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MABE1126

Sigma-Aldrich

Anticorps anti-G-quadruplex (G4) d'ADN, clone 1H6

clone 1H6, from mouse

Synonyme(s) :

DNA G-quadruplex (G4)

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About This Item

Code UNSPSC :
12352203
eCl@ss :
32160702
Nomenclature NACRES :
NA.41

Source biologique

mouse

Niveau de qualité

Forme d'anticorps

purified immunoglobulin

Type de produit anticorps

primary antibodies

Clone

1H6, monoclonal

Réactivité de l'espèce (prédite par homologie)

all

Technique(s)

ELISA: suitable
flow cytometry: suitable
immunocytochemistry: suitable
immunohistochemistry: suitable (paraffin)

Isotype

IgG2bκ

Conditions d'expédition

wet ice

Modification post-traductionnelle de la cible

unmodified

Description générale

L'ADN simple brin riche en guanine (G) peut former des structures secondaires stables appelées G-quadruplexes (ou G-tétrades, ou G4). Quatre bases guanine peuvent s'assembler par des liaisons hydrogène de type Hoogsteen pour former une structure plane carrée appelée tétrade de guanines (G-tétrade), et deux G-tétrades ou plus peuvent s'empiler les unes sur les autres pour former un G-quadruplex. La structure en quadruplex est en plus stabilisée par la présence d'un cation, en particulier un ion potassium, qui se place dans un canal central entre chaque paire de tétrades. Une G-tétrade d'ADN peut se former au sein d'un même brin d'ADN (intramoléculaire), entre deux brins d'ADN (bimoléculaire), ou entre quatre brins d'ADN (tétramoléculaire). De l'ADN G4 peut apparaître n'importe où dans le génome lorsque des morceaux suffisamment longs d'ADN simple brin riches en G sont exposés durant la réplication, la transcription ou la recombinaison. L'analyse chimique des oligonucléotides formant des quadruplexes a révélé l'existence d'une pléthore de structures quadruplexes dynamiques de stabilités diverses. La variété des structures d'ADN G4 en fait un sujet attractif pour la recherche biomédicale moléculaire.

Spécificité

La structure d'ADN ciblée ne présente pas de spécificité vis-à-vis de l'espèce.
Le clone 1H6 se lie aux structures d'ADN en G-quadruplex (G4) aussi bien tétramoléculaires qu'unimoléculaires (intramoléculaires) sans spécificité de séquence, et présente une affinité bien moindre pour la structure d'ARN tétramoléculaire ou une structure d'ADN en triplex, et peu ou pas d'affinité pour l'ADNsb et l'ADNdb de structure autre que G4. Le clone 1H6 ne semble cependant pas se lier à la structure G4 unimoléculaire du type [AGGG(TTAGGG)3], ce qui indique une large sélectivité pour un grand nombre, mais pas la totalité, des structures d'ADN en G4 (Henderson, A., et al. (2014). Nucleic Acids Res. 42(2):860-869).

Immunogène

G-quadruplex d'ADN dérivé d'oligonucléotides avec des répétitions télomériques et conjugué à de la KLH.

Application

Analyse par immunohistochimie : Une dilution au 1/50-1/250e d'un lot représentatif a permis de détecter des G-quadruplexes (G4) d'ADN dans du tissu de pancréas humain et de rein de souris.

Analyse par immunocytochimie : Un lot représentatif a permis de détecter des foyers discrets de G-quadruplexes (G4) d'ADN sur le chromosome compact de cellules HeLa en métaphase et de cellules souches embryonnaires murines (Henderson, A., et al. (2014). Nucleic Acids Res. 42(2):860-869).

Analyse par immunocytochimie : Un lot représentatif a permis de détecter une immunoréactivité nettement diminuée vis-à-vis des G-quadruplexes (G4) d'ADN nucléaire après traitement, avec des DNases, de cellules HeLa fixées au paraformaldéhyde et perméabilisées au Triton X-100 (Henderson, A., et al. (2014). Nucleic Acids Res. 42(2):860-869).

Analyse par immunocytochimie : Un lot représentatif a permis de détecter une immunoréactivité vis-à-vis de structures G4 d'ADN nucléaire induites par traitement à la télomestatine (TMS), un agent stabilisant les G-quadruplexes, dans des cellules DT40 de poulet dépourvues de FANCJ, une hélicase déroulant les G4, alors qu'aucun effet amplificateur du médicament n'a été observé dans des cellules DT40 exprimant FANCJ (Henderson, A., et al. (2014). Nucleic Acids Res. 42(2):860-869).

Analyse par immunocytochimie : Un lot représentatif a permis de détecter une augmentation fonction du temps des foyers de G-quadruplexes (G4) d'ADN nucléaire dans des cellules U20S après traitement à la télomestatine (TMS), un agent stabilisant les G-quadruplexes (Henderson, A., et al. (2014). Nucleic Acids Res. 42(2):860-869).

Analyse ELISA : La sélectivité en termes de cible d'un lot représentatif a été déterminée avec un test ELISA par compétition. Le clone 1H6 se lie aux structures d'ADN en G-quadruplex (G4) aussi bien tétramoléculaires qu'unimoléculaires (intramoléculaires) (Henderson, A., et al. (2014). Nucleic Acids Res. 42(2):860-869).

Analyse par cytométrie en flux : Un lot représentatif a permis de détecter une immunoréactivité accrue vis-à-vis des G-quadruplexes (G4) d'ADN dans des cellules HeLa après traitement avec l'agent TMPyP4 stabilisant les structures G4 (réf. 613560) (Henderson, A., et al. (2014). Nucleic Acids Res. 42(2):860-869).

Analyse par immunohistochimie : Un lot représentatif a permis de détecter une immunoréactivité vis-à-vis de G-quadruplexes (G4) d'ADN nucléaire dans diverses coupes de tissu humain inclus en paraffine, notamment de la peau, du pancréas, du testicule, du placenta, du cerveau, de l'appendice, du côlon et du rein (Henderson, A., et al. (2014). Nucleic Acids Res. 42(2):860-869).
Cet anticorps anti-G-quadruplex (G4) d'ADN, clone 1H6, est validé pour la détection des G-quadruplexes d'ADN en immunocytochimie, immunohistochimie (sur coupes en paraffine), ELISA et cytométrie en flux.
Domaine de recherche
Épigénétique et fonction nucléaire
Sous-domaine de recherche
Récepteurs nucléaires

Qualité

Produit évalué par immunocytochimie sur des cellules HeLa.

Analyse par immunocytochimie : Une concentration de 2,0 µg/ml de cet anticorps a permis de détecter des G-quadruplexes (G4) d'ADN dans des cellules HeLa.

Forme physique

Format : purifié
IgG2bκ monoclonale de souris purifiée, dans un tampon à base de Tris-glycine 0,1 M (pH 7,4) et de NaCl 150 mM contenant 0,05 % d'azoture de sodium.
Produit purifié sur protéine G.

Stockage et stabilité

Stable entre 2 et 8 °C pendant 1 an à compter de la date de réception.

Autres remarques

Concentration : Voir la fiche technique du lot concerné.

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Code de la classe de stockage

12 - Non Combustible Liquids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 1

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable


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