C2674
Collagenasi
lyophilized powder, ≥125 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units), 0.5-5.0 FALGPA units/mg solid
Sinonimo/i:
Clostridiopeptidasi A
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About This Item
Prodotti consigliati
Origine biologica
Clostridium histolyticum
Livello qualitativo
Tipo
Type I-A
Forma fisica
lyophilized powder
Attività specifica
≥125 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)
0.5-5.0 FALGPA units/mg solid
PM
68-130 kDa
Concentrazione
1 mg/mL
tecniche
cell culture | mammalian: suitable
single cell analysis: suitable
pH
6.3-8.8
Condizioni di spedizione
ambient
Temperatura di conservazione
−20°C
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Descrizione generale
La collagenasi è una proteasi che scinde la proteina a tripla elica chiamata collagene. Esistono tre tipi di collagenasi tissutali; appartengono alla famiglia delle metalloproteinasi della matrice (MMP). La collagenasi ottenuta da Clostridium histolyticum ha un′attività molto intensa e digerisce il collagene da entrambe le estremità, a basse temperature fino a 4-10 °C. Le miscele di collagenasi grezza contengono due tipi principali di enzimi, vale a dire la collagenasi e la clostripaina.
Applicazioni
La collagenasi ottenuta da Clostridium histolyticum è stata usata nelle seguenti applicazioni:
Questo prodotto è adatto per disaggregare tumori umani, tessuto renale di topo, tessuto cerebrale umano fetale e adulto, polmone e molti altri tessuti epiteliali. Si è dimostrato efficace anche in studi di perfusione epatica e renale, nella digestione del pancreas, nell′isolamento di cellule epatiche non parenchimali di ratto e nella preparazione di epatociti. La collagenasi è stata usata anche nella preparazione di tessuto arterioso per lo studio dei prodotti finali della glicosilazione avanzata. Questo enzima è stato esaminato ai fini del rilascio di epatociti a una concentrazione di circa 1 mg/mL. Le concentrazioni per la digestione variano da 0,1 a 5 mg/mL.
Idoneo per l′impiego nella preparazione di sospensioni di cellule singole per successivo sequenziamento.
- isolamento delle cellule del Sertoli;
- confronto tra metodi enzimatici;
- preparazione di tessuti da sottoporre a immunocitochimica;
- estrazione di liquido seminale da testicoli;
- preparazione di sospensioni di cellule singole;
- immunofluorescenza
Questo prodotto è adatto per disaggregare tumori umani, tessuto renale di topo, tessuto cerebrale umano fetale e adulto, polmone e molti altri tessuti epiteliali. Si è dimostrato efficace anche in studi di perfusione epatica e renale, nella digestione del pancreas, nell′isolamento di cellule epatiche non parenchimali di ratto e nella preparazione di epatociti. La collagenasi è stata usata anche nella preparazione di tessuto arterioso per lo studio dei prodotti finali della glicosilazione avanzata. Questo enzima è stato esaminato ai fini del rilascio di epatociti a una concentrazione di circa 1 mg/mL. Le concentrazioni per la digestione variano da 0,1 a 5 mg/mL.
Idoneo per l′impiego nella preparazione di sospensioni di cellule singole per successivo sequenziamento.
Azioni biochim/fisiol
Il prodotto a base di collagenasi è una miscela di enzimi secreti da C. histolyticum e i diversi prodotti si differenziano in base ai rispettivi rapporti tra i 10-18 componenti presenti negli enzimi secreti. I componenti principali sono due collagenasi, la clostripaina e una proteasi neutra. L′azione sinergica di questi enzimi degrada il collagene e altro materiale intracellulare. Per un′efficace liberazione delle cellule dal tessuto è necessaria l′azione di entrambe le collagenasi e della proteasi neutra. Diversi tipi di collagene costituiscono i substrati naturali della collagenasi.
La collagenasi è attivata da quattro grammi atomo di calcio per mole di enzima. È inibita da etilen-glicol-bis(beta-amminoetil etere) - acido N, N, N′,N′-tetraacetico, beta-mercaptoetanolo, glutatione, acido tioglicolico e 8-idrossichinolina.
Avvertenza
Questo prodotto come fornito è stabile per un anno a -20 °C. Non c′è perdita in FALGPA o nell′attività della proteasi in 30 giorni a 37 °C, 50 °C e -20 °C. Soluzioni di collagenasi grezza sono stabili se congelate rapidamente in aliquote (a 10 mg/mL) e mantenute congelate a -20 °C. Ulteriori cicli di congelamento-scongelamento danneggerebbero la soluzione. Il prodotto tenuto in ghiaccio conserva il 100% di attività per 7 ore.
Definizione di unità
Una unità di digestione del collagene (CDU) libera peptidi da collagene proveniente da tendine d′Achille bovino equivalente in colore ninidrina a 1,0 μmole di leucina in 5 ore a pH 7,4 a 37 °C in presenza di ioni calcio. Una unità di idrolisi FALGPA idrolizza 1,0 μmole di furilacriloil-Leu-Gly-Pro-Ala per minuto a 25 °C. Una unità di proteasi neutra idrolizza caseina e produce colore equivalente a 1,0 μmole di tirosina per 5 ore a pH 7,5 a 37 °C. Una unità di clostripaina idrolizza 1,0 μmole of BAEE per minuto a pH 7,6 a 25 °C in presenza di DTT.
Nota sulla preparazione
Questa collagenasi è ottenuta filtrando la coltura di Clostridium histolyticum. Si ritiene che il filtrato della coltura contenga almeno 7 diverse proteasi con pesi molecolari compresi fra 68 e 130 kDa. Il prodotto appartiene al Tipo I-A. Solitamente le soluzioni si preparano a concentrazioni di 1-2 mg/mL in tampone TESCA, con 50 mM TES, 0,36 mM cloruro di calcio, pH 7,4 a 37 °C.
Substrato
N° Catalogo
Descrizione
Determinazione del prezzo
Avvertenze
Danger
Indicazioni di pericolo
Consigli di prudenza
Classi di pericolo
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
Organi bersaglio
Respiratory system
Codice della classe di stoccaggio
11 - Combustible Solids
Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)
WGK 1
Punto d’infiammabilità (°F)
Not applicable
Punto d’infiammabilità (°C)
Not applicable
Dispositivi di protezione individuale
dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves
Certificati d'analisi (COA)
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Protocolli
To measure collagenase activity, N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala is used in a continuous spectrophotometric rate determination at 345 nm. Collagenase hydrolyzes collagen peptide bonds.
Il team dei nostri ricercatori vanta grande esperienza in tutte le aree della ricerca quali Life Science, scienza dei materiali, sintesi chimica, cromatografia, discipline analitiche, ecc..
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