CELLPRO-RO

Reactivo para proliferación celular WST-1

suitable for protein quantification, suitable for cell analysis, detection, solution

• Sinónimos: reactivo para proliferación celular, wst-1
• NACRES: NA.21
• UNSPSC Code: 12352200

Propiedades

• form: solution
• usage: sufficient for ≤2,500 tests (11644807001), sufficient for ≤800 tests (05015944001)
• packaging: bottle of 25 mL (11644807001), bottle of 8 mL (05015944001)
• manufacturer/tradename: Roche
• storage condition: protect from light
• technique(s): protein quantification: suitable
• optimum pH: 8.0(for physiological conditions our product is buffered pH 7.3)
• λmax: 440-480 nm
• application(s): cell analysis; detection
• detection method: colorimetric
• storage temp.: −20°C

Descripción

General description

Contenido
Disolución lista para usar que contiene WST-1 y un reactivo de acoplamiento electrónico.

La proliferación celular requiere la replicación del ADN genómico. Por tanto, la supervisión de la síntesis de ADN es un parámetro indirecto de la proliferación celular, además de ser adecuada para el estudio de la regulación de la síntesis de ADN. La [³H]-timidina se ha utilizado tradicionalmente para marcar el ADN de las células en división (en fase de reproducción). Para esquivar las desventajas asociadas con el uso de la [³H]-timidina, se han desarrollado alternativas no radiactivas basadas en la 5-bromo-2′-desoxiuridina (BrdU). El uso de tecnología de quimioluminiscencia proporciona una mayor sensibilidad y un amplio intervalo de medida.

Valoración colorimétrica (basada en WST-1) para la cuantificación no radiactiva de la proliferación y la viabilidad celulares, y la citotoxicidad.

Application

El reactivo para proliferación celular WST-1 se utiliza para la cuantificación espectrofotométrica no radiactiva de la proliferación celular y la viabilidad en poblaciones celulares utilizando el formato de placas de 96 pocillos. Medida de la proliferación celular en respuesta a factores de crecimiento, citocinas, mitógenos y nutrientes.[1][2][3][4]

• Análisis de compuestos citotóxicos y citostáticos, como los medicamentos anticancerosos y otros compuestos farmacéuticos
• Evaluación de los anticuerpos inhibidores del crecimiento y mediadores fisiológicos[5]

Biochem/physiol Actions

La sal de tetrazolio estable WST-1 es escindida a un formazán soluble mediante un complejo mecanismo celular que se produce principalmente en la superficie celular. Esta biorreducción depende en gran medida de la producción glucolítica de NAD(P)H en células viables. Por consiguiente, la cantidad del colorante formazán formado muestra una correlación directa con el número de células metabólicamente activas en el cultivo.
Las células cultivadas en placas de cultivo tisular de 96 pocillos se incuban con el reactivo WST-1 durante 0,5 a 4 horas. Después de este periodo de incubación, se determina cuantitativamente el colorante formazán formado con un espectrofotómetro de barrido múltiple (lector de ELISA). La absorbancia medida se relaciona directamente con el número de células viables.
Los ensayos de proliferación celular y de viabilidad son de particular importancia en las aplicaciones habituales de biología celular. Las sales de tetrazolio (MTT, XTT, WST-1) son particularmente útiles para este tipo de análisis. Las sales de tetrazolio son hidrolizadas para formar formazán por medio del sistema de la succinato-tetrazolio reductasa (EC 1.3.99.1), que pertenece a la cadena respiratoria de las mitocondrias, y está activo sólo en las células metabólicamente intactas.

Features and Benefits

• Comodidad: Las ventajas de un reactivo listo para usar.
• Seguridad y facilidad: Se evita la utilización de isótopos radiactivos, etapas de lavado y otros reactivos.
• Precisión: La absorbancia obtenida muestra una fuerte correlación con el número de células.
• Sensibilidad: Se detectan células en pequeña cantidad.
• Rapidez: Se puede procesar un gran número de muestras utilizando un lector de ELISA múltiple.

Preparation Note

Concentración de trabajo: Para obtener los mejores resultados, añadir 10 μl/pocillo del reactivo de proliferación celular WST-1 a las células ya cultivadas en 100 μl/pocillo (dilución final 1:10).
Si se utiliza el volumen de cultivo celular de 100 μl/pocillo, bastará un vial para realizar 2 500 pruebas (25 microplacas).
Nota: Si las células se cultivan en 200 μl/pocillo, hay que añadir 20 μl/pocillo del reactivo para proliferación celular WST-1.
Condiciones de almacenamiento (disolución de trabajo): de 2 a 8 °C
Nota: Si se observan precipitados o turbidez al descongelar, calentar la disolución a 37 ºC durante 2 a 10 minutos y agitar para disolver los precipitados. No se recomienda centrifugar porque disminuiría la concentración de trabajo. Una vez disuelto, el reactivo WST-1 puede utilizarse sin limitaciones. Conservar como se indica:
Una vez descongelado, guardar entre 2 y 8 °C, protegido de la luz durante un máximo de cuatro semanas. Sin embargo, tenga en cuenta que la disolución puede volverse viscosa. Si es así, caliente la disolución a 37 °C durante 2 a 10 minutos como se acaba de describir.

Conservación prolongada
Para el almacenamiento a largo plazo, pueden conservarse alícuotas de WST-1 en tubos de plástico entre -15 y -25 °C hasta la fecha de caducidad.

Other Notes

Sólo para investigación en ciencias de la vida. No indicada para procedimientos diagnósticos.

Información de seguridad

• Clase de almacenamiento: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk: nwg
• flash_point_f: No data available
• flash_point_c: No data available