MAB1594

Anticuerpo anti-frataxina, exón 4, clon 1G2

ascites fluid, clone 1G2, Chemicon^®

• Sinónimos: Friedreich ataxia, Friedreich ataxia protein
• UNSPSC Code: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Propiedades

• biological source: mouse
• Quality Level: 100
• antibody form: ascites fluid
• antibody product type: primary antibodies
• clone: 1G2, monoclonal
• species reactivity: human, rat, mouse
• manufacturer/tradename: Chemicon^®
• technique(s): ELISA: suitable; immunocytochemistry: suitable; immunofluorescence: suitable; western blot: suitable
• isotype: IgG1κ
• NCBI accession no.: NM_000144.3
• UniProt accession no.: Q16595
• shipped in: dry ice
• target post-translational modification: unmodified
• Gene Information: human ... FXN(2395) ; mouse ... Fxn(14297) ; rat ... Fxn(499335)

Descripción

General description

La frataxina es una proteína mitocondrial monómera que se cree que interviene en la homeostasis del hierro a través de un mecanismo desconocido. La mayor expresión de frataxina se produce en tejidos ricos en mitocondrias, como hígado, corazón y músculo esquelético (Campuzano, 1996; Koutnikova, 1997). La frataxina se expresa como un precursor de 30 kDa (transitorio; 210 aminoácidos) que es procesado dentro de la mitocondria en dos pasos catalizados por la peptidasa de procesamiento mitocondrial (MPP) para producir la proteína madura (Koutnikova, 1998). El primer paso consiste en la escisión de los primeros 41 aminoácidos N-terminales por la MPP, produciendo un intermediario transitorio de aproximadamente 20 kDa (aa 42-210). La escisión ulterior del N-terminal de este intermediario de 20 kDa por la MPP produce la proteína frataxina madura de 18 kDa (aa 56-210). Defectos en el gen que codifica la frataxina se han implicado como causa de la ataxia de Friedreich, una enfermedad degenerativa progresiva, autosómica recesiva caracterizada por neurodegeneración y miocardiopatía. En la mayoría de los casos de ataxia de Friedreich, hay una expansión de repetición de trinucleótidos en el primer intrón del gen que codifica la frataxina, lo que provoca una marcada disminución de la expresión de la frataxina, tal vez debido a la formación de alguna estructura de ADN inusual pero estable que interfiere en la transcripción (Campuzano, 1997; Bidichandani, 1998). Esta reducción en la expresión de la frataxina produce la acumulación de hierro no quelado en las mitocondrias, la inhibición de las proteínas mitocondriales de sulfuro de hierro y el estrés oxidativo mediado por hierro (Foury, 1997; para revisión ver Puccio, 2000).

Specificity

Frataxina humana. El MAB1594 reconoce solo las isoformas de la frataxina que contienen el exón 4. En Western blots de extractos musculares, cardiaco, cerebelares y de médula espinal humanos sanos, el MAB1594 reconoce una banda que migra a aproximadamente 18 kDa correspondiente a la frataxina procesada (Campuzano, 1997). Puede observarse una ligera reactividad cruzada con la miosina en inmunoelectrotransferencia. El marcaje inmunofluorescente de células HeLa con MAB1594 demuestra que la frataxina se encuentra predominantemente en las mitocondrias (Campuzano, 1997).

Se espera reacción cruzada con la humana.

Immunogen

Epítopo: exón 4

Frataxina humana de longitud completa fusionada a TrpE.

Application

Detección de la frataxina utilizando este anticuerpo anti-frataxina, exón 4, clon 1G2 validado para utilizar en ELISA, IC, IF y WB.

Inmunofluorescencia:
1:100- 1:1000. Se recomienda la fijación de las células en acetona helada o paraformaldehído al 4%. Debido a la localización subcelular de la frataxina en las mitocondrias, las células deben permeabilizarse en detergente antes de su incubación con el anticuerpo primario.

ELISA:
un lote anterior de este anticuerpo se utilizó en ELISA.

Inmunoelectrotransferencia (Western blot) (proteína natural y recombinante):
1:5 000; se recomiendan preparaciones mitocondriales para señales consistentes (véase Santos, 2001).

El usuario final debe determinar las diluciones de trabajo óptimas.

Quality

Evaluada sistemáticamente mediante inmunotransferencia Western en lisados PC12.

Análisis mediante inmunotransferencia Western:
una dilución 1:1000 de este lote permitió detectar la frataxina en 10 μg de lisados PC12.

Target description

~18 kDa

Physical form

IgG1κ ascítico monoclonal de ratón en tampón que contiene líquido sin conservantes.

Storage and Stability

Estable durante 1 año a -20°C en alícuotas no diluidas desde la fecha de recepción.
Recomendaciones de manipulación: Tras la primera descongelación, y antes de quitar la tapa, centrifugue el vial y mezcle suavemente la disolución. Distribúyalo en alícuotas en tubos de microcentrífuga y guárdelo a -20°C. Evite ciclos repetidos de congelación y descongelación que pueden dañar la IgG y afectar al rendimiento del producto.

Analysis Note

Control
Hígado, corazón o músculo esquelético.

Other Notes

Concentración: Para conocer la concentración específica del lote, consulte el certificado de análisis.

Legal Information

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Información de seguridad

• Storage Class: 11 - Combustible Solids
• wgk_germany: WGK 1
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable