To enhance stability & functional consistency, store the undiluted antibody at −20 °C in working aliquots. Repeated freezing and thawing is not recommended.
F3165
ANTI-FLAG® M2 monoclonal antibody produced in mouse
clone M2, purified immunoglobulin (Purified IgG1 subclass), buffered aqueous solution (10 mM sodium phosphate, 150 mM NaCl, pH 7.4, containing 0.02% sodium azide)
ANTI-FLAG® M2 antibody, Mouse monoclonal
Sinónimos:
Anti-ddddk, Anti-dykddddk
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Acerca de este artículo
NACRES:
NA.32
UNSPSC Code:
12352203
Conjugate:
unconjugated
Clone:
M2, monoclonal
Application:
WB
Citations:
8404
Servicio técnico
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Permítanos ayudarlebiological source
mouse
Quality Segment
conjugate
unconjugated
antibody form
purified immunoglobulin (Purified IgG1 subclass)
antibody product type
primary antibodies
clone
M2, monoclonal
form
buffered aqueous solution (10 mM sodium phosphate, 150 mM NaCl, pH 7.4, containing 0.02% sodium azide)
purified by
using Protein A
species reactivity
all
concentration
3.8-4.2 mg/mL
technique(s)
western blot: 10 μg/mL (Protein A)
isotype
IgG1
immunogen sequence
DYKDDDDK
shipped in
dry ice
storage temp.
−20°C
General description
El anticuerpo anti-Flag M2 se utiliza para la detección de proteínas de fusión Flag. Este anticuerpo monoclonal se produce en el ratón y reconoce la secuencia FLAG en el N-terminal, Met N-terminal y C-terminal. El anticuerpo es también capaz de reconocer FLAG en una posición interna. M2, a diferencia del anticuerpo M1 no es dependiente de calcio.
F3165 se purifica por afinidad utilizando resina de proteína A, por lo que contiene no solo el anticuerpo anti-FLAG M2, sino también pequeñas cantidades de IgG nativa de ratón, aumentando su sensibilidad en la mayoría de las aplicaciones.
Método de purificación - proteína A
F3165 se purifica por afinidad utilizando resina de proteína A, por lo que contiene no solo el anticuerpo anti-FLAG M2, sino también pequeñas cantidades de IgG nativa de ratón, aumentando su sensibilidad en la mayoría de las aplicaciones.
Método de purificación - proteína A
Immunogen
FLAG; secuencia peptídica DYKDDDDK
Application
Se ha utilizado anticuerpo monoclonal M2 ANTI- FLAG® producido en el ratón en:
Explore otras referencias de aplicación en nuestro portal Bibliografía sobre FLAG ® .
- inmunotransferencia
- inmunoprecipitación
- inmunocitoquímica
- inmunofluorescencia
- ELISA
- EIA
- inmunoprecipitación de la cromatina
- microscopia electrónica
- citometría de flujo
- ensayos de superretardo
Explore otras referencias de aplicación en nuestro portal Bibliografía sobre FLAG ® .
Preparation Note
Diluir la disolución de anticuerpos desde 0,5 - 10 µg/ml en disolución salina tamponada con Tris, pH 8,0, con leche desnatada al 3 %
Guardar el anticuerpo no diluido a –20 °C en alícuotas de trabajo. No se recomienda congelar y descongelar repetidamente.
Nota: Con el tiempo, pequeñas cantidades de los anticuerpos purificados pueden precipitar de la disolución debido a interacciones hidrófobas intermoleculares. Si se observa un precipitado en este producto, hay que centrifugar brevemente el vial para que sedimente. Extraer el volumen deseado de la disolución de anticuerpos del sobrenadante transparente para su uso. Esto no deberá alterar el rendimiento del anticuerpo purificado en las aplicaciones de inmunoelectrotransferencia (Western blot) o de inmunoprecipitación.
Nota: Con el tiempo, pequeñas cantidades de los anticuerpos purificados pueden precipitar de la disolución debido a interacciones hidrófobas intermoleculares. Si se observa un precipitado en este producto, hay que centrifugar brevemente el vial para que sedimente. Extraer el volumen deseado de la disolución de anticuerpos del sobrenadante transparente para su uso. Esto no deberá alterar el rendimiento del anticuerpo purificado en las aplicaciones de inmunoelectrotransferencia (Western blot) o de inmunoprecipitación.
Legal Information
ANTI-FLAG is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
FLAG is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
1 of 1
Este artículo | |||
|---|---|---|---|
| clone M2, monoclonal | clone M2, monoclonal | clone M2, monoclonal | clone M2, monoclonal |
| conjugate unconjugated | conjugate unconjugated | conjugate - | conjugate agarose conjugate |
| antibody form purified immunoglobulin (Purified IgG1 subclass) | antibody form affinity isolated antibody | antibody form - | antibody form purified immunoglobulin |
| species reactivity all | species reactivity all | species reactivity - | species reactivity - |
| biological source mouse | biological source mouse | biological source - | biological source - |
| form buffered aqueous solution (10 mM sodium phosphate, 150 mM NaCl, pH 7.4, containing 0.02% sodium azide) | form buffered aqueous solution (50% glycerol, 10 mM sodium phosphate, and 150 mM NaCl, pH 7.4) | form - | form buffered aqueous glycerol solution |
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What is the recommended short-term storage condition for FLAG M2 antibody — is 4°C acceptable?
1 answer-
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What is the recommended dilution for immunocytochemistry for this product ?
1 answer-
This product has not been validated for immunocytochemistry applications.
Helpful?
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Is there a recommended dilution for capture (sandwich) based ELISA?
1 answer-
Monoclonal ANTI-FLAG® M2 may be used in EIA procedures. Typically, a fusion protein containing a FLAG® peptide sequence is directly adsorbed (or otherwise presented) within the wells of a multiwell polystyrene plate. The Monoclonal ANTI-FLAG® M2 antibody may be diluted up to 1:50,000 for subsequent incubation within the plate wells. Detection may be accomplished using Anti-Mouse IgG-Peroxidase (Cat. No. A9044) or equivalent, diluted 1:10,000, followed by an appropriate substrate for visualization.
Dilutions for use as the capture antibody in an ELISA have not been evaluated. We would recommend that the end-user optimize the protocol following the recommendations found here:
https://www.sigmaaldrich.com/technical-documents/protocol/protein-biology/elisa/elisa-procedures#antigen_coatingHelpful?
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What is the recommended dilution for conducting western blotting using this antibody?
1 answer-
The recommended dilution for Western Blot is 10 µg/mL. Please see the link below to review additional information, including protocols:
https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/274/912/f3165dat-ms.pdfHelpful?
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What is the difference between F1804 and F3165 product?
1 answer-
Product F1804 and F3165 are both Monoclonal ANTI-FLAG M2 antibodies produced in mouse Clone M2, with the same starting material. The distinction between the products lies in their purification methods. F3165 is immunoglobulin purified, while F1804 is immunogen affinity purified. F1804, being more purified, is expected to exhibit reduced background and less non-specific staining compared to F3165. Both products are suitable for western blotting, immunofluorescence, and immunoprecipitation.
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What is the recommended dilution for conducting immunoprecipitation (IP) using the M2 antibody?
1 answer-
The general starting recommendation for conducting immunoprecipitation (IP) using the F3165, anti-FLAG M2 antibody, is 10 μg/mL.
Helpful?
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What type of light chain is present on the FLAG M2 antibody?
1 answer-
Test has not been conducted to determine whether the light chains of the antibody F3165, Monoclonal ANTI-FLAG® M2 antibody produced in mouse, are kappa or lambda. However, based on customer feedback, it appears that the M2 monoclonal antibody has lambda light chains and not kappa. A probe with anti-kappa did not yield a signal, while anti-lambda produced a good signal.
Helpful?
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