70663

Proteinasa K from Tritirachium album

Highly active serine protease that exhibits broad cleavage specificity on native and denatured proteins and is widely used in the purification of DNA and RNA.

• Sinónimos: Endopeptidasa K
• Número CAS: 39450-01-6
• UNSPSC Code: 12352202
• NACRES: NA.85
• Número CE: 3.4.21.64 (BRENDA, IUBMB)
• MDL number: MFCD00132129
• eCl@ss: 32160410

Propiedades

• Quality Segment: 400
• form: solid
• mol wt: 28.93 kDa
• manufacturer/tradename: Novagen^®
• storage condition: OK to freeze
• technique(s): DNA extraction: suitable
• shipped in: wet ice
• storage temp.: 2-8°C

Descripción

General description

Proteinase K is a highly active 28,904-Daserine protease isolated from the fungusTritirachium album. The enzyme exhibitsbroad cleavage specificity on native anddenatured proteins and is widely used in thepurification of DNA and RNA. Its activityis increased in the presence of denaturantssuch as SDS (1%) and elevated temperature(50-60°C). The recommended workingconcentration is 50-100 µg/ml for proteinremoval and enzyme inactivation, and up to2 mg/ml for tissue treatment. The Proteinase K,Lyophilized powder can be prepared as a20 mg/ml stock solution in water and storedin aliquots at -20°C. The enzyme is alsoavailable as a ready-to-use concentrated stocksolution (600 mAU/ml) that is convenientfor routine use in most applications. 1 mgof Proteinase K is the equivalent of 30 mAU(AU = Anson unit). The Novagen ProteinaseK products are free of detectable DNase andRNase

Application

Útil para la inactivación proteolítica de nucleasas durante el aislamiento de ADN y ARN.

Útil para la inactivación proteolítica de nucleasas durante el aislamiento de ADN y ARN.
Elimina las endotoxinas que se unen a las proteínas catiónicas como la lisozima y la ribonucleasa A.
Se ha comunicado que es útil para el aislamiento de mitocondrias hepáticas, de levadura y de frijol mung
Determinación de la localización de las enzimas en las membranas
Tratamiento de cortes de tejido incluidos en parafina para exponer los sitios de unión de antígenos para el marcado con anticuerpos.
Digestión de proteínas de muestras de tejido cerebral para investigación de los priones en las encefalopatías espongiformes transmisibles (EET).

Biochem/physiol Actions

La proteinasa K es una serín proteasa estable y muy reactiva. La evidencia procedente de estudios de la estructura cristalina y molecular indica que la enzima pertenece a la familia subtilisina con una tríada catalítica en el sitio activo (ASP³⁹-HIS⁶⁹-ser²²⁴). Es estable en una amplia variedad de entornos: pH, sales amortiguadoras, detergentes (SDS) y temperatura. En presencia de SDS al 0,1 - 0,5 %, la proteinasa K conserva su actividad y digerirá una variedad de proteínas y nucleasas en preparaciones de ADN sin comprometer la integridad del ADN aislado.

Other Notes

One AU (AU = Anson unit) is defined as the amount of enzyme that liberates 1.0 µmol (181 µg) of tyrosine from casein per minute at pH 7.5 at 37°C.

Legal Information

NOVAGEN is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

Toxicity: Harmful (C)

Información de seguridad

• Pictogramas: GHS08,GHS07
• Palabra de advertencia: Danger
• Códigos de peligro: H315,H319,H334,H335
• Indicaciones de precaución: P261 - P264 - P271 - P280 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338
• Hazard Classifications: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• Órganos diana: Respiratory system
• Clase de almacenamiento: 11 - Combustible Solids
• ¿Qué está pasando?: WGK 1
• Punto de inflamación (°F): Not applicable
• Punto de inflamación (°C): Not applicable