S5193

JumpStart^™ Taq ReadyMix avec SYBR^® Green^™

for quantitative PCR, without MgCl₂ in buffer

• Synonyme(s) : Hot start PCR master mix, sybr green PCR master mix, sybr green qPCR
• Numéro MDL: MFCD03458666
• Code UNSPSC : 41106300
• Nomenclature NACRES : NA.55

Propriétés

• Forme: liquid
• Utilisation: sufficient for 100 reactions; sufficient for 20 reactions; sufficient for 400 reactions
• Caractéristiques: dNTPs included; hotstart
• Concentration: 1.25 units/reaction (50 μL reaction volume)
• Technique(s): qPCR: suitable
• Couleur: colorless
• Entrée: purified DNA
• Adéquation: suitable for PCR
• Application(s): agriculture
• Compatibilité: Bio-Rad MyiQ; Bio-Rad iCycler iQ; Bio-Rad iQ 5; for use with ABI 5700; for use with ABI 7000; for use with ABI 7300; for use with ABI 7500 Fast; for use with ABI 7500; for use with ABI 7700; for use with ABI 7900 Fast; for use with ABI 7900 HT; for use with ABI 7900; for use with ABI StepOne; for use with ABI StepOnePlus; for use with ABI ViiA 7; for use with Bio-Rad CFX384; for use with Bio-Rad CFX96; for use with Bio-Rad MJ Chromo4; for use with Bio-Rad MJ Opticon 2; for use with Bio-Rad MJ Opticon Cepheid SmartCycler; for use with Bio-Rad MJ Opticon; for use with Bio-Rad MiniOpticon; for use with Eppendorf^® Mastercycler ep realplex2 s; for use with Eppendorf^® Mastercycler ep realplex; for use with Illumina Eco qPCR; for use with Qiagen Corbett Rotor-Gene 3000; for use with Qiagen Corbett Rotor-Gene 6000; for use with Qiagen Corbett Rotor-Gene Q; for use with Roche LightCycler 480; for use with Strategene Mx3000P; for use with Strategene Mx3005P; for use with Strategene Mx4000
• Méthode de détection: SYBR^® Green
• Conditions d'expédition: wet ice
• Température de stockage: −20°C

Description

Description générale

Le mélange maître JumpStart^™ Taq ReadyMix^™ avec SYBR^® Green allie les performances de l'anticorps anti-Taq JumpSart^™ pour PCR à démarrage à chaud avec détection au SYBR^® Green I, et la simplicité d'utilisation d'une solution ReadyMix^™. Ce mélange prêt à l'emploi, composé de colorant SYBR^® Green I, de Taq polymérase JumpStart^™, de désoxynucléotides purs à 99 % et d'un tampon de réaction, se présente sous la forme d'une solution concentrée 2 × pour une plus grande facilité d'utilisation. Il suffit d'ajouter 25 μl de la solution concentrée 2× à un mélange contenant la matrice d'ADN et les amorces dans de l'eau. L'anticorps anti-Taq JumpSart^™ inactive l'ADN polymérase à température ambiante. Lorsque la température passe au-dessus de 70 °C pendant la première étape de dénaturation du thermocyclage, le complexe se dissocie et la polymérase devient totalement active. La Taq ADN polymérase JumpStart^™ empêche les amplifications non spécifiques, ce qui améliore la précision des valeurs de C_T.

Application

SYBR^® Green JumpStart^® Taq ReadyMix^™ has been used:

• During RNA extraction, reverse transcription and Quantitative PCR
• During analysis of leptin and leptin receptor expression. (PCR and melting curve analyses were performed)
• For tissue RNA Isolation. (PCR and melting curve analyses were performed)
• in real-time PCR (RT-PCR) of reverse-transcribed cDNA template
• For qPCR amplifications using SYBR
• For multiplex PCR

SYBR^® Green JumpStart^™ Taq ReadyMix^™ has been used:

• to prepare the real-time PCR mixture
• in the quantitative analysis of gene expression by real time, quantitative polymerase chain reaction (qPCR)
• to determine the mRNA expression of nuclear factor erythroid 2 (NFE2)-related factor 2 (Nrf2) gene by qPCR

Caractéristiques et avantages

• Tous les avantages d'une PCR à démarrage à chaud avec inactivation par un anticorps et détection au SYBR^® Green dans un mélange ReadyMix^™ : la solution idéale pour les applications à haut débit (il suffit d'ajouter les amorces et la matrice)
• Pas d'amplification de produits non spécifiques grâce à la Taq ADN polymérase JumpStart^™, pour une plus grande efficacité et un meilleur rendement de la cible
• Mélange maître JumpStart^™ Taq ReadyMix^™ avec SYBR^® Green pour qPCR au SYBR^® formulé avec du MgCl₂ ou conditionné avec un flacon séparé afin de faciliter l'optimisation Produits ReadyMix^™ compatibles avec les instruments pour tubes et pour plaques
• Constance des performances d'une réaction à l'autre
• Produit conçu pour réduire au minimum les risques de contamination
• Réduction des dimères d'amorces
• Réduction du temps de mise en place par rapport aux techniques HotStart^® manuelles ou à billes de cire
• Possibilité de mise en place à température ambiante et présence d'un colorant fluorescent : la solution idéale pour les applications de qPCR

Conditionnement

Le volume réactionnel par défaut est de 50 μl.

20RXN est conditionné en 1 X 500 μl
100RXN est conditionné en 1 X 2,5 ml
400RXN est conditionné en 1 X 10 ml
500RXN est conditionné en 1 X 12,5 ml

Autres remarques

Magnesium chloride is provided separately for optimization.

Principe

JumpStart Taq ReadyMix avec SYBR Green est recommandé pour les expériences d′amplification en temps réel de produit unique, et peut également servir à l′optimisation de PCR avant fabrication de sondes marquées avec un composé fluorescent. Il n′est pas recommandé d′utiliser ce type de sonde avec le colorant SYBR Green I.

Ce dernier, un colorant fluorescent se liant à l′ADN couramment employé, se fixe sur tous les ADN double brin ; la détection est assurée par la mesure de l′augmentation de la fluorescence au cours du cycle. SYBR Green I présente des maxima d′excitation et d′émission respectifs de 494 nm et 521 nm. Les réglages instrumentaux correspondant au colorant de référence ROX donnent des résultats satisfaisants pour la mesure du colorant de référence en PCR quantitative. La spécificité de la détection par SYBR de la QPCR de Sigma est fortement améliorée par l′incorporation d′une Taq polymérase médiée par un démarrage à chaud, la JumpStart Taq.

Informations légales

Use of this product is covered by one or more of the following US patents and corresponding patent claims outside the US: 5,994,056 and 6,171,785.. The purchase of this product includes a limited, non-transferable immunity from suit under the foregoing patent claims for using only this amount of product for the purchaser′s own internal research. No right under any other patent claim (such as apparatus or system claims in US Patent No. 6,814,934) and no right to perform commercial services of any kind, including without limitation reporting the results of purchaser′s activities for a fee or other commercial consideration, is conveyed expressly, by implication, or by estoppel. This product is for research use only. Diagnostic uses under Roche patents require a separate license from Roche. Further information on purchasing licenses may be obtained by contacting the Director of Licensing, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California 94404, USA.

Eppendorf is a registered trademark of Eppendorf AG

HOTSTART is a registered trademark of Molecular BioProducts, Inc.

Julabo is a registered trademark of Julabo USA, Inc.

JumpStart is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

ReadyMix is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

SYBR is a registered trademark of Life Technologies

Informations sur la sécurité

• Pictogrammes: GHS07,GHS09
• Mention d'avertissement: Warning
• Mentions de danger: H315,H317,H319,H410
• Conseils de prudence: P261 - P264 - P273 - P280 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338
• Classification des risques: Aquatic Acute 1 - Aquatic Chronic 1 - Eye Irrit. 2 - Skin Irrit. 2 - Skin Sens. 1
• Code de la classe de stockage: 10 - Combustible liquids
• Point d'éclair (°F): Not applicable
• Point d'éclair (°C): Not applicable