The product is a prepared solution of purified mouse IgG2a? in a buffer containing 0.1 M Tris-Glycine (pH 7.4), 150 mM NaCl with 0.05% sodium azide. This product is not routinely tested for immunofluorescence, however, publications are available for use in IF. See the link below which cites a dilution factor of 1:200:
https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0925443921001708
MABE1095
Anticuerpo anti-híbrido DN-ARN, clon S9.6
clone S9.6, from mouse
Sinónimos:
DNA-RNA Duplex, DNA/RNA Duplex, DNA:RNA Duplex, DNA-RNA Hybrid, DNA/RNA Hybrid, DNA:RNA Hybrid, RNA-DNA Duplex, RNA/DNA Duplex, RNA:DNA Duplex, RNA-DNA Hybrid, RNA/DNA Hybrid, RNA:DNA Hybrid
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About This Item
Código UNSPSC:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41
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Productos recomendados
origen biológico
mouse
Nivel de calidad
forma del anticuerpo
purified immunoglobulin
tipo de anticuerpo
primary antibodies
clon
S9.6, monoclonal
reactividad de especies (predicha por homología)
all
técnicas
ChIP: suitable
affinity binding assay: suitable
dot blot: suitable
immunocytochemistry: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
isotipo
IgG2aκ
Condiciones de envío
ambient
modificación del objetivo postraduccional
unmodified
Descripción general
Los híbridos de ADN-ARN aparecen de forma natural dentro de las células eucariotas y su concentración es elevada en sitios de gran actividad transcripcional. Son estructuras de ácidos nucleicos no canónicos con funciones reguladoras transcripcionales. Se ha comunicado que su presencia predispone un locus a la rotura cromosómica. Un locus que forma un ADN:ARN crea una conformación intermedia A/B bicatenaria, con una segunda diana para las proteínas de unión a ácidos nucleicos monocatenarios en la cadena de ADN complementaria desplazada. Se ha demostrado que son resistentes a la actividad de las ADN metiltransferasas. La formación de híbridos ADN:ARN se ha asociado con una serie de enfermedades neurológicas. Mutaciones en la ADN:ARN helicasa senataxina (SETX) están implicadas en la forma juvenil dominante de la esclerosis lateral amiotrófica tipo 4 y una forma recesiva de la ataxia con apraxia oculomotora tipo 2.
Especificidad
El clon S9.6 se unió al heteropolímero ADN-ARN y el poli(I)-poli(dC) por igual, pero se requirieron niveles 100 veces superiores de poli(A)-poli(dT) para lograr un grado similar de unión. El clon S9.6 no se unió al ADN monocatenario, el ADN bicatenario, el ARN, y el ARN ribosómico (Boguslawski, S.J., et al. (1986). J. Immunol Methods. 89(1):123-130).
La estructura diana heterodúplex ADN-ARN (bucle R) no es específica de secuencia ni de especie.
Inmunógeno
Heteropolímero ADN-ARN dúplex preparado por transcripción del ADN monocatenario de phi X174 con ARN polimerasa dependiente de ADN (Boguslawski, S.J., et al. (1986). J. Immunol Methods. 89(1):123-130).
Aplicación
Análisis mediante inmunotransferencia por puntos: 0,2 µg/ml de un lote representativo detectó un mayor nivel de híbridos ADN-ARN en extractos genómicos de la cepa de levadura con deficiencia de RNasa H que en extractos de la cepa natural (Cortesía de Lorenzo Costantino, Ph.D., Koshland Lab, University of California at Berkley, EE.UU.).
Ensayo de unión por afinidad: El clon S9.6 se unió al heteropolímero ADN-ARN y el poli(I)-poli(dC) por igual, pero se requirieron niveles 100 veces superiores de poli(A)-poli(dT) para lograr un grado similar de unión. El clon S9.6 no se unió al ADN monocatenario, el ADN bicatenario, el ARN, y el ARN ribosómico (Boguslawski, S.J., et al. (1986). J. Immunol Methods. 89(1):123-130).
Análisis de inmunoprecipitación de la cromatina (ChIP): un lote representativo detectó un aumento de los híbridos de ARN-ADN en cuatro genes transcritos activamente tras desactivación mediada por shRNA de BRCA1 o BRCA2, pero no de PCID2 ni de RAD51, en las células HeLa (Bhatia, V., et al. (2014). Nature. 511(7509):362-365.).
Análisis de inmunoprecipitación de cromatina (ChIP): un lote representativo detectó bucles R formados sobre el gen beta-actina utilizando una preparación de la cromatina HeLa. El tratamiento con RNasa H de la preparación de cromatina evitó que el clon S9.6 inmunoprecipitara fragmentos de la cromatina diana (Skourti-Stathaki, K., et al. (2011). Mol. Celda. 42(6):794-805).
Análisis de inmunoprecipitación-secuenciación de cromatina (ChIP-seq): un lote representativo detectó una distribución genómica de híbridos de ADN-ARN en brotes de levadura mediante análisis de ChHIP-seq (El Hage, A., et al. (2014). PLoS Genet. 10(10):e1004716).
Análisis mediante inmunocitoquímica: lotes representativos inmunolocalizaron los bucles R nucleares mediante tinción inmunocitoquímica fluorescente de células madre embrionarias humanas H1 fijadas con metanol (hESC) y células HeLa fijadas con formaldehído (Bhatia, V., et al. (2014). Nature. 511(7509):362-365; Ginno, P.A., et al. (2012). Mol Cell. 45(6):814-825).
Análisis mediante inmunoprecipitación: un lote representativo causó inmunoprecipitación del sustrato bucle R transcrito in vitro (híbrido ADN-ARN), pero no de ADN bicatenario (dsDNA) (Ginno, P.A., et al. (2012). Mol. Cell. 45(6):814-825).
Ensayo de unión por afinidad: El clon S9.6 se unió al heteropolímero ADN-ARN y el poli(I)-poli(dC) por igual, pero se requirieron niveles 100 veces superiores de poli(A)-poli(dT) para lograr un grado similar de unión. El clon S9.6 no se unió al ADN monocatenario, el ADN bicatenario, el ARN, y el ARN ribosómico (Boguslawski, S.J., et al. (1986). J. Immunol Methods. 89(1):123-130).
Análisis de inmunoprecipitación de la cromatina (ChIP): un lote representativo detectó un aumento de los híbridos de ARN-ADN en cuatro genes transcritos activamente tras desactivación mediada por shRNA de BRCA1 o BRCA2, pero no de PCID2 ni de RAD51, en las células HeLa (Bhatia, V., et al. (2014). Nature. 511(7509):362-365.).
Análisis de inmunoprecipitación de cromatina (ChIP): un lote representativo detectó bucles R formados sobre el gen beta-actina utilizando una preparación de la cromatina HeLa. El tratamiento con RNasa H de la preparación de cromatina evitó que el clon S9.6 inmunoprecipitara fragmentos de la cromatina diana (Skourti-Stathaki, K., et al. (2011). Mol. Celda. 42(6):794-805).
Análisis de inmunoprecipitación-secuenciación de cromatina (ChIP-seq): un lote representativo detectó una distribución genómica de híbridos de ADN-ARN en brotes de levadura mediante análisis de ChHIP-seq (El Hage, A., et al. (2014). PLoS Genet. 10(10):e1004716).
Análisis mediante inmunocitoquímica: lotes representativos inmunolocalizaron los bucles R nucleares mediante tinción inmunocitoquímica fluorescente de células madre embrionarias humanas H1 fijadas con metanol (hESC) y células HeLa fijadas con formaldehído (Bhatia, V., et al. (2014). Nature. 511(7509):362-365; Ginno, P.A., et al. (2012). Mol Cell. 45(6):814-825).
Análisis mediante inmunoprecipitación: un lote representativo causó inmunoprecipitación del sustrato bucle R transcrito in vitro (híbrido ADN-ARN), pero no de ADN bicatenario (dsDNA) (Ginno, P.A., et al. (2012). Mol. Cell. 45(6):814-825).
Categoría de investigación
Epigenética y función nuclear
Epigenética y función nuclear
El anti-híbrido ADN-ARN, clon S9.6, Nº de Ref. MABE1095, es un anticuerpo monoclonal de ratón muy específico, que se dirige al híbrido ADN-ARN y se ha probado en ensayo de unión por afinidad, inmunoprecipitación de cromatina (ChIP), ChIP-seq, inmunotransferencia por puntos, inmunocitoquímica e inmunoprecipitación.
Calidad
Evaluada mediante inmunocitoquímica en células HeLa.
Análisis mediante inmunocitoquímica: una dilución 1:50 de este anticuerpo inmunolocalizó híbridos de ADN-ARN nucleares y mitocondriales en células HeLa fijadas con paraformaldehído al 4 % y permeabilizadas con Triton X-100 al 0,3 %.
Análisis mediante inmunocitoquímica: una dilución 1:50 de este anticuerpo inmunolocalizó híbridos de ADN-ARN nucleares y mitocondriales en células HeLa fijadas con paraformaldehído al 4 % y permeabilizadas con Triton X-100 al 0,3 %.
Forma física
IgG2aκ de ratón purificada en tampón que contiene Tris-glicina 0,1 M (pH 7,4), NaCl 150 mM con acida sódica al 0,05 %.
Presentación: Purificada
Proteína G purificada.
Almacenamiento y estabilidad
Estable durante 1 año a 2-8°C desde la fecha de recepción.
Otras notas
Concentración: Consulte la ficha técnica específica del lote.
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Opcional
Referencia del producto
Descripción
Precios
Código de clase de almacenamiento
12 - Non Combustible Liquids
Clase de riesgo para el agua (WGK)
WGK 1
Punto de inflamabilidad (°F)
Not applicable
Punto de inflamabilidad (°C)
Not applicable
Certificados de análisis (COA)
Busque Certificados de análisis (COA) introduciendo el número de lote del producto. Los números de lote se encuentran en la etiqueta del producto después de las palabras «Lot» o «Batch»
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