07-579

Anticuerpo anti-REST

Upstate^®, from rabbit

• Sinónimos: Neural-restrictive silencer factor, RE1-silencing transcription factor, X2 box repressor, neuron restrictive silencer factor, repressor binding to the X2 box
• Código UNSPSC: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Propiedades

• origen biológico: rabbit
• Nivel de calidad: 100
• forma del anticuerpo: purified immunoglobulin
• tipo de anticuerpo: primary antibodies
• clon: polyclonal
• reactividad de especies: human
• fabricante / nombre comercial: Upstate^®
• técnicas: western blot: suitable
• isotipo: IgG
• Nº de acceso NCBI: NM_005612
• Nº de acceso UniProt: Q13127
• Condiciones de envío: wet ice
• modificación del objetivo postraduccional: unmodified
• Información sobre el gen: human ... REST(5978) ; mouse ... Rest(19712) ; rat ... Rest(83618)

Descripción

Descripción general

El factor de transcripción de silenciamiento RE1 (UniProt: Q13127; también conocido como REST, factor silenciador restrictivo de neuronas, represor de la secuencia X2) está codificado por el gen REST (también conocido como NRSF, XBR) (ID del gen: 5978) en humanos. REST es un represor transcripcional que actúa uniéndose a un elemento de secuencia de ADN denominado elemento silenciador restrictivo de neuronas (NRSE). Se expresa ubicuamente y su mayor expresión se encuentra en los tejidos del compartimiento linfocítico: bazo, timo, linfocitos de sangre periférica y ovario. También se encuentra en células progenitoras neuronales indiferenciadas y se cree que actúa como un regular maestro negativo de la neurogénesis. Se ha comunicado que la expresión de REST depende del ciclo celular y que sus concentraciones son bajas en la fase G2. Participa en el mantenimiento del estado de quiescencia de las células madre neuronales adultas y evita su diferenciación prematura en neuronas maduras. REST restringe la expresión de genes neuronales al asociarse con dos correpresores distintos, SIN3A y RCOR1, que a su vez reclutan la histona desacetilasa a los promotores de los genes regulados por REST. REST también interviene en la represión al reclutar el complejo BHC en los sitios RE1/NRSE, que actúa desacetilando y desmetilando sitios específicos de la histonas y actuando como modificador de la cromatina. Mutaciones en el gen REST pueden inducir tumores de Wilms, una neoplasia nefrítica maligna pediátrica que se produce debido a la multiplicación incontrolada de las células madre renales, las células del estroma y las epiteliales. (Ref.: Mahamdallie, SS., et al. (2015). Nat. Genet. 47(12); 1471-1474; Huang, Z., et al. (2011). Nat. Cell Biol. 13(2); 142-152).

Especificidad

Este anticuerpo policlonal de conejo detecta el factor transcripcional silenciador RE1 (REST). Se dirige a un epítopo dentro de la región C-terminal.

Inmunógeno

Fragmento recombinante etiquetado con GST correspondiente a 297 aminoácidos de la región C-terminal del factor transcripcional silenciador RE1 (REST) humano.

Aplicación

Categoría de investigación
Epigenética y función nuclear

El anti-REST, nº de ref. 07-579, es un anticuerpo policlonal de conejo que detecta el REST y se ha probado para utilizar en inmunoelectrotransferencia.

Información actualizada-Rest está glucosilada. De http://amsdottorato.cib.unibo.it/687/
Del resumen:
“Finalmente, se analizó el patrón de glucosilación de la proteína REST, pasando de la observación de que el peso molecular calculado en la secuencia REST es de aproximadamente 116 kDa, pero que utilizando Western Blot este factor de transcripción parece tener un peso molecular aparente distinto (véase Tabla 1.1): esta diferencia podría explicarse por modificaciones postraduccionales de las proteínas, como la glucosilación. De hecho, en varios estudios recientes se subrayó la importancia de la O-glucosilación en la modulación del silenciamiento transcripcional, la fosforilación de proteínas, la degradación de proteínas por el proteasoma y las interacciones proteína–proteína [Julenius et al., 2005; Zachara and Hart, 2006]. El análisis de desglucosilación demostró que en las células SH-SY5Y y HEK293 la proteína REST está O-glucosilada y no N-glucosilada. Además, utilizando varias combinaciones de enzimas desglucosilantes es posible plantear la hipótesis de la presencia de residuos de Gal-β(1-3)-GalNAc en la REST endógena, mientras que los residuos de galactosa β(1-4) ligados pueden estar presentes en la proteína REST recombinante expresada en las células HEK293. Sin embargo, el proceso de O-glucosilación produce una inmensa multiplicidad de estructuras químicas y los monosacáridos deben ser hidrolizados secuencialmente por una serie de exoglucosidasas. Se necesitan más experimentos para caracterizar todas las modificaciones postraduccionales del factor de transcripción REST.” En particular, los autores demuestran que REST migra a 200 kD en las células SH-SY5Y.

Subcategoría investigación
Factores de transcripción

Calidad

Evaluado mediante Western Blotting en lisado de células HEK293.Análisis mediante inmunoelectrotransferencia (WB): una dilución 1:1 000 de este anticuerpo detectó el REST en lisado de células HEK293.

Descripción de destino

~160 kDa observados; 121,87 kDa calculados. En algunos lisados pueden observarse bandas no caracterizadas.

Forma física

Anticuerpo policlonal de conejo purificado en tampón que contiene tampón fosfato 0,014 M, pH 7,6, NaCl 0,175 M, azida sódica al 0,07 % y glicerol al 30 %.

Presentación: Purificada

Proteína A purificada

Almacenamiento y estabilidad

Conservar a -10°C a -25°C. Recomendaciones de manipulación: Tras su recepción, y antes de quitar la tapa, centrifugue el vial y mezcle suavemente la disolución. Distribúyalo en alícuotas en tubos de microcentrífuga y guárdelo a -20°C. Evite ciclos repetidos de congelación y descongelación que pueden dañar la IgG y afectar al rendimiento del producto.

Nota de análisis

Control
Control de antígeno positivo: Nº de ref. 12-309, extracto nuclear de células HeLa. Añada un volumen igual de tampón de muestra reductor Laemmli a 10 μl del extracto y deje hervir durante 5 minutos para reducir la preparación. Cargue 20 μg del extracto reducido por carril para minigeles.

Otras notas

Concentración: Para conocer la concentración específica del lote, consulte el certificado de análisis.

Información legal

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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Información de seguridad

• Código de clase de almacenamiento: 12 - Non Combustible Liquids
• Clase de riesgo para el agua (WGK): WGK 2
• Punto de inflamabilidad (°F): Not applicable
• Punto de inflamabilidad (°C): Not applicable