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P7012

Sigma-Aldrich

Pepsine from porcine gastric mucosa

lyophilized powder, ≥2,500 units/mg protein (E1%/280)

Synonyme(s) :

Pepsine from hog stomach, Pepsine A

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About This Item

Numéro CAS:
Numéro de classification (Commission des enzymes):
Numéro CE :
Numéro MDL:
Code UNSPSC :
12352204
eCl@ss :
42010127
Nomenclature NACRES :
NA.54

Forme

lyophilized powder

Activité spécifique

≥2,500 units/mg protein (E1%/280)

Poids mol.

35 kDa

Couleur

off-white to yellow

Solubilité

deionized water: soluble 10 mg/mL
10 mM HCl: soluble 4 mg/mL (Cold)

Numéro d'accès UniProt

Application(s)

diagnostic assay manufacturing

Température de stockage

−20°C

Informations sur le gène

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Application

La pepsine est une peptidase utilisée pour digérer les protéines et est souvent utilisée pour la préparation des fragments Fab d′anticorps. La pepsine dérivée de la muqueuse gastrique porcine a été utilisée pour l′hydrolyse d′échantillons cervicaux secs chez la souris.
L′enzyme proposée par Sigma a été utilisée pour la digestion de la gliadine de froment brute. Elle a été utilisée avec d′autres enzymes pour démontrer les effets de la fixation et de la digestion enzymatique dans les essais d′immunohistochimie sur tissus inclus en paraffine. Elle a été utilisée pour la digestion (préalable aux méthodes d′immunoperoxydase) pour réduire la coloration non spécifique de fond dans des coupes de tissus bronchiques. Cette enzyme a également été utilisée pour la préparation de fragments F(ab)2 d′IgG.
La pepsine peut être utilisée pour produire des fragments F(ab′)2 d′anticorps. pepsine sur www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer.

Actions biochimiques/physiologiques

La pepsine hydrolyse les liaisons peptidiques, mais pas les liaisons amide ou ester. La pepsine clive les peptides contenant un acide aminé aromatique d′un côté ou l′autre de la liaison peptidique. Les acides aminés contenant du soufre augmentent la susceptibilité à l′hydrolyse lorsqu′ils sont à proximité de la liaison peptidique. La pepsine clive préférentiellement du côté carboxyle des résidus de phénylalanine et de leucine et du côté carboxyle des résidus d′acide glutamique. Clive les liaisons Phe-Val, Gln-His, Glu-Ala, Ala-Leu, Leu-Tyr, Tyr-Leu, Gly-Phe, Phe-Phe et Phe-Tyr dans la chaîne β d′insuline
La pepsine est l′enzyme protéolytique principale produite dans l′estomac. Elle digère les protéines en clivant les liaisons peptidiques internes.
L′enzyme ne réalise pas de clivage au niveau des liaisons avec la valine, l′alanine ou la glycine. La Z-L-tyrosyl-L-phénylalanine, la Z-L-glutamyl-L-tyrosine et la Z-L-méthionyl-L-tyrosine peuvent servir de substrats à la digestion par la pepsine. La pepsine est inhibée par plusieurs peptides contenant de la phénylalanine.
Clivage préférentiel : résidus hydrophobes et aromatiques en positions P1 et P1′. Clive les liaisons Phe-Val, Gln-His, Glu-Ala, Ala-Leu, Leu-Tyr, Tyr-Leu, Gly-Phe, Phe-Phe et Phe-Tyr dans la chaîne β d′insuline.

Définition de l'unité

Une unité produit une ΔA280 de 0,001 par minute à pH 2,0 et 37 °C, mesurée sous forme de produits solubles dans l′acide trichloracétique (TCA), en utilisant de l′hémoglobine comme substrat. (Volume final = 16 ml. Trajet optique = 1 cm.)

Remarque sur l'analyse

E1 %/280= 14,7
Le pH optimal se situe entre 2 et 4. Activité maintenue dans une solution d′urée à 4 M et de guanidine HCl à 3 M. Stable à 60 °C. La pepsine est inactivée de façon irréversible à pH 8,0 - 8,5.
Protéine déterminée par E1 %/280

Autres remarques

Pour en savoir plus sur la pepsine, rendez-vous sur www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer.

Inhibiteur

Réf. du produit
Description
Tarif

Pictogrammes

Health hazardExclamation mark

Mention d'avertissement

Danger

Mentions de danger

Classification des risques

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

Organes cibles

Respiratory system

Code de la classe de stockage

11 - Combustible Solids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 1

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable

Équipement de protection individuelle

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves


Certificats d'analyse (COA)

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A digestion technique for the reduction of background staining in the immunoperoxidase method.
M Reading
Journal of clinical pathology, 30(1), 88-90 (1977-01-01)
S B Halstead et al.
The Journal of experimental medicine, 146(1), 201-217 (1977-07-01)
Cultured mononuclear peripheral blood leukocytes (PBL) from nonimmune human beings and monkeys are nonpermissive to dengue 2 virus (D2V) infection at multiplicities of infection of 0.001-0.1, but become permissive when non-neutralizing dengue antibody is added to medium. D2V infection occurred
Chiara Zanoni et al.
Journal of agricultural and food chemistry, 65(40), 8829-8838 (2017-09-22)
This study had the objective of preparing a hempseed protein hydrolysate and investigating its hypocholesterolemic properties. The hydrolysate was prepared treating a total protein extract with pepsin. Nano HPLC-ESI-MS/MS analysis permitted identifying in total 90 peptides belonging to 33 proteins.
Enzymes of Molecular Biology
Sweeney, P.J., and Walker, J.M.
Methods in Molecular Biology, 290-291 (1993)
P Kirkpatrick et al.
Journal of clinical pathology, 37(6), 639-644 (1984-06-01)
The effects of different fixatives and enzymatic digestion procedures on the immunohistochemical demonstration of fibronectin and laminin in paraffin embedded tissues have been compared. None of the fixatives tested enabled staining of these proteins without enzymatic digestion. No intracytoplasmic laminin

Protocoles

This procedure may be used for determination of Pepsin activity using hemoglobin as the substrate. It is a spectrophotometric stop rate determination.

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