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P8038
Proteinasi, batterica
Type XXIV, 7.0-14.0 units/mg solid, lyophilized powder
Sinonimo/i:
Proteinasi, Peptidasi A Subtilo, Proteasi, Proteasi alcalina
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About This Item
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Prodotti consigliati
Tipo
Type XXIV
Livello qualitativo
Forma fisica
lyophilized powder
Attività specifica
≤0.05 Kunitz units/mg solid RNase
≤5.0 Kunitz units/mg solid DNase
7.0-14.0 units/mg solid
PM
27 kDa
Purificato mediante
crystallization
Condizioni di spedizione
wet ice
Temperatura di conservazione
−20°C
Categorie correlate
Specificità
La subtilisina A fa parte della famiglia delle endoproteasi a serina S8. Ha ampia specificità con preferenza per grandi residui privi di carica in posizione P1. Idrolizza proteine native e denaturate ed è attivo in ambiente alcalino.
Applicazioni
L′enzima di Sigma è stato usato per ottimizzare il rilascio di tutte le popolazioni mitocondriali da tessuto ventricolare omogeneizzato di cuore di ratto.[1] È stato usato, inoltre, nel trattamento pre-ibridazione di campioni di fegato fissati in formalina, inclusi in paraffina per il rilevamento del DNA umano e virale.[2]
Questo è un enzima proteolitico isolato dalla fermentazione del Bacillus licheniformis. È una endoproteasi a serina con estesa specificità nei confronti di proteine native e denaturate attiva in condizioni alcaline. Il prodotto P8038, noto anche come subtilisina Carlsberg, è stato usato per idrolizzare le cellule cardiache per lo studio del silenziamento dell′NHE1 mitocondriale cardiaco[3].
Azioni biochim/fisiol
La proteinasi catabolizza le proteine per idrolisi dei legami peptidici. Le proteasi sono inattivate da inibitori dei siti attivi serinici come il fenilmetilsolfonil fluoruro (PMSF) e il diisopropilfluorofosfato.
Proprietà fisiche
La subtilisina è una catena polipeptidica singola non glicosilata senza legami disolfuro con un peso molecolare di circa 27 kDa.
Definizione di unità
Una unità idrolizzerà la caseina per produrre l′equivalente di colore di 1,0 μmole (181 μg) di tirosina al minuto a pH 7,5 e a 37 °C (colore dal reagente Folin-Ciocalteu).
Risultati analitici
Analisi degli aminoacidi e isoelettrofocalizzazione coerenti con la subtilisina Carlsberg.
Avvertenze
Danger
Indicazioni di pericolo
Consigli di prudenza
Classi di pericolo
Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Acute 1 - Aquatic Chronic 2 - Eye Dam. 1 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
Organi bersaglio
Respiratory system
Codice della classe di stoccaggio
10 - Combustible liquids
Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)
WGK 2
Dispositivi di protezione individuale
dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves
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What is the Department of Transportation shipping information for this product?
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What is the pH optimum for Product P8038, Proteinase, bacterial?
1 answer-
Two references cite pH 7.5 as optimal for this enzyme: (a) Ricks et al., Biotechnol. Prog., 8, 197-203 (1992), (b) Doswald et al., Bioorg. Med. Chem., 2, 403-410 (1994).
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What is the pI of Product P8038, Proteinase, bacterial?
1 answer-
One reference gives a pI of 9.4 for subtilisin Carlsberg. See: Zacharis, E. et al., Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 96, 1201-1205 (1999).
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How long can I store stock solutions of Product P8038, Proteinase, bacterial?
1 answer-
Our notes indicate that a 0.1% solution (1 mg/mL) in PBS or TBS can be stored for about a week at 0-4°C. For longer term storage, we would advise freezing the stock solution in aliquots.
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What is the molecular weight (MW) of Product P8038, Proteinase, bacterial?
1 answer-
The enzyme has a MW of 27.5-27.6 kDa. See DeLange & Smith, J. Biol. Chem., 243(9), 2134-2142 (1968).
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