblastos de prepucio humano. El anticuerpo se ha utilizado también para western blot a 0,5-1 μg/ml utilizando un extracto celular de fibroblastos de prepucio humano o fibroblastos de pollo.
El anticuerpo puede utilizarse para tinción de cortes congelados fijados con acetona, preparaciones para microscopia electrónica y experimentos de microinyección. Pueden utilizarse como fijadores las disoluciones B5, etanol, metacam o Bouin. El epítopo reconocido por el anticuerpo es resistente a la fijación con formalina y la inclusión en parafina.
Se ha utilizado en análisis de inmunotransferencia.

La anti-actina monoclonal de ratón se utilizó como un control de carga para el análisis mediante transferencia Western de lisados proteicos de hígado de rata.

Pueden utilizarse anticuerpos anti-beta-actina monoclonales para micromatrices, inmunofluorescencia indirecta y análisis inmunohistoquímicos. Además, el producto se ha utilizado para inmunocitoquímica a 10-40 μg/ml utilizando fibroblastos de prepucio humano. El anticuerpo se ha utilizado también para western blot a 0,5-1 μg/ml utilizando un extracto celular de fibroblastos de prepucio humano o fibroblastos de pollo.
El anticuerpo puede utilizarse para tinción de cortes congeladas fijados con acetona, preparaciones para microscopia electrónica y experimentos de microinyección. Las disoluciones B5, etanol, metacam o Bouin pueden utilizarse como fijadores. El epítopo reconocido por el anticuerpo es resistente a la fijación con formalina y la inclusión en parafina.

Biochem/physiol Actions

Las dos principales proteínas citoesqueléticas implicadas en la motilidad celular son la actina y la miosina. La actina y la miosina son constituyentes de muchos tipos de células e intervienen en muchísimos procesos celulares, como la locomoción, la secreción, la ciclosis, la fagocitosis y la citocinesis.
La ACTB (β-actina) es crucial para la organogénesis, en especial para el desarrollo del cerebro, los riñones y el corazón. Es responsable de mantener la proliferación, la migración y la forma celulares. La proteína actina es esencial para la formación de plaquetas maduras. β−La actina desempeña un papel fundamental en el desarrollo embrionario. El aumento de la β-actina estimula las protrusiones de la membrana y contribuye a la motilidad celular. La proteína β-actina codificada interviene en la migración de los fibroblastos en el ratón, y por tanto controla la tensión del tejido conjuntivo.
La actina es una proteína citoesquelética que regula la movilidad celular, la secreción, la fagocitosis y la citocinesis. El extremo NH2-terminal de la actina puede funcionar como un antígeno. Este extremo terminal puede también modular las interacciones de la actina y puede asociarse con proteínas como la miosina.

Physical form

Disolución en solución salina tamponada con fosfato 0,01 M, pH 7,4, que contiene acida sódica 15 mM.

Preparation Note

Almacenamiento y estabilidad: Para su uso continuo, debe conservarse entre 2 y 8 °C durante un máximo de un mes. Para una conservación prolongada, congelar en alícuotas de trabajo a -20 °C. No se recomienda la congelación y descongelación repetidas o la conservación en congeladores “frost-free”. Si aparece una turbidez ligera tras una conservación prolongada, clarifique la disolución centrifugándola antes de usarla. Las muestras de la dilución de trabajo deben desecharse si no se utilizan en 12 horas.

Other Notes

Ganador del premio CiteAb 2024 como proveedor de éxito en la investigación del Parkinson

Para ver una guía de selección de anticuerpos anti-actina, visite www.sigmaaldrich.com/actin.

Disclaimer

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